Bst X DNA聚合酶

特别提示：包括Bst X DNA聚合酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Bst X DNA聚合酶
英文名称：Bst X DNA Polymerase
产品货号：WH0165
产品规格：8kU|40kU

Bst X DNA聚合酶是从Geobacillus中克隆得到的耐热DNA聚合酶。本产品缺失了5"-3"和3"-5"的核酸外切酶活性，比传统链置换酶（Manta 1.0）具有更强的链置换活性,从而使得本产品在等温扩增实验中的表现更加的出色。本产品是通过大肠杆菌表达的重组酶。分子量大小约为66.5kDa。本制品浓度为40U/μl。

产品特点：
·酶比活性高，反应重复性好。
·连接快速，10min即可完成连接反应，省时省力。
·适用性广，无论是粘性末端还是平末端，本产品均有较高的连接活性；无论是DNA连接还是RNA连接，本产品都有很好的适用性。
·热稳定性高，zuì适反应温度为60~70℃。
·抗逆性好，对非离子表面活性剂和高盐环境的耐受性高。
·链置换活性高，无核酸外切酶活性

适用范围：
1．在二代测序（NGS）应用中，主要用于文库构建过程中的链等温置换反应。比如IonTorrent平台DNA文库构建中的接头切刻平移。
2.其他等温扩增实验。

产品组成：

组分	WH0165-1	WH0165-2
Bst X DNA Polymerase	8,000U	40,000U
10×Bst X Reaction Buffer	1.5ml	5×1.5ml
100mM MgSO4 Solution	1.5ml	5×1.5ml

储存条件：-25℃～-15℃保存。

贮存液成分：10mM Tris-HCl，50mM KCl，0.1μM ATP，0.1mM EDTA，1mM DTT，0.1% Triton X-100，50%甘油。

单位定义：1单位活力定义为在65℃，30 min内，将10nmol dNTP掺入到酸不溶物质中所需的酶量。

质量控制：

性质	描述
蛋白纯度	＞99%
酶活性	400,000U/mg
单链核酸外切酶	4000U酶中，＜5.0%
双链核酸外切酶	4000U酶中，＜1.0%
双链核酸内切酶	4000U酶中，未检出
宿主基因组污染	4000U酶中，＜10拷贝

使用方法：
在NGS文库构建过程中，一般按终浓度1.5~3 U/μl的量加入Bst X DNA聚合酶。也可根据实验具体情况来调整用量。
反应条件：65℃，30 min。
灭活条件：80℃，10min。
注：1×Bst X Reaction Buffer中镁离子浓度为2 mM，根据不同的实验，镁离子的反应浓度可在2~10 mM之间调整。

除了Bst X DNA聚合酶,，我公司还供应以下相关产品：



名称：T3 RNA聚合酶
货号：YT408
规格：500U
本酶来源于由大肠杆菌表达，表达基因为嗜菌体T3 RNA Polymerase基因，是一种高度特异识别T3启动子序列的DNA依赖的5"→3"RNA聚合酶。T3 RNA Polymerase可以催化单链或双链DNA T3启动子下游NTP的掺入，合成与T3启动子下游的模板DNA互补的RNA。

特点：T3 RNA Polymerase可以识别修饰的NTP，例如生物素标记、地高*标记、荧光素标记的NTP，可以用于各种标记RNA的合成。同时对于T3启动子有高度的特异性。

用途：用于RNA合成，合成的RNA可以用于或用作：杂交探针，基因组DNA序列分析，核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay)，反义RNA合成，作为体外翻译的RNA模板，RNA剪接研究的底物，RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用，核酸扩增分析，siRNA、miRNA等小RNA。

活性定义： 37℃60分钟内，催化1nmol AMP掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，6mM MgCl2，10mM DTT，2mM spermidine，0.5mM NTP，0.6MBq/ml[3H]-ATP，20μg/ml plasmid DNA containing the specific T3 RNA Polymerase promoter sequence。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。
酶储存溶液：50mM Tris-HCl(pH8.0)，150mM NaCl，5mM DTT，0.1mg/ml BSA，0.5mM Elugent，50% glycerol。
Transcription Buffer(5X)：200mM Tris-HCl(pH7.9 at 25℃)，30mM MgCl2，50mM DTT，50mM NaCl，10mM spermidine。
失活或抑制：70℃加热10分钟可使T3 RNA Polymerase失活。加入适量EDTA也可以使T3 RNA Polymerase失活。螯合剂、浓度大于150mM的钠、钾或铵盐可以显著抑制T3 RNA Polymerase的活性。

