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924
- 英文名:
Shrimp Alkaline Phosphatase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京BTN120403型虾碱性磷酸酶(SAP)厂商的品牌:百奥莱博,是优质的工具酶产品,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多虾碱性磷酸酶(SAP)等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:虾碱性磷酸酶(SAP)
编号:BTN120403
规格:300U
产地:国产|进口
英文名:Shrimp Alkaline Phosphatase
虾碱性磷酸酶与大肠杆菌来源的碱性磷酸酶同样,催化所有磷酸单酯的水解,不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解,也能催化ATP等焦磷酸键水解。但该酶与大肠杆菌来源的BAP以及小牛肠来源的CIAP 不同,通过65℃,15分钟的热处理,可使酶完全不可逆失活。
产品用途:
1.去除DNA片段的5´-末端的磷酸基。防止线状DNA的自身环化(Self-Ligation)。
2.除去PCR反应后残存的dNTP。PCR产物进行测序时,在反应体系中如果有多余的Primer和dNTP,将影响测序反应的正常进行。使用Exonuclease I分解残存的Primer;用SAP处理可降解多余的dNTP,之后不需要对PCR产物进行精制,立即可以进行测序反应。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 虾碱性磷酸酶(1U/μL) | 300U |
| 10×Buffer | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:在37℃、pH9.8的条件下,1分钟内水解对硝基*(代"*")磷酸盐生成1μmol的对硝基*(代"*")酚所需要的酶量定义为1个活性单位。
纯度:
1.5U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃、pH7.5的条件下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.5U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化
使用举例:
1.在1.5mL离心管中配制下列反应液,定容至50μL。
| 成分 | 用量 |
| DNA Fragment | 1~10pmol |
| SAP(1~5μL) | 1~5U |
| 10×Buffer | 5μL |
| dH2O | up to 50μL |
2.37℃反应15~30分钟。
3.65℃反应15分钟(加热失活)。
4.加入2.5μL的3M NaCl(终浓度150mM)。
5.乙醇沉淀加入125μL(2.5倍量)的预冷无水乙醇,-20℃放置30~60分钟,离心。
6.加入200μl的70%冷乙醇清洗沉淀后,干燥。
7.TE Buffer(<20μL)溶解沉淀。
关键词:Shrimp Alkaline Phosphatase,BTN120403,SAP,虾碱性磷酸酶(SAP)
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文献和实验、Alkaline Phosphatases Q-1: 虾来源的酶 (SAP)、大肠杆菌来源的酶 (BAP)、小牛肠来源的酶 (CIAP)特性比较。 Q-2: BAP、CIAP和SAP的区别。 Q-3: SAP降解PCR反应后残存dNTP的反应体系。 Q-4: 如何提高Alkaline Phosphatases去磷酸化的效率? Q-5: 限制酶处理后,不经过Buffer更换可以直接使用CIAP吗? Q-6: CIAP
的因素是靶序列DNA的长度和组成,例如,在100μl反应体系中,4×dNTPs浓度若用20μmol/L,基本满足合成2.6μg DNA或10pmol的400bp序列。50μmol/L的4×dNTPs可以合成6.6μg DNA,而200μmol/L足以合成25μg/DNA。 购自厂商的dNTP溶液一般均未调pH,应用1mol/l NaOH将dNTP贮存液pH调至7.0,以保证反应的pH值不低于7.1。市购的游离核苷酸冻干粉,溶解后要用NaOH中和,再用紫外分光光度计定量。 (三)引物
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