T7 DNA聚合酶(未修饰) 工具酶

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百奥莱博专业生产销*(代"售")T7 DNA聚合酶(未修饰) 工具酶，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：T7 DNA聚合酶(未修饰) 工具酶
规格：300U
产地：国产|进口
英文名：T7 DNA Polymerase(Unmodified)
编号：BTN130618
T7 DNA聚合酶催化在感染过程中T7噬菌体DNA的复制。该蛋白二聚体具有两种催化活性，DNA聚合酶活性和较强的3´→5´核酸外切酶活性。由于该酶具有高保真性和快速延伸速率，因而特别适于长链DNA模板的复制。T7 DNA聚合酶由两个亚基组成，T7基因5蛋白(80kDa)和E.coli硫氧还蛋白(1kDa)。这两个蛋白分别克隆并在E.coli的T7表达系统过表达。

产品特点：
1．缺口填充(无链置换活性)。
2．定点突变中第二链的合成。
3．具有快速延伸的特性，故无需长时间温育。
4．T7 DNA聚合酶不能用于DNA测序。

产品组成：

 

成分	规格
T7 DNA聚合酶(10U/μL)	30μl
10×T7 DNA聚合酶反应缓冲液	1.5ml
BSA溶液(10mg/mL)	0.25ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：对于不同的实验，各成分用量及反应时间可能不同，请根据具体实验具体调整。1×T7 DNA聚合酶反应缓冲液，加入0.05mg/mL BSA和自备的dNTPs，37℃温育。

热失活：75℃下反应20分钟。

单位定义(粘性末端活性单位)：1 单位指在37℃条件下反应30分钟，能使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物中所需的酶量。

贮存液成分：50mM KPO4，1mM DTT，0.1mM EDTA，50%甘油，pH7.0@25℃。

更多有关T7 DNA聚合酶(未修饰) 工具酶的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
ARB10835 人抗纺锤体抗体(MSA)代做ELISA实验 Human mitotic spindle appaRatus antibody,msa ELISA KIT
十二烷基硫*(代"酸")* Chlorophyll B 2044-56-6
D-鸟*酸盐*(代"酸")盐 Caffeic acid 16682-12-5
F030702 BIOTIN标记小鼠抗乙肝e抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBeAg*BIOTIN
马尿酰-组*酰-亮*酸 Choline oxidase 207386-83-2
D-酪*酸甲酯盐*(代"酸")盐 EAH Sepharose 4B 3728-20-9
ARB12475 大鼠前列腺素E1(PGE1)酶免分析 Rat prostaglandin e1,pg-e1 ELISA KIT
ARB10011 人17羟孕酮(17-OHP)elisa检测说明书 Human 17-hydroxyprogesterone,17-ohp ELISA KIT
D0302 脱纤维绵羊血(无菌 袋装) 500ml/1000ml/2000ml
ARB13426 鸡三碘甲状腺原*酸(T3)酶联免疫定量检测 Chicken tri-iodothyronine,t3 ELISA KIT
硫代乳酸 3-Nitrobenzene sulfonic acid sodiu*(代"m") salt 107-96-0
A0401 标准新生牛血清(无菌采制) 100ml/200ml/500ml
BL1164 植物基因组DNA提取试剂盒
T7 DNA聚合酶(未修饰) 工具酶关键词：T7 DNA Polymerase(Unmodified),BTN130618,T7 DNA聚合酶(未修饰)

PY02-041  普通肉汤培养基  250克  
十二烷基三甲基*化铵 4-Nitrophenyl palmitate 1119-94-4
ARB12483 大鼠前降*素(PCT)Elisa方法检测 Rat procalcitonin，pct ELISA KIT
BL1155 质粒大量提取试剂盒
2-羟基-1-*甲*(代"酸") COMT 2283-08-1
黄素腺嘌呤二核苷酸二*盐 PUC19 84366-81-4
ARB10171 人T细胞特异性鸟苷三磷酸酶(Tgtp)含量检测 Human t-cell specific gtpase,tgtp ELISA KIT
ARB12063 大鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)Elisa方法检测 Rat macrophage inflammatory protein 2,mip-2 ELISA KIT
F030439 胶体金标记山羊抗人IgG Fab抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG Fab*GOLD
143-74-8 *酚红 Phenolsulfonphthalein
BTN130597 萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒 Firefly Luciferase Assay Kit
PY02-353  金氏(King,sB)培养基基础  250克  
F030606 FITC标记山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a*FITC
ARB14076 牛肾上腺素(EPI)ELISA检测服务 
ARB13463 鸡肌红蛋白(MYO/MB)elisa测定使用说明书 Chicken myoglobin,myo/mb ELISA KIT
*霉素 Imidazole 56-75-7
BTN80101 一管式病毒DNA-RNAOUT One-Tube Viral DNA-RNAOUT
KT109 多重PCR扩增试剂盒
BTN130907 脱脂奶粉(杂交专用) Nonfat Milk Powder
L-天冬酰胺一水 IUPAC 5794-13-8
F030638 FITC标记山羊人IgM抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*FITC
T7 DNA聚合酶(未修饰) 工具酶关键词：T7 DNA Polymerase(Unmodified),BTN130618,T7 DNA聚合酶(未修饰)


·一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装
编号：BTN80810
英文名称：One-Stop SDS-PAGE Pack
规格：30次
SDS-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是目前电泳法变性分离蛋白质的主要方法，但是单独配制各种溶液十分繁琐，为此我们公司开发了本产品。