储存条件：-20℃

名称：EarI限制性内切酶
货号：SV0329
规格：2500U|500U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 10%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。

名称：PflMI限制性内切酶
货号：SV0588
规格：5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 0%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 50%
特性:
重组酶、省时酶。
反应条件:
BalbBuffer 3.1，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dcm甲基化敏感。
注意事项:
切割 λDNA 上特定 PflMl 位点效率明显低于其它底物(有关底物位点优势效应详情请联系我们咨询)。
甘油浓度＞5% 条件下可能出现星号活性。

名称：Sau96I限制性内切酶
货号：SV0672
规格：5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
5,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dcm 和哺乳动物 CpG甲基化敏感。

名称：StyD4I限制性内切酶
货号：SV0738
规格：1KU|200U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
5,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dcm 和哺乳动物 CpG甲基化敏感。
注意事项:
StyD4l是ScrFl的不完全同裂酶

名称：Nt.BsmAI切刻内切酶
货号：SV0797
规格：2500U|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
5,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。

名称：微球菌核酸酶
货号：SV1069
规格：320000gel U
特性:
蛋白质制备中降解核酸
体外翻译
在非机械细胞裂解液制备时降低细胞裂解液的粘性
染色质结构分析
快速 RNA 测序
ChIP 分析
概述:
微球菌核酸酶来源于金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），是一种非特异性的核酸内切酶和核酸外切酶。该酶从重组 E. coli 菌株纯化得到，可消化双链、单链、环化以及线性的核酸。在 pH 7.0-10.0 的范围内，微球菌核酸酶均有活性，无论对于 DNA 底物还是 RNA 底物，其zuì适 pH 值均为 9.2。微球菌核酸酶偏向于切割富含腺苷酸、脱氧腺苷酸或胸腺苷酸的底物。酶切 DNA 和 RNA 底物产生带有 3´ 磷酸的单核苷酸和二核苷酸。
来源:
重组 E. coli 菌株，含有微球菌核酸酶（GeneID:3238436）和麦芽糖结合蛋白（MBP）的融合基因。融合蛋白去除 MBP 并经纯化获得微球菌核酸酶。
反应条件:
1X 微球菌核酸酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl（pH 7.9 @ 25℃），5 mM CaCl2]，加入 100 μg/ml BSA，37℃ 温育。
质保声明:
微球菌核酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有zuì高的活性和纯度。详情请联系我们咨询。
单位定义:
（Kunitz 单位）1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内催化生成能在 260 nm 处增加 1 个 OD 值的酸溶性寡核苷酸所需的酶量。
（琼脂糖凝胶单位）1 单位指 37℃ 条件下，15 分钟内消化 1 μg Lambda 基因组 DNA，使低分子量 DNA 片段（100-400 bp）在 1.2% 的琼脂糖凝胶上消失所需的酶量。
注意:10,000 个琼脂糖凝胶单位约等于 1,000 个Kunitz 单位。
浓度:
2 X 106 gel units/ml。
注意事项:
微球菌核酸酶的活性需要 1-5 mM Ca2+。微球菌核酸酶的活性范围为 pH 7-10，盐离子浓度:低于 100 mM。加入过量 EGTA 可使酶失活。

名称：T4 DNA Ligase
货号：HQF45
规格：400U/2000U
0.5-1ul/次
T4 DNA连接酶常用于催化双链DNA平末端或互补粘性末端之间的连接反应，也能催化双链RNA 5"-磷酸末端和3"-羟基末端间的连接。还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。以上反应均需消耗ATP。
来源：
重组蛋白质（E.coli）
活力单位定义：
• 1个Weiss 活性单位是指在ATP-PPi交换反应中，37oC、20分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量。1个Weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位(CEU)。
• 1个粘性末端连接单位：20μl反应体系(50mM Tris-HCl pH7.5，10mM MgCl2，10mM DTT，1mM ATP，25µg/ml BSA，0.12 µM(300ug/ml)的5"DNA 末端)中，在 16°C、30 分钟内50%连接HindIII 酶切的 Lambda DNA 产物所需要的酶量。
纯度：
纯度 >95%，没有检测到其他蛋白酶和核酸酶活力。
应用：
DNA平端、粘端连接或者DNA环化。
储存条件：
 冰袋运输；长期保存-20℃（12个月以上）；10x T4 DNA ligase Buffer 中含 ATP，为避免ATP的降解，建议解冻后的10x T4 DNA Ligase Buffer 分装成小包装并在-20℃保存。