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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
pShuttle-IRES-hrGFP-1
- 库存:
大量
- 供应商:
钰博生物
- 规格:
1ug/5ug
载体基本信息
| 出品公司: | Ybscience |
|---|---|
| 载体名称: | pShuttle-IRES-hrGFP-1 |
| 质粒类型: | 腺病毒表达载体,哺乳动物细胞表达载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 低拷贝 |
| 启动子: | CMV |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 8.9 kb |
| 5' 测序引物及序列: | pShuttle-IRES-hrGFP-1-F: CTCACGGGGATTTCCAAGTC |
| 3' 测序引物及序列: | pShuttle-IRES-hrGFP-1-R: ATGCAGTCGTCGAGGAATTG |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | 卡那 |
| 备注: | 载体内包含有IRES序列和hrGFP序列。 |
| 稳定性: | / |
| 组成型: | -- |
| 病毒/非病毒: | 腺病毒 |
载体质粒图谱和多克隆位点信息



载体简介
Two additional shuttle vectors, pShuttle-IRES-hrGFP-1 (Catalog #240081) and pShuttle-IRES-hrGFP-2 (Catalog #240082) are available separately. Both of these vectors contain the CMV promoter and a dicistronic expression cassette in which the multiple cloning site (MCS) is followed by the EMCV-IRES, which directs translation of a humanized recombinant green fluorescent protein (hrGFP) from a novel marine organism as a second open reading frame. This design allows the expression of the gene of interest (up to 5.2 kb) to be monitored at the single-cell level due to expression of the hrGFP on the same transcript. The gene of interest may be fused to three contiguous copies of either the FLAG® epitope (pShuttle-IRES-hrGFP-1) or the HA epitope (pShuttle-IRES-hrGFP-2).
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文献和实验lwjssry 求含有CRE重组酶序列的载体,有如下质粒可交换,或积分交换 表达载体: pcDNA3.1(+) pcDNA3.1/GS pcDNA4HisMax B pIRES2-EGFP pAAV-IRES-hrGFP pBudCE4.1 pEGFP-C1 pEGFP-N1 pCMV-DsRed 腺病毒载体 pADeasy-1,pShuttle,包括菌种
基因,可通过 IRES 将两个目的基因相连; ( 3 )携带干涉序列 shRNA 的穿梭质粒:首先将 H1 启动子构建到 pShuttle 质粒上,然后将目的基因克隆到 H1 启动子下游; 3 、重组腺病毒质粒构建: 携带目的基因的穿梭质粒线性化后与 Adeasy-1 共转 BJ5183 感受态细胞(电转),筛选得到重组腺病毒质粒,并经 PacI 酶切鉴定:可见目的质粒出现两条条带,分别为 3.0kb 或 4.5kb 和 >23Kb 两条条带。 将得到的重组腺病毒质粒转染 DH
cvn:请大家分析下我的问题:本人用六孔板共转染(pAAV-IRES-hrGFP、pRC、phelper)包装空载体腺相关病毒,转染后48小时在荧光显微镜下看,一个视野内约有80%的绿色荧光。转染后第三天,收病毒。再将病毒原液感染种在六孔板内293细胞,48小时后在荧光显微镜下未见绿色荧光蛋白。上述的过程,本人重复了三次。均未见绿色荧光蛋白。现在本人感到疲惫。请大伙帮忙分析分析。谢谢!本人用脂质体2000转染,方法是:①转染前24小时种板,②转染前一小时换液(用无血清的DMEM或有
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