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![人前列腺癌细胞；DU 145 [DU145；DU-145]图片](https://img1.dxycdn.com/2018/0322/345/3267845838806447647-14.jpg!wh200)
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- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详见说明书
- ATCC Number：
Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-595
- 细胞类型：
A类
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 库存：
24
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
低温冷藏
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
是
- 细胞形态：
上皮样
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 规格：
株
14930-96-2松胞素B(-20℃)CYTOCHALASIN B
5-bromoBenzo[c]thiopxene 133150-64-8
4-硝基苯甲酯 Ethyl 4-nitrobenzoate,≥99.0% 619-50-1 25G 通用试剂
N-芴氧羰酰基-L-亮安醋 Nc
细胞名称 Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-595品牌
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使NCI-H1975细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418
传代方法 1:3~1:6传代；每周换液2~3次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,12；D12S391：17,17；D13S317：10,13；D16S539：9,12；D18S51：13,13；D19S433：15,15.2；D21S11：28,28；D2S1338：17,17；D3S1358：14,15；D5S818：11,12；D6S1043：12,12；D7S820：8,8；D8S1179：13,13；FGA：21,24；Penta E：12,12；TH01：7,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；
同工酶
染色体
使用权限 A类
Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-595品牌步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-595品牌注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
购买Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-595品牌注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-595品牌现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，同时我司为您提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明，欢迎前来选购！
GUANIDINExy7noCHLORIDELOWASH盐酸胍技术级
硅酮 OV-22SILICONE OV-22
H-Hyp-OMeoHCl反式-4-羟基-L-脯酸甲酯盐酸盐5克特纯，98.0%
乙酰辅酶A三锂盐 Acetyl CoA trilithium salt,≥93% 75520-41-1 1MG 通用试剂
言醋拂西汀 Fluoxqtinq xy7nochloridq 29333-67-4
盐酸壮观霉素25克
402-67-5间扶硝基本1-Fluoro-3-nitnobenzene
NICKELCHLORIDE,HEXAHYDRATE录化镍,六水技术级50G7791-20-0RT
盐酸异丙 Isoprenaline Hydrochloride,99% 51-30-9 5G 通用试剂
DL-苹果醋 DL-Mclic ccid
FGFRL1 Others Mouse 小鼠 FGFRL1 / FGFR5 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A5
CRIP2 Others Human 人 CRIP2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
mCF, 小鼠心脏成纤维细胞 小鼠杂交瘤细胞，7F2细胞 EL4. IL-2(淋巴瘤细胞)
人结直肠腺癌细胞;HCT-8 [HRT-18]
原代系膜细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml
CL-0071CT26.WT(小鼠结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2
CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠结肠平滑肌细胞完全培养基 100mL
Y1小鼠肾上腺皮质瘤细胞 Y1 mouse adrenocortical tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
LEP Protein Human 重组人 Leptin 蛋白
SF17(人脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 RT4(膀胱癌细胞)
Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-595品牌N-H 小鼠骨髓瘤淋巴细胞
P19 小鼠畸胎瘤细胞
P388 小鼠白血病细胞
P815 小鼠肥大细胞癌细胞
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文献和实验gRNA 的优劣）。 精确判定：靶位点扩增子 NGS，能同时给出移码比例、框内比例、大片段缺失。 蛋白层面：Western 建议设 48 h、72 h、96 h 三个时间点，不要只测一个。 --- 四、吉凯基因CRISPR相关产品与服务 CRISPR/Cas9慢病毒产品 提供 sgRNA、Cas9 等编辑体系的慢病毒包装，适用于难转染细胞系、悬浮细胞和需要长期表达编辑元件的场景。交付时关注滴度测定与无菌、支原体检测，避免拿到病毒才发现滴度不够、白跑一轮转导。 CRISPR-Pool文库产品
合适。详见《RNP 电转还是慢病毒：递送方式怎么选》。 病毒滴度报告上的数字是什么意思？ 常见有两种：物理滴度（p24 蛋白量或基因组拷贝数）和功能滴度（实际感染能力，用流式或抗性克隆计数测定）。功能滴度更有参考价值。拿到病毒后建议在目标细胞上做梯度感染预实验，确定实际所需体积。 感染后多久开始抗生素筛选？ 一般感染后 48–72 h 开始，此时整合与表达已建立。筛选持续 3–5 天，同时必须设未感染细胞的阴性对照确认筛选彻底。筛选时间不宜过长，避免 Cas9 长期表达累积脱靶。 慢病毒载体整合会破坏
为准） 典型用途 稳定过表达/敲低细胞系、体内长期表达 瞬时表达、Cas9/gRNA 递送、脱靶检测、疫苗/免疫学、安全性要求高的场景 感染谱 分裂与非分裂细胞均可 同样广谱（VSV-G 假型） 什么时候该选非整合（场景判断表） 你的需求 建议 原因 想建稳定细胞系、长期传代 常规整合型 非整合会被稀释，筛不出稳定株 只需表达 3-10 天看急性表型 非整合 表达够用，且不留痕 递送 Cas9/gRNA 做编辑 非整合优先 编辑完成即可清除，减少 Cas9 长期表达导致
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
