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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
pShuttle-IRES-hrGFP-2
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
1ug
质粒名称: pShuttle-IRES-hrGFP-2
其他名称:
质粒大小(bp): 8.9 kb
抗性: Kanamycin (卡那霉素)
质粒类型:腺病毒载体;双顺反子载体;荧光报告载体
是否病毒:腺病毒(adenovirus)
启动子: CMV
稳转或瞬转:稳表达
组成型或诱导性:组成型
表达水平: 低拷贝
蛋白标签:
5′ 测序引物及序列:pShuttle-IRES-hrGFP-1-F: CTCACGGGGATTTCCAAGTC
3′ 测序引物及序列:pShuttle-IRES-hrGFP-1-R: ATGCAGTCGTCGAGGAATTG
GenBank号:
其他属性:载体内包含有IRES序列和hrGFP序列
质粒图谱:

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文献和实验lwjssry 求含有CRE重组酶序列的载体,有如下质粒可交换,或积分交换 表达载体: pcDNA3.1(+) pcDNA3.1/GS pcDNA4HisMax B pIRES2-EGFP pAAV-IRES-hrGFP pBudCE4.1 pEGFP-C1 pEGFP-N1 pCMV-DsRed 腺病毒载体 pADeasy-1,pShuttle,包括菌种
基因,可通过 IRES 将两个目的基因相连; ( 3 )携带干涉序列 shRNA 的穿梭质粒:首先将 H1 启动子构建到 pShuttle 质粒上,然后将目的基因克隆到 H1 启动子下游; 3 、重组腺病毒质粒构建: 携带目的基因的穿梭质粒线性化后与 Adeasy-1 共转 BJ5183 感受态细胞(电转),筛选得到重组腺病毒质粒,并经 PacI 酶切鉴定:可见目的质粒出现两条条带,分别为 3.0kb 或 4.5kb 和 >23Kb 两条条带。 将得到的重组腺病毒质粒转染 DH
cvn:请大家分析下我的问题:本人用六孔板共转染(pAAV-IRES-hrGFP、pRC、phelper)包装空载体腺相关病毒,转染后48小时在荧光显微镜下看,一个视野内约有80%的绿色荧光。转染后第三天,收病毒。再将病毒原液感染种在六孔板内293细胞,48小时后在荧光显微镜下未见绿色荧光蛋白。上述的过程,本人重复了三次。均未见绿色荧光蛋白。现在本人感到疲惫。请大伙帮忙分析分析。谢谢!本人用脂质体2000转染,方法是:①转染前24小时种板,②转染前一小时换液(用无血清的DMEM或有
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