腺病毒之家---腺病毒专题讨论帖!
丁香园论坛
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<strong>欢迎大家光临腺病毒之家！</strong></center>
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最近，着手将本帖的目录整理了一下，这样便于大家快速找到自己需要的东西！
为了促进核酸版的发展和满足广大战友的需求，还请战友们多多提出宝贵的建议！
Page 1：
1. 电转化感受态的制备
2. 穿梭载体Pme I 线性化及回收
3. 重组腺病毒质粒的判定
4. 化学转化法同源重组
Page 2：
1. 同源重组的形式
2. 阳性重组质粒的判定
3. 重组腺病毒的包装（质粒纯化、线性化、转染）
Page 3：
1. 阳性重组质粒的判定
2. 长片段的克隆、测序
3. 重组腺病毒质粒测序
Page 4：
1. 腺病毒综述
2. 重组腺病毒流程介绍
3. 腺病毒载体系统的质粒介绍
4. 常见问题及解决方案
5. 重组穿梭载体测序引物
6. 目的基因引物设计
7. 重组腺病毒CPE图片
8. 电转化后质粒的小提
9. 腺病毒质粒转染
10. 腺病毒的扩增、保存
11. 穿梭载体线性化、电转、挑菌、质粒提取注意事项
Page 5：
1. 重组穿梭载体的构建（酶切、连接）
2. 重组腺病毒的检测鉴定
3. 阳性CPE（荧光）图片
4. 重组穿梭载体测序问题
5. 重组腺病毒质粒Pac I 线性化纯化
Page 6：
1. 重组穿梭载体的测序
2. 穿梭载体能否用于稳定表达？
3. 腺病毒表达的鉴定
4. 重组穿梭质粒的构建
5. 电转化感受态及电转化步骤
Page 7：
1. 重组腺病毒质粒的鉴定、纯化、转染
2. BJ5183（含/无pAdEasy-1）感受态制备
3. 碱裂解法提取腺病毒质粒
4. 重组穿梭载体的线性化、电转
5. 重组腺病毒质粒的判定
Page 8：
1. 重组腺病毒质粒的判定
2. 腺病毒的保存
3. 腺病毒DNA转染的观察及腺病毒的传代
4. BJ5183中质粒的提取
5. 重组腺病毒包装的判定
6. IRES表达双基因
7. BJ5183抗性
Page 9：
1. 细胞转染后观察与病毒传代
2. 阳性腺病毒质粒的转化、增殖、提取、纯化
3. 重组腺病毒质粒的判定
4. CPE与腺病毒包装判定
Page 10：
1. 重组腺病毒质粒的判定
2. 重组腺病毒质粒提取
3. 腺病毒质粒酶切、回收
4. 腺病毒收毒
5. 穿梭载体线性化
Page 11：
1. 腺病毒包装判定
2. Pac I 酶切与转染细胞密度
3. 转染、收毒、传代
Page 12：
1. 转染与病毒传代中抗生素的添加
2. 转染过程中细胞变化
3. pAdEasy-1图谱
4. 腺病毒滴度测定
5. 腺病毒载体操作手册中文版（转自网络）
6. BJ5183转化菌的挑取原则
7. 转染与传代
Page 13：
1. 转染与腺病毒包装
2. 细胞冻存
3. 腺病毒质粒纯化
4. 病毒传代
5. 病毒包装后下游工作
6. 重组质粒判定与Pac I 酶切
Page 14：
1. 腺病毒扩增
2. 腺病毒保存
3. 重组腺病毒质粒鉴定
4. 腺病毒传代
5. 腺病毒质粒酶切
Page 15：
1. 腺病毒扩增
2. 悬浮细胞感染
3. 病毒滴度较低
4. 转染时同时进行噬斑纯化
5. 磷酸钙转染
6. Pac I 酶切后回收
7. TCID50方法
8. MOI、TCID50、PFU
Page 16：
1. pShuttle-CMV图谱
2. 病毒滴度测定
3. 重组腺病毒质粒转染
4. 重组腺病毒传代
Page 17：
1. 噬斑纯化
2. Adeno-X系统腺病毒包装protocol
3. PCR鉴定重组载体的缺陷
4. Sequences of pAdTrack-CMV and pAdEasy-1
5. BJ5183中质粒提取
Page 18：
1. 重组后质粒鉴定
2. BJ5183细菌的验证
3. 腺病毒表达shRNA启动子
4. 转染后细胞死亡原因分析