产品特点：
1．一站式，即开即用，用户不需单独准备各种成分，十分方便。
2．安全，将实验人员接触粉末状丙*(代"烯")酰胺的可能降到最低。
3．灵活，分开提供的丙*(代"烯")酰胺和甲叉双丙*(代"烯")酰胺便于配制各种比例和浓度的SDS-PAGE，满足分离各种大小不同的蛋白质的要求。
4．使用改良的浓缩胶缓冲液，由于其含有染料，制备的浓缩胶呈蓝色，便于上样时识别加样孔。
5．电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。

产品组成：

成分	规格
丙*(代"烯")酰胺干粉	60g
甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉	3g
分离胶缓冲液，4×	200ml
浓缩胶缓冲液，4×(含染料)	100ml
TEMED	1.5ml
过硫*(代"酸")铵(干粉)	1g
SDS-PAGE上样液，5×	1套(1mL)
SDS-PAGE电泳液，1×(干粉)	1套(20L)
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，但TEMED和5×SDS-PAGE上样液需低温运输，分别在4℃和-20℃有效期一年。

自备试剂：去离子水。

使用方法：
1．第一次使用本产品时需先配制30%丙*(代"烯")酰胺溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水，充分摇晃直到溶解即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺溶液(用手大约摇10-20分钟)。
2．第一次使用本产品时还需配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液(30% AB溶液，下同): 不同实验需要加入不同比例的甲叉双丙*(代"烯")酰胺。对SDS-PAGE电泳，丙*(代"烯")酰胺与甲叉双丙*(代"烯")酰胺比例一般在19:1左右，因为此时PAGE胶的孔径最小，分辨率最高。制备方法是将3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉加入到200mL上步配好的30%丙*(代"烯")酰胺溶液中(注意：甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉有神经毒性，避免吸入粉末)。配好的30%ＡＢ溶液最好4℃避光保存并在１月内用完。
3．根据平板的面积和胶的厚度估计需要配制的浓缩胶和分离胶的体积。并根据要分离的蛋白质的大小确定选择浓缩胶和分离胶的浓度，参考下表：

蛋白质大小范围(kD)	最佳浓缩胶浓度	最佳分离胶浓度
15-45	4%	15%
15-60	4%	12.5%
18-75	4%	10%
30-120	4%	7.5%
60-200	不需要	5%

注：如果上样体积少于10μL，可以不需要浓缩胶。
4．配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵)：称0.1克过APS干粉到1mL去离子水中，摇晃溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
5．配制分离胶：在一个25mL的三角瓶中，先按下表的用量加入水、30%ＡＢ溶液和4×分离胶缓冲液。以下是配制10mL胶的用量，更大体积则各成分用量需按比例增加。丙*(代"烯")酰胺溶液有神经毒性，一定要戴手套操作。

胶浓度	用量(单位：mL)
	水	30%AB溶液	4×分离胶配胶液
5%	5.83	1.67	2.50
6%	5.50	2.00	2.50
7%	5.17	2.33	2.50
7.5%	5.00	2.50	2.50
8%	4.83	2.67	2.50
9%	4.50	3.00	2.50
10%	4.17	3.33	2.50
11%	3.83	3.67	2.50
12%	3.50	4.00	2.50
13%	3.17	4.33	2.50
14%	2.83	4.67	2.50
15%	2.50	5.00	2.50
16%	2.17	5.33	2.50

6．配制浓缩胶(一般使用4%的浓度)：在一个25mL的三角瓶中，先按下表的用量加入水、30%A B溶液和4×浓缩胶缓冲液。以下是配制10mL 4%浓缩胶的用量，丙*(代"烯")酰胺溶液具有神经毒性，一定要戴手套操作。

胶浓度	用量(mL)
	水	30%AB溶液	4×浓缩胶缓冲液(含蓝色染料)
4%	6.17	1.33	2.50

7．将分离胶和浓缩胶溶液摇晃混匀，抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应，不去除将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
8．分别加入50μL 10%APS和30-50μL TEMED(这是配制10mL分离胶和浓缩胶的用量，更大体积的胶则用量需按比例增加)，迅速摇匀。
9．先灌分离胶，在胶的液面距离顶部1.5 cm的时候，停止灌胶。
10．由于分离胶比重较大，可以立即在上面灌浓缩胶，但灌注时必须小心，不要破坏分离胶和浓缩胶的液面，在浓缩胶液面达到顶部时停止灌胶，插入梳子，室温聚合30-60分钟。如果不能做到小心灌浓缩胶，则必须待分离胶室温聚合30-60分钟后再灌制。
11．拔出梳子，用1×SDS-PAGE电泳液冲洗加样孔。
12．将凝胶板固定在电泳装置上，往上槽和下槽加入足够的1×SDS-PAGE电泳液。本产品提供20升的SDS-PAGE电泳液干粉，将所有干粉溶解在2 L水中即得10×SDS-PAGE电泳液，用时再稀释成1×工作液。
13．在蛋白质样品中加入5×SDS-PAGE上样液(4μL样品中加1μL上样液)，100℃煮沸3～5分钟。短暂离心，取上清上样。
14．先用10 mA的电流电泳(对0.75mm厚×14cm×14cm的胶)直到染料进入从浓缩胶进入分离胶。
15．将电流增加到15 mA，直到染料进入分离胶底部时终止电泳，取出凝胶进行后续的实验处理。

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