ALH329型TA克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术

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ALH329型TA克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)现货供应由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多TA克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：ALH329型TA克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)现货供应
编号：ALH329
规格：20次|80次
品牌：百奥莱博
英文名：Zero Background TOPO TA Cloning Kit(with MCS)
本试剂盒采用了拓扑异构酶可以在瞬间（几秒钟-几分钟）、高效（接近100%）连接DNA片段的原理，这与和传统的T4连接酶原理不同。

试剂盒组份(20次)：
TOPO-Ta Vector(30ng/μl)—————20μl
1000bp Control（30ng/μl）————5μl
10×Enhancer———————————20μl

产品特点：
1. 可以在瞬间（几秒钟-几分钟）完成连接。
2. 无需冰浴和热休克，室温5分钟内完成转化；无需1小时复苏，只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板只需15-20分钟。
3. 无自连、零背景，无需繁琐蓝白斑筛选，见到长出的克隆便是有插入的（接近100%）。
4. 可以连接长达10kb片段（即使连接5kb片段，挑10个菌落，至少8个是有插入的），是目前世界上最简单、最快速、零背景免筛选的TOPO TA克隆载体。

储存条件：-20℃，有效期12个月。

本品别名：TA克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)|TA载体连接试剂盒

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·琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
编号：ALH096
英文名称：Agarose gel DNA Recovery Kit
规格：50次|100次|200次
本试剂盒适用于琼脂糖凝胶DNA的纯化回收。在高离序盐存在的情况下，DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(100次)：
平衡液——————————10ml
溶胶液DD—————————50ml×2
漂洗液WB—————————25ml
洗脱缓冲液EB———————15ml
吸附柱和收集管(2ml)-———100套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化*和高*酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.溶胶液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
4.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
5.快速、方便，不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。

注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 溶胶液中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 回收纯化的DNA片段一般在100bp到40kb之间，过长、过短片段的回收效率迅速降低。
4. 回收DNA的量和起始DNA的量、洗脱体积、DNA片断大小有关。一般1-15μg，100bp-5kb的DNA片段，回收率可高达85％。
5. 切胶回收时，紫外灯观察对DNA片段有损坏作用，应该尽可能使用能量低的长波紫外线，并且尽可能的缩短紫外线下处理的时间。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA， 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保pH大于7.5， pH过低影响洗脱效率。用水洗脱，DNA片段应该保存在－20℃。DNA片段如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。


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·PAGE胶微量蛋白染色试剂盒(可脱色)
编号：ALH378
英文名称：PAGE protein staining kit
规格：250ml|1000ml
本试剂盒适用于快速检测PAGE胶上的微量蛋白质，它的敏感度几乎可以达到银染的敏感度（ng级水平或者更高），但是比银染简单、稳定、重复性高。染色液所含有的成份和PAGE胶中的SDS、TRIS共同作用形成特殊复合物沉淀在胶基质中形成白色的背景染色。有蛋白的地方，蛋白质的存在干扰这种复合物沉淀的形成，因此蛋白条带仍旧保持透明无色，在黑色的背景下，就可以清晰见到透明的蛋白条带。

试剂盒组份(250ml)：
染色液—————————250ml
显色液—————————250ml
脱色液—————————125ml

产品特点：
1.电泳后采用两个简单步骤，15分钟内完成全部过程。
2.环保染料，完全不含有各种醋酸、甲醇等有毒有刺激性成份。
3.蛋白条带为不透明白背景上的透明条带，灵敏度为传统方法的10倍以上（纳克级或者更高）。
4.可逆染色，完全不影响蛋白性质，不影响抗体抗原结合性质。如果需要可以脱色15分钟后继续做蛋白电洗脱（切下特定条带脱色后洗脱下来可以用来做抗原生产使用）、定量、Western blot实验、质谱分析、N末端测序等。
5.在普通双蒸水中可以保留一年以上，不退色，缩小，蛋白质不扩散，一年后依然可以用来做Western blot等蛋白微分析。

