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Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-

Cas9-594使用说明书
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  • 上海邦景
  • BJ-10294
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  • 2025年07月15日
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      Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-594

    • 细胞类型

      详见说明书

    • 肿瘤类型

      详见说明书

    • 供应商

      上海邦景

    • 库存

      25

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 年限

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    • 运输方式

      低温冷藏

    • 器官来源

      详见说明书

    • 是否是肿瘤细胞

    • 细胞形态

      上皮样

    • 免疫类型

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    • 物种来源

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    • 相关疾病

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    • 组织来源

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    • 规格

    Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-594使用说明书冷冻保存方法一:冷冻管置于4300分钟→(-2030分钟*)→-8016~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。 
    冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3–80以下,再放入液氮槽期储存。-20不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80冰箱中,但存活率稍微降低一些。
    细胞名称    Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-594使用说明书
    形态特性    上皮样 
    生长特性    贴壁生长
    特征特性    该细胞是采用慢病毒感染的方式使NCI-H1975细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/mlG418筛选得到的单克隆,经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA  
    培养条件    RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS400ug/ml G418
    传代方法    1:3~1:6传代;每周换液2~3次。
    传代情况   C3
    冻存条件    基础培养基+5%DMSO+20%FBS 
    支原体检测    培养法(- 
    STR     Amelogeninx,xCSF1PO12,12D12S39117,17D13S31710,13D16S5399,12D18S5113,13D19S43315,15.2D21S1128,28D2S133817,17D3S135814,15D5S81811,12D6S104312,12D7S8208,8D8S117913,13FGA21,24Penta E12,12TH017,7TPOX8,11vWA18,18
    同工酶

    染色体
    使用权限 A  
    Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-594使用说明书复苏操作要点:
    1)将培养基在37水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
    2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
    3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
    4800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
    5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
    6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
    Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-594使用说明书质量保证:
    我们的细胞株来源于ATCCECACCDSMZJCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
    细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
    对细胞的真实性,支持客户鉴定STR或者基因突变测序数据,如证明细胞错误,全额退款。
    Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-594使用说明书产品形式:
    公司提供2种形式的产品:
    第一种是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,-80C也不是细胞储存的最好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;运费电询(顺丰)
    第二种是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,运费电询(顺丰)
    默认是发第二种,如果想要第一种,请事先告知。
    Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-594使用说明书购买流程 
    1. 客户确定订购;
    2. 公司将合同发给客户签字(电子版或者纸质版),同时快递发票给客户;
    3. 由客户报销费用到公司账户;
    4. 报账过程中,我公司将复苏细胞,做QC
    5. QC通过,同时费用到账,即可发货给客户(顺丰)。
    6-PG-BaD-葡萄糖-6嶙酸钡盐10KU高纯,99%

    (2,4-二录本氧乙酸)
    Fluridone1-甲基-3-本基-5-(3-三扶甲基本基)-4(1H)-150u高纯,95%
    (异构体混和物) Crqsol 1319-77-3
    C.L.E.D培养基shēng huà shì jì容量:200/
    N-月桂酰肌安醋内盐;N-十二酰基-N-基甘安醋内 N-Lcuroylscrcosinq wo7ium sclt;wo7ium N-lcuroylscrcosinctq;Scrcosyl;Scrkosyl NL 137-16-6

    MIPK3-甲基-25BR
    拂硼醋钾;硼拂化钾 PotcssiuM fluoborctq;PotcssiuM borofluoridq 14072-23-7
    乙酰辅酶A/乙酰辅酶A钠盐/Acetyl CoA BR93% 1毫克 国产/进口
    化镍/二化镍/化亚镍/Nickel(II) fluoride tetrahydrate CP30% 250 国产/进口
    盐酸盐shēng huà shì jì容量:2825

    80-59-1惕格酸Tiglic acid
    植物血球凝集素PHA-Mshēng huà shì jì容量:RT25
    3,4-二甲氧基溴苯 4-Bromoveratrole,98% 2859-78-1 25G 通用试剂
    姬姆萨氏色素/吉氏色素/姬姆色素/吉氏溶液/吉姆氏色素/姬姆氏色素/吉姆萨染料/姬姆氏色素染料/3-(二甲基基)-7-基吩噻嗪-5-鎓化物/Giemsas Stain BS 10 国产/进口
    GP140 Others HIV 人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 人细胞裂解液 (阳性对照)

    CM-H014人气管平滑肌细胞完全培养基100mL
    SCLY Others Human SCLY / Selenocysteine Lyase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
    恒河猴肾细胞;MMK2 人脑星型胶质瘤细胞,SW 1088[SW-1088;SW1088]细胞 T-47D(管癌细胞)
    人肝癌细胞;Hep G2 [HepG2]
    原代系膜细胞特制基础培养基Many types of cells包装:500/250/100
    CL-0072Daudi(人淋巴瘤细胞)5×106cells/瓶×2

    SDF2 Others Human SDF2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
    细胞凋亡蛋白酶-3分析试剂盒CAS
    HT-29细胞,人结肠癌细胞 人胚肾细胞,293细胞 肾系膜细胞Many types of cells包装:5 ×105次方(1ml)
    家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSC
    SFRP4 Others Human sFRP4 人细胞裂解液 (阳性对照)
    Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-594使用说明书PC-12(高分化)   大鼠上腺嗜鉻细胞瘤细胞(高分化)

    PC-12(未分化)   大鼠上腺嗜鉻细胞瘤细胞(未分化)
    Pcc4   小鼠畸胎瘤细胞
    raw264.7   小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
     

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    • 真相揭秘 | 为什么构建稳定表达细胞株这样难?

      1)Flp-In系统   产生背景 随着新技术的不断革新,针对真核质粒转染构建稳定表达细胞株的方法也不断地创新,出现了TALEN、IOS、Cas9和Flp-In等技术,不断地提高稳定表达细胞株构建的成功率。 Flp-In系统——以其独特的优势,广泛应用于构建过表达或静默特定基因的稳定表达细胞株,用于特定基因的功能研究。Flp-In系统依据酿酒酵母的DNA重组系统的特点,高效构建稳定哺乳动物表达细胞株。这种DNA重组系统应用重组酶(Flp)和定点重组技术,将目的基因插入到哺乳动物指定的基因组中

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