北京现货B载体(国产,进口)

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京现货B载体(国产,进口)是高品质的克隆与表达产品，由北京百奥莱博供应，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多B载体等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京现货B载体(国产,进口)
产地：国产|进口
规格：2μg
编号：BTN51104
英文名：Magic Vector B
品牌：百奥莱博
本产品是专门用于高效快速克隆平末端DNA片段的专用载体,它是由Sma I酶切ClionG载体后经过纯化得到的即用型线性载体。跟ClionG载体一样，本产品带有自杀基因，Sma I位点位于该基因之中，只有当外源平末端DNA 插入片段插入Sma I位点,连接后的DNA转化的细胞才能生长,所以最后得到的转化子几乎都是含有平末端DNA 插入片段的重组子。

产品特点：
1. 即用性，可以直接用于连接反应，免去繁琐的酶切，电泳检测，纯化，去磷酸化，再纯化等步骤。
2. 具有Clion-G载体的所有优点，包括零背景,适用于所有E.Coli菌株,多拷贝的colEI型复制起始位点。
3.高效率，由于自杀基因的使用有效地减除了载体自身环化对平末端DNA 克隆的影响，自身环化得到的转化子在有选择液存在时只占总转化子的1%-5%。
4. 应用广泛，可用于克隆酶切产生的平末端DNA，Pfu酶扩增的PCR片段，cDNA片段，3´和5´RACE片段，Taq酶扩增的PCR片段(部分为平末端)。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

自备试剂：
1.外源DNA片段。如果含又DNA片段的反应液中不含其他载体DNA(如酶切反应液，PCR反应液)，可以不需要凝胶回收,灭活酶后即可直接将反应液用于连接反应。PCR引物5´端一般为OH基团，最好在PCR后用T4 激酶磷酸化，否则连接效率极低。
2.感受态宿主菌。DH5α，DH10B或HB101等常用E.coli菌株。
3.连接反应试剂。请购买现成试剂盒。
4. 选择培养基。在倒LB 平板之前随产品赠送的选择液和Amp(如果附赠的选择液含Amp,则不必须额外加Amp)按比例加入到LB 之中,使选择液终浓度为1×，Amp 终浓度为50μg/mL(如果附赠的选择液含Amp,稀释到1X后Amp的终浓度即为50μg/mL),混匀后倒盘。

使用方法：

1.连接反应
a. 取新的经过灭菌处理的0.5mL Eppendorf 管,编号。
b. 将100 ng载体DNA转移到无菌离心管中，加两倍摩尔量的外源DNA片段，折合成重量(ng)=(外源DNA片段bp 数X 100 ng×2)/5330bp(载体DNA 长度)
c. 加蒸馏水至体积为8μl，于45℃保温5分钟，使重新退火的粘端解链。将混和物冷却至0℃。平末端DNA片段的克隆可以省去45℃保温5分钟这一步。
d. 加入10×T4 DNA ligase buffer 1μl，T4 DNA ligase 0.5μl，混匀后用微量离心机将液体全部甩到管底，于16℃保温1-24小时。
e. 同时做只有外源DNA片段没有质粒载体的组对照反应。没有必要做只有质粒载体而无外源DNA的对照组，因为自身环化的载体不能生长，能够生长的转化子基本上是两个载体分子相互连接形成的新载体。但在有两倍于外源DNA片段存在的情况下,两个载体分子连接的机率很小。
2. E.coli感受态细胞的转化
a. 各取每组连接反应液2μl按标准方法转化E. coli感受态细胞。
b. 每组连接反应转化原液取100μl用无菌玻棒均匀涂布于筛选培养基上，37℃下培养半小时以上,直至液体被完全吸收。

MCS位点：


北京现货B载体(国产,进口)极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·非酶多糖清除剂(RNA样品专用)
编号：BTN60204
英文名称：Non-enzymatic Polysaccharide Scavenger
规格：10mL
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有多糖(Polysaccharide，PS)污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前没有十分有效的方法去除这一污染。我公司开发的非酶法PS清除剂能够比较好的解决这一问题。

产品特点：
1.高效，能有效地去除总RNA中的PS污染,使RNA溶液不再粘稠。
2. 不含RNase污染，RNA分子完整性不会受到任何影响。
3.快速，全部操作在样品管中完成，只需要二十多分钟。
4. 稳定，本产品为非酶产品，可以常温运输和4℃长期保存。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将十分粘稠的总RNA样品用RNase-free水稀释到100-500μl左右，加入等体积的65℃预热10分钟后的PS Scavenger，振荡器上充分振荡1分钟。
2. 加入等体积的*仿，振荡器上充分振荡1分钟。
3. 12000～15000g离心2分钟，转移上清到一新的离心管中，交界处将有白膜样的多糖沉淀。
4. 加入0.1倍体积的3 M NaOAc(pH5.2)和两倍体积的无水乙醇，混匀后12000～15000g离心10-20分钟。小心弃上清。
5. 加入1mL 75%乙醇，振荡器上短暂振荡后12000～15000g离心2分钟，小心弃上清。
6. 短暂离心，用移液枪小心吸去残留液体后，加入适量RNase-free水或具有灭活残留RNase的液相RNase Scavenger。立即使用或-80℃保存。