操作步骤：
1. 染色
1) 电泳后用清水冲洗胶30-60 秒钟，然后将PAGE 胶放置于一个透明的玻璃培养皿中，根据胶大小倒入适量的染色液（确保胶都浸没在染色液内，20-25ml 足够染色一块普通的8×10cm mini 胶了），摇床上轻摇染色10-15 分钟(10-15%胶15 分钟，5-7.5%胶可缩短时间到10 分钟)。
2) 倒弃染色液，加入20-25ml 的显色液，立刻同时用手轻摇胶显色0.5-1 分钟（将透明培养皿放在一个黑色（暗）背景上观察条带出现情况，此时在不透明的白背景上应该看到透明的蛋白条带，不要显色时间过长，过长反而会降低分辨率）。
3) 看到满意条带后，用清水冲洗1-2 分钟后，放置于蒸馏水中保存。
2. 脱色
1) 根据个人需要将所需目的条带切下后或者直接整块胶加入适量脱色液，摇床上轻摇10 分钟或者直到脱色完全，最后用清水冲洗几次。
2) 现在胶可以用于蛋白电洗脱，Western blot 等操作，或者可以再用传统方法永久染色。

问题与解决方法
●没有见到条带可能的原因分析
1. 应该把透明培养皿放在黑色背景上看，条带为黑背景上面透明的条带。
2. 染色过头了。染色时要在暗背景上监测蛋白条带出现情况，一旦见到满意条带要立刻用蒸馏水冲洗停止染色。对于已经染色过头的胶，可以用脱色液部分脱色（胶脱色后，还可以再次反复染色）。
3. 蛋白浓度太低了，检测上样蛋白的浓度。
●干胶后，条带不见了可能的原因分析
这是一种可逆的负染色方法，干燥以后蛋白条带就和背景区分不出来了，因此不可以做成干胶。如果要长期保存，可以脱色后再用传统方法染色保存。
●染色后未脱色即直接转膜做Western blot效果不好可能的原因分析
应该脱色后才转膜做Western blot。

储存条件：室温避光，有效期12个月。


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·平末端载体连接试剂盒（不含多克隆位点）(T4连接酶技术)
编号：ALH341
英文名称：Zero background flat end fast connection kit(without mcs)
规格：20次|40次
本试剂盒是一种先进的自杀基因阳性选择克隆系统，可以高效克隆平末端 PCR 产物和任何具有平末端的DNA 片段。该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的 DNA 片段都有效。 阳性选择载体和插入片段连接仅需 5 分钟即可获得超过 90%的阳性重组克隆。由具有校正活性的聚合酶（如：Pfu polymerase）扩增的平末端 PCR 产物可直接连入克隆载体。连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。

本试剂盒提供一个新颖的自杀基因阳性选择克隆载体。该载体含有致死的自杀基因，当载体与片段连接成功，自杀基因无法正确表达，包含重组子的细胞可以正常生长；当载体与片段连接不成功，载体自连后自杀基因正确表达，包含自连空载体的细胞无法存活，即“零ZERO”背景。这种阳性筛选策略无需蓝白斑筛选，极大地加速了克隆筛选进程。

本试剂盒载体消除了插入位点附近的多克隆酶切位点，需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行DNA酶切时，酶切反应将不会受到T载体上其它多克隆酶切位点上的限制酶影响，可以大大提高酶切效率，增加亚克隆成功率。

试剂盒组份(20次)：
平末端Simple Vector(40ng/μl)——————————20μl
1000bp Control（40ng/μl）-———————————5μl
2×Quick Ligation Buffer-————————————100μl
T4 DNA ligase（5U/μl）—————————————20μl
Forward Sequencing Primer (10μM)————————100μl
Reverse Sequencing Primer (10μM)————————100μl
注：
forward sequencing primer, 23-mer 5’-CGACTCACTATAGGGAGAGCGTC- 3’
reverse sequencing primer, 24-mer 5’-AAGAACATCGCTTTTCGATGGCAG- 3’

储存条件：-20℃，有效期6个月。

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