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3个月
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MiaoLingBio
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淼灵生物
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1管
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文献和实验lwjssry 求含有CRE重组酶序列的载体，有如下质粒可交换，或积分交换 表达载体： pcDNA3.1(+) pcDNA3.1/GS pcDNA4HisMax B pIRES2-EGFP pAAV-IRES-hrGFP pBudCE4.1 pEGFP-C1 pEGFP-N1 pCMV-DsRed 腺病毒载体 pADeasy-1,pShuttle，包括菌种
基因，可通过 IRES 将两个目的基因相连； （ 3 ）携带干涉序列 shRNA 的穿梭质粒：首先将 H1 启动子构建到 pShuttle 质粒上，然后将目的基因克隆到 H1 启动子下游； 3 、重组腺病毒质粒构建： 携带目的基因的穿梭质粒线性化后与 Adeasy-1 共转 BJ5183 感受态细胞（电转），筛选得到重组腺病毒质粒，并经 PacI 酶切鉴定：可见目的质粒出现两条条带，分别为 3.0kb 或 4.5kb 和 >23Kb 两条条带。 将得到的重组腺病毒质粒转染 DH
病毒质粒 4. 重组穿梭载体的线性化、电转 5. 重组腺病毒质粒的判定 Page 8： 1. 重组腺病毒质粒的判定 2. 腺病毒的保存 3. 腺病毒DNA转染的观察及腺病毒的传代 4. BJ5183中质粒的提取 5. 重组腺病毒包装的判定 6. IRES表达双基因 7. BJ5183抗性 Page 9： 1. 细胞转染后观察与病毒传代 2. 阳性腺病毒质粒的转化、增殖、提取、纯化 3. 重组腺病毒质粒的判定 4. CPE与腺病毒包装判定 Page 10： 1. 重组腺
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