·人超氧化物歧化酶
编号：BTN130869
英文名称：Human Superoxide Dismutase
规格：10kU
超氧化物歧化酶(SOD)，别名肝蛋白、奥谷蛋白，SOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。其催化超氧化物自由基O－2和*离子反应形成过氧化*和分子氧的酶。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：在25℃，pH7.8，3.0mL反应体系中，在黄嘌呤氧化酶存在的条件下抑制50％细胞色素C还原所需的酶量定义为一个酶活单位。


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·HRP标记内参抗体(GAPDH)
编号：BTN130593
英文名称：HRP Conjugated Loading Control Antibody(GAPDH)
规格：20μL
本产品包含三种最常用的HRP标记内参抗体，β-actin-HRP-Mouse mAb(BTN130592)、GAPDH-HRP-Mouse mAb(BTN130593)、β-Tubulin-HRP Mouse mAb(BTN130594)，该系列抗体无需二抗孵育，可缩短实验周期，节约实验成本，大幅降低背景信息强度。

抗体类型：小鼠IgG1
应 用：Western blotting
建议浓度：1:1000～10000
交叉反应性：人，大鼠，小鼠

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

·dNTP溶液(2.5mM)
编号：BTN51208A
英文名称：dNTP Solution，2.5mM
规格：0.5mL
本产品是dATP、dTTP、dGTP、dCTP四种核苷酸的混合液，每种核苷酸的浓度为2.5mM，纯度在98%以上(HPLC检测)，不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染，可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。使用浓度根据具体的反应决定，请参考相关手册。



储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

DNA为何使用2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶？
 DNA为何不选择现成的光合作用产物核糖和合成RNA的原料尿嘧啶(uracil)分别作为其糖分子和碱基，而去选择需要额外的合成步骤才能得到的2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶(thymine)，其原因何在呢？目前的主流观点是：DNA不能选择核糖的原因之一是由于核糖2"位置上的OH基团会使得到的双螺旋骨架结构不均匀、不平行，难以有效地折叠进染色体结构中，而使用2"-脱氧核糖则能得到均匀平行的双螺旋结构；原因之二是核糖2"位置上的OH基团会对邻近的磷酸二酯键进行分子内亲核攻击，降低分子的稳定性，而对遗传物质来说稳定性十分重要，所以DNA选择了失去分子内亲核攻击能力的2"-脱氧核糖。对信使分子而言，稳定性并不重要，所以RNA仍然使用核糖。
 DNA使用胸腺嘧啶的原因是DNA中的胞嘧啶(cytosine)会缓慢水解变成尿嘧啶，如果尿嘧啶也是DNA的正常组成成份，则DNA修复系统就不能区分哪些尿嘧啶是正常的，哪些是需要修复的。使用胸腺嘧啶(比尿嘧啶分子多一个甲基)不但能保持跟尿嘧啶一样的形成碱基对的能力，同时又能跟尿嘧啶区别开来，使DNA分子中出现的任何尿嘧啶都能被尿嘧啶DNA糖苷酶(uracil-DNA glycosylase)发现和修复。



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·生物素化的β-半乳糖苷酶
编号：BTN131097
英文名称：Biotin-β-Galctosidase
规格：100U
本产品为生物素标记的β-半乳糖苷酶，在免疫组化和免疫印迹应用中与ONPG一起使用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性单位定义：一个单位等于每分钟在37℃，pH7.3时水解1μmol ONPG。

·PVDF膜(0.45μm，13×20cm)
编号：BTN101123
英文名称：PVDF Membrane (Millipore)
规格：1张
聚偏*乙*(代"烯")(PVDF),是一种高强度、耐腐蚀的物质，可以结合蛋白质，而且可以分离小片段的蛋白质。使用PVDF膜前，需要先用无水甲醇预处理，再在transfer buffer中平衡方可使用，目的是活化PVDF膜上面的正电基团，使它更容易跟带负电的蛋白质结合。

储存条件：常温运输和保存，有效期两年。

·硫*(代"酸")链霉素溶液
编号：BTN60210
英文名称：Streptomycin Sulfate Solution
规格：10mL
本产品为50mg/mL的硫*(代"酸")链霉素溶液，可以加入到细菌液体或固体培养基中培养含抗性基因的细菌。1943年美国 S.A.瓦克斯曼从链霉菌中析离得到，是继青霉素后第二个生产并用于临床的抗生素。它的抗结核杆菌的特效作用，开创了结核病治疗的新纪元。

作用原理：高浓度的链霉素主要与细菌核糖体30S亚单位的S12结合，阻止甲硫*酸-tRNA与核糖体30S亚单位结合，从而抑制蛋白质合成的启动。低浓度时，链霉素导致mRNA的错读。

抗性机制：抗性基因str特异性表达一种蛋白酶，可修饰链霉素，抑制其与核糖体结合。

储存条件：低温运输，4℃避光保存，有效期6个月。

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