柱式真菌DNA提取试剂盒库存

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应柱式真菌DNA提取试剂盒库存，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：柱式真菌DNA提取试剂盒库存
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：50次
英文名：Fungus DNA Column extraction kit
本试剂盒是真菌DNA提取试剂盒的柱式升级产品，能够破裂各种真菌坚硬的外壳，同时使用硅胶膜DNA 纯化技术，得到的DNA适用于各种后续实验。

试剂盒特点：
1. DNA 纯净，OD260/280一般都在1.9左右、DNA片段大小在30-50 Kb左右，可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2. 操作简单，整个过程约15分钟，比大多数同类产品短。
3. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
4.液体培养物处理量在0.1-3mL之间，真菌菌丝、孢子、子实体的处理量在0.1-0.5g之间。
5. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 称取0.1-0.5g 湿的真菌菌丝、孢子、子实体或0.1-3mL液体培养物离心得到的沉淀，转移到塑料研钵中，液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。
 注意：最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵，因为DNA 会吸附在表面，影响得率。如果菌丝或子实体等已经十分干燥，则使用量最好比上面推荐的使用量低5-10倍；如果需要预先从环境中对真菌进行纯化(如从血液病原真菌中提取DNA，则需要先去除红细胞等成份，具体方法请参考相关文献和相关产品的使用说明书，如红细胞裂解液)。
2.在离心管中加入1mL 65℃预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶液A有沉淀，需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。
3. 65℃保温5-30分钟，其间最好吹打混匀2-3次。
4. 12000～15000g室温离心3分钟。
5. 将不超过0.75mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物，但对后续操作没有影响，不必进行特殊处理。
6.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀，溶液将呈白色混浊状。
7. 将其置于冰浴中放置5-10分钟。
8. 12000～15000g室温离心3分钟，转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
9. 加入0.2mL的*仿(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。
10. 12000～15000g室温离心3分钟，两相交界面将有白色膜状物，小心转移上清到新1.5-5mL塑料离心管中。注意：由于下一步要加1.5倍体积的溶液C，所以新的离心管的体积要足够大。
11. 加入1.5倍体积的溶液C，上下颠倒30秒混匀，然后分多次的将混合液转移到离心吸附柱中。
12. 每次转移0.7-0.8mL 混合液后，室温放置5-10分钟。
13. 12000～15000g室温1分钟，弃穿透液。
14. 对需要多次上柱的样品，可以在此将剩余的样品加到离心吸附柱式中，重复第12-14 步的操作。
15. 将0.7mL 通用洗柱液加入离心柱，室温离心1分钟，弃穿透液。
16.在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液，12000～15000g离心半分钟(此步为第二次洗涤)。
17. 空甩1分钟去除残留液体。
18. 将离心柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加入30-100μL通用洗脱液。
19.室温放置5分钟后离心1分钟，管底即为真菌DNA溶液，可立即使用，也可长期保存在－20℃。
20.可以重复上步一次，以洗脱更多的DNA。

更多有关柱式真菌DNA提取试剂盒库存的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
亮抑酶肽溶液 leupeptin solution 1mg/ml 1ml
乳酸链球菌素 BANI 1414-45-5
3-羟基-5-甲基异恶唑 2,2′-Thiodiacetic acid 10004-44-1
组胺2盐*(代"酸")盐 Indoxyl-Gal 56-92-8
PP0501 新型快速蛋白染色试剂盒
L-丙交酯 Ferric citrate 4511-42-6
脱脂奶粉 β-Napthyl acetate
B0801 兔血清(辐照灭菌)
ARB13742 兔超敏C反应蛋白(hs-CRP)代做ELISA实验 Rabbit high sensitivity c-reactive protein,hs-crp ELISA KIT
ARB13365 牛乳糖酶(LActAse)ELISA检测服务 
BL1104 10%过硫*(代"酸")*
BTN131155 山羊抗小鼠IgG,荧光素555标记 Goat Anti-Rabbit IgG ,IF555 Conjugate
乙*(代"醛")脱*酶 Starch from potato 9028-88-0
HC0158 离心管盒
BTN90306 胰酶消化液 Trypsin Solution
*化*溶液(5mol/L,无菌)   500ml
蜜二糖 L(+)-Tartaric acid 585-99-9
BL1311 Taq Plus DNA Polymerase
柱式真菌DNA提取试剂盒库存关键词：柱式真菌DNA提取试剂盒,Fungus DNA Column extraction kit,BTN70901

