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3个月
- 英文名:
MiaoLingBio
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1000
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淼灵生物
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1管
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文献和实验水仙子2005 我想分别构建FOXO1 和 SIRT1基因启动子/luciferase报告质粒,用于研究X基因是否能够调控这两个启动子。但是不知道该扩增两个基因启动子区域的哪一段插入pGL3(promega)中。 另外,promega的pGL3有pGL3-basic和pGL3-enhancer,该选择哪个? 水仙子2005 继续求助 sxd5266 pGL3-basic 没有SV
是我自己构建的PGL-3报告质粒都却都和PGL-3-Basic读数差不多。构建的质粒是经过测序验证的,而且抽出的质粒测OD值和跑胶也是没有问题的。实在不知道问题出在哪里,请各位高手帮忙瞧一眼,那些方面有可能是问题? 先谢谢了!!:) bacchante 没看明白,但是我觉得关于luciferase系统,似乎它们都有自己的内参,不用peGFP来看转染效率吧。 另外,你的promoter是不是组织特异性的啊,在这个细胞系里面,反式元件没有
、RNA剪接研究。 萤光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶,一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响,而双报告基因则通过共转染的“对照”作为内参为试验提供一基准线,从而可以在最大程度上减小细胞活性和转染效率等外在因素对实验的影响,使得数据结果更为可信。Dual-Luciferase®双萤光素酶报告基因检测系统在细胞中同时表达萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶,两者没有种源同源性并对应不同的反应底物,故而没有交叉干扰。得益于超强的光
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