5. 噬斑纯化
6. 重组腺病毒的大量增殖与分装保存
7. 穿梭载体线性化、骨架载体非线性化
8. Clontech Adeno-XTM Expression Systems 2简介
9. Manual for Adeno-X? Expression Systems 2
Page 19：
1. 腺病毒感染量（MOI）
2. Reed-Muench法计算重组腺病毒的TCID50
3. 293细胞图片
4. 腺病毒滴度
5. 收毒、接种、传代
6. Adeno-X? 腺病毒表达系统（Adeno-X? Expression Systems 2）中文操作手册
7. pSIREN-DNR-DsRed-Express
Page 20：
1. TCID50测定与pfu
2. 腺病毒表达蛋白的检测
3. 腺病毒包装及后续试验
4. 不表达荧光的腺病毒的感染剂量确定
5. 腺病毒的培养与污染
Page 21：
1. 腺病毒质粒增殖
2. MOI与pfu的换算
3. Manual for lipofectamine2000
4. 腺病毒包装用细胞
5. 收毒程序以及传代、检测
6. pDC316-EGFP-U6载体质粒与pBHGloxdeltaE13Cre腺病毒骨架质粒共转染293细胞
7. 空腺病毒构建与应用
8. mRNA转录检测
9. 转染过程中细胞的处置
Page 22：
1. 转染过程中细胞死亡
2. 病毒传代
3. pSIREN-DNR-DsRed-Express载体图谱、序列及去掉红色荧光蛋白的protocol
4. 腺病毒转染后鉴定
5. 穿梭载体亚克隆策略（酶切位点不符）
6. 腺病毒包装不成功原因分析
7. pExpress-1载体图谱
8. 腺病毒传递啊、滴度与感染试验
9. 腺病毒CsCl纯化、保存
Page 23：
1. 腺病毒CsCl纯化注意事项
2. 腺病毒体外感染细胞
3. 转染重组shuttle不能获得腺病毒
4. 腺病毒收获与增殖
5. westernblot鉴定
6. 穿梭载体亚克隆
7. 腺病毒感染最佳MOI
Page 24：
1. 表达shRNA、microRNA重组腺病毒鉴定与后续试验
2. 磷酸钙转染
3. RT-PCR和Western blot鉴定腺病毒
4. 腺病毒知识（附件）
Page 25：
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1. 电转化感受态的制备
2. 穿梭载体Pme I 线性化及回收
3. 重组腺病毒质粒的判定
4. 化学转化法同源重组
Page 2：
1. 同源重组的形式
2. 阳性重组质粒的判定
3. 重组腺病毒的包装（质粒纯化、线性化、转染）
Page 3：
1. 阳性重组质粒的判定
2. 长片段的克隆、测序
3. 重组腺病毒质粒测序
Page 4：
1. 腺病毒综述
2. 重组腺病毒流程介绍
3. 腺病毒载体系统的质粒介绍
4. 常见问题及解决方案
5. 重组穿梭载体测序引物
6. 目的基因引物设计
7. 重组腺病毒CPE图片
8. 电转化后质粒的小提
9. 腺病毒质粒转染
10. 腺病毒的扩增、保存
11. 穿梭载体线性化、电转、挑菌、质粒提取注意事项
Page 5：
1. 重组穿梭载体的构建（酶切、连接）
2. 重组腺病毒的检测鉴定
3. 阳性CPE（荧光）图片
4. 重组穿梭载体测序问题
5. 重组腺病毒质粒Pac I 线性化纯化
Page 6：
1. 重组穿梭载体的测序
2. 穿梭载体能否用于稳定表达？
3. 腺病毒表达的鉴定
4. 重组穿梭质粒的构建
5. 电转化感受态及电转化步骤
Page 7：
1. 重组腺病毒质粒的鉴定、纯化、转染
2. BJ5183（含/无pAdEasy-1）感受态制备
3. 碱裂解法提取腺病毒质粒
4. 重组穿梭载体的线性化、电转
5. 重组腺病毒质粒的判定
Page 8：
1. 重组腺病毒质粒的判定
2. 腺病毒的保存
3. 腺病毒DNA转染的观察及腺病毒的传代
4. BJ5183中质粒的提取
5. 重组腺病毒包装的判定
6. IRES表达双基因
7. BJ5183抗性
Page 9：
1. 细胞转染后观察与病毒传代