PY01-072  糖化酶(1:100000)  250克  
ARB10566 人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)含量测试 Human peroxisome prolifeRative activated receptor gama coactivator 1 alpha,ppargc1 ELISA KIT
50-99-7 D-无水葡萄糖 D(+)Glucose
3-[N-(1,1-二甲基-2-羟yi基)]*基-2-羟丙*(代"烷")磺酸*盐 2-Aminopyrimidine 102029-60-7
2483-12-3 4*dNTPs
SP琼脂糖凝胶FF VP
CYB163054 羊抗牛IgG-RBITC
嘌呤 ABA 120-73-0
western转移缓冲液(尼龙膜)   500ml
草双甘膦 3-Iodobenzoic acid 1071-83-6
BTN131052 β-巯基乙醇,蛋白级 β-Mercaptoethanol,Protein Grade
L-多巴 Lead chloride 59-92-7
SJ0654 脂质体2000
柱式真菌DNA提取试剂盒库存关键词：柱式真菌DNA提取试剂盒,Fungus DNA Column extraction kit,BTN70901


·SuperTOPO-Amp平末端克隆试剂盒
编号：BTN160684-25A
英文名称：SuperTOPO Blunt Cloning Kit
规格：25次
本试剂盒是基于Topoisomerase能够在几秒钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒，它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶，连接效率比野生型更高。

产品特点：
1.高效快速，连接反应几乎在几秒钟内完成，连接率几乎达到100%。
2.适用于pfu、KOD等高保真聚合酶扩增的平末端片段的克隆。
3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。
4. 零背景，无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选，故不需要IPTG-X-Gal培养基。
5. 本试剂盒按10μL标准反应体系，有25次和50次两种规格包装供选择。
6. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160684-25A是含Amp抗性TOPO载体，BTN160684-25K是含Kan抗性TOPO载体)。

试剂盒组成：

成分	规格
SuperTOPO-Amp Blunt载体	25μl(BTN160684-25A)
SuperTOPO-Kan Blunt载体	25μl(BTN160684-25K)
连接缓冲液	25μl
M13F引物	50μl
M13R引物	50μl
超纯水	1ml
说明书	1份

注意：BTN160684-25A提供SuperTOPO-Amp Blunt载体，BTN160684-25K提供SuperTOPO-Kan Blunt载体。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. 如果是PCR 制备插入片段，所用引物不能磷酸化，使用pfu、KOD等产生平末端片段的高保真DNA聚合酶。为保证扩增产物的完整性，PCR循环结束后，再延伸5-10分钟，确保片段延伸完全。
2.电泳检测并相对定量PCR片段(跟DNA marker 比较)。根据插入片段长度和下表确定每次连接反应需要的最佳用量：

插入片段长度	最佳用量
100-1000bp	20-50 ng
1000-2000bp	50-100 ng
2000-5000bp	100-200 ng

3.在一个干净的塑料离心管中，室温下(不要放在冰上)设置如下连接反应体系：

成分	用量
纯化后的PCR产物	不超过8μl(详见注意事项)
SuperTOPO-Amp Blunt载体或 SuperTOPO-Kan Blunt载体	1μl
连接缓冲液	1μl
超纯水	补到10μL

注意：如果使用未经纯化的PCR产物，则需要加入量不能超过1μL，否则PCR 体系会干扰连接体系。
4. 轻柔吹打混匀后，短暂离心，常温(20-30℃)放置0-5分钟。如果在冬天室温低于20℃，建议使用25℃水浴或金属浴。注意：连接时间超过5分钟的话连接效率会降低。
5. 如果当天不转化，可以将离心管放-20℃保存。如果转化，则取5μL连接液加到50-100μL 刚刚融化的感受态细胞中，轻柔混匀。注意：本产品要求感受态细胞的转化效率不得低于5×10E7cfu/ug。
6. 如果片段长度小于2Kb，则不需要冰浴和热激，直接在离心管中加入500μL 不含抗菌素的SOC或LB培养基，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μl左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
7. 如果片段长度长于2Kb，则按常规转化方式，先冰浴2-30分钟，然后42℃热激30秒，冰上防放置2分钟，再在离心管中加入500μl 不含抗菌素的SOC或LB培养基，37℃ 250rpm培养60分钟，然后取200μL 涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μL左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-AmpBlunt载体)或Kan(对SuperTOPO-Kan Blunt载体)的培养皿上，37℃过夜培养。
8. 用M13F/M13R通用引物进行菌落PCR或直接测序来鉴定重组子。

北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购柱式真菌DNA提取试剂盒库存。