2. 阳性腺病毒质粒的转化、增殖、提取、纯化
3. 重组腺病毒质粒的判定
4. CPE与腺病毒包装判定
Page 10：
1. 重组腺病毒质粒的判定
2. 重组腺病毒质粒提取
3. 腺病毒质粒酶切、回收
4. 腺病毒收毒
5. 穿梭载体线性化
Page 11：
1. 腺病毒包装判定
2. Pac I 酶切与转染细胞密度
3. 转染、收毒、传代
Page 12：
1. 转染与病毒传代中抗生素的添加
2. 转染过程中细胞变化
3. pAdEasy-1图谱
4. 腺病毒滴度测定
5. 腺病毒载体操作手册中文版（转自网络）
6. BJ5183转化菌的挑取原则
7. 转染与传代
Page 13：
1. 转染与腺病毒包装
2. 细胞冻存
3. 腺病毒质粒纯化
4. 病毒传代
5. 病毒包装后下游工作
6. 重组质粒判定与Pac I 酶切
Page 14：
1. 腺病毒扩增
2. 腺病毒保存
3. 重组腺病毒质粒鉴定
4. 腺病毒传代
5. 腺病毒质粒酶切
Page 15：
1. 腺病毒扩增
2. 悬浮细胞感染
3. 病毒滴度较低
4. 转染时同时进行噬斑纯化
5. 磷酸钙转染
6. Pac I 酶切后回收
7. TCID50方法
8. MOI、TCID50、PFU
Page 16：
1. pShuttle-CMV图谱
2. 病毒滴度测定
3. 重组腺病毒质粒转染
4. 重组腺病毒传代
Page 17：
1. 噬斑纯化
2. Adeno-X系统腺病毒包装protocol
3. PCR鉴定重组载体的缺陷
4. Sequences of pAdTrack-CMV and pAdEasy-1
5. BJ5183中质粒提取
Page 18：
1. 重组后质粒鉴定
2. BJ5183细菌的验证
3. 腺病毒表达shRNA启动子
4. 转染后细胞死亡原因分析
5. 噬斑纯化
6. 重组腺病毒的大量增殖与分装保存
7. 穿梭载体线性化、骨架载体非线性化
8. Clontech Adeno-XTM Expression Systems 2简介
9. Manual for Adeno-X? Expression Systems 2
Page 19：
1. 腺病毒感染量（MOI）
2. Reed-Muench法计算重组腺病毒的TCID50
3. 293细胞图片
4. 腺病毒滴度
5. 收毒、接种、传代
6. Adeno-X? 腺病毒表达系统（Adeno-X? Expression Systems 2）中文操作手册
7. pSIREN-DNR-DsRed-Express
Page 20：
1. TCID50测定与pfu
2. 腺病毒表达蛋白的检测
3. 腺病毒包装及后续试验
4. 不表达荧光的腺病毒的感染剂量确定
5. 腺病毒的培养与污染
Page 21：
1. 腺病毒质粒增殖
2. MOI与pfu的换算
3. Manual for lipofectamine2000
4. 腺病毒包装用细胞
5. 收毒程序以及传代、检测
6. pDC316-EGFP-U6载体质粒与pBHGloxdeltaE13Cre腺病毒骨架质粒共转染293细胞
7. 空腺病毒构建与应用
8. mRNA转录检测
9. 转染过程中细胞的处置
Page 22：
1. 转染过程中细胞死亡
2. 病毒传代
3. pSIREN-DNR-DsRed-Express载体图谱、序列及去掉红色荧光蛋白的protocol
4. 腺病毒转染后鉴定
5. 穿梭载体亚克隆策略（酶切位点不符）
6. 腺病毒包装不成功原因分析
7. pExpress-1载体图谱
8. 腺病毒传递啊、滴度与感染试验
9. 腺病毒CsCl纯化、保存
Page 23：
1. 腺病毒CsCl纯化注意事项
2. 腺病毒体外感染细胞
3. 转染重组shuttle不能获得腺病毒
4. 腺病毒收获与增殖
5. westernblot鉴定
6. 穿梭载体亚克隆
7. 腺病毒感染最佳MOI
Page 24：
1. 表达shRNA、microRNA重组腺病毒鉴定与后续试验
2. 磷酸钙转染
3. RT-PCR和Western blot鉴定腺病毒
4. 腺病毒知识（附件）
Page 25：
