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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Yeast DNA Extraction Kit
- 库存:
492
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售酵母DNA提取试剂盒厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:酵母DNA提取试剂盒厂家
英文名:Yeast DNA Extraction Kit
产地:国产|进口
编号:ALH154
规格:50次|100次
品牌:百奥莱博
本试剂盒用于快速的从酵母中提取基因组DNA。在针对酵母细胞特点配制的酵母裂解液作用下, 酵母细胞被裂解释放出基因组DNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。
试剂盒组份(100次):
酵母裂解液——————30ml
蛋白沉淀液——————10ml
DNA溶解液 ——————5ml
产品特点:
1.不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂。
2.快速,简捷,整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定,产量高(比离心柱型的产量高一倍以上),OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达50Kb-150kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
1. 吸取1.5ml 酵母培养物到一个1.5ml 离心管; 12,000rpm 离心2 分钟,尽可能弃上清,必要时候可以用枪吸去。
2. 高速涡旋振荡,打散重悬酵母细胞团。
3. 加入300μl 酵母裂解液,涡旋振荡混匀,或者用1 毫升的枪头反复吹打混匀。酵母细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要,必须充分分散重悬。
4. 将裂解物放置在70℃水浴15-30 分钟。如果产量低,可以适当提高水浴温度和延长水浴时间,中间可以涡旋振荡混匀几次帮助裂解。
5. 冰上至少5 分钟使回复到室温。
6. 在回复到室温的裂解物内加入100μl 蛋白沉淀液后,在涡旋振荡器上高速连续振荡混匀20 秒。混匀后可能见到一些小的蛋白团块。冰浴5 分钟。
7. 13,000rpm 离心5-10 分钟。这时应该可以见到管底蛋白沉淀,也可能见到一些蛋白沉淀漂浮在液体表面。
8. 小心缓慢吸取上清到一个新的1.5ml 离心管中,不要吸到沉淀。吸取上清时,注意不要吸到管底的和漂浮在液体表面的蛋白沉淀。如果不小心将蛋白沉淀转入新的离心管中,可再次离心2 分钟后取上清。
9. 加入等体积的室温异丙醇(约400μl),颠倒30 次混匀或者直到出现絮状DNA 沉淀(或者白色浑浊沉淀)。
10. 12,000rpm 离心1 分钟,在管底可以见到白色的DNA 沉淀块,倒弃上清。
11. 加入1ml 70%乙醇,颠倒几次漂洗DNA 沉淀,12,000rpm 离心1 分钟, 倒去上清(注意不要把DNA 沉淀倒掉了),倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇,还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇,空气晾干沉淀几分钟。注意不要干燥过头,否则DNA极其难溶;也不能残留太多乙醇,否则乙醇可能抑制下游如酶切反应。
12. 加入40μl DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀,轻弹管壁混匀,可以放置在65℃温育30-60 分钟(不要超过一小时),也可以在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA。期间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
13. 加入10-15μl RNase A(10mg/ml),或者1-2μl RNase A(100mg/ml)颠倒混匀,37℃温育30-60 分钟去除残留RNA。该步骤主要作用为去除残留的RNA,如果残留RNA多,可以适当延长时间。如果残留RNA不影响实验,可略去该步骤。如果残留的RNA酶可能影响实验,也可以用等体积酚/氯*(代"仿")抽提去除,然后用标准的乙醇沉淀回收DNA。
14. DNA 可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:酵母DNA提取试剂盒|酵母基因组DNA提取试剂盒
关于酵母DNA提取试剂盒厂家的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·DNA快速连接试剂盒
编号:ALH353
英文名称:DNA Quick Ligation Kit
规格:20次|60次
本试剂盒可在室温(22℃)10分钟条件下,快速、简单完成DNA*(代"片")段粘端或平端连接反应。连接产物可直接转化。可用于DNA 片段克隆,文库构建,TA克隆,Linker连接等。
试剂盒组分(60次):
2×Quick Ligation Buffer-——————300μl
T4 DNA ligase(5 U/ml)————————300U
注意事项:
1.转化前不要热灭活T4 DNA ligase,否则将降低转化效率。
2.DNA*(代"片")段体积大于4 ml的,可增加2 xQuick Ligation Buffer,总反应体积相应可以增至20 ml,这样在连接体系中可加入更大体积的DNA*(代"片")段。
储存条件:-20℃。
·10mM dNTP混合溶液
编号:ALH286
英文名称:10mM dNTPs Solution
规格:1ml|5ml
本品是dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩尔混合液,浓度均为10mM,PCR反应时,不用稀释可直接使用,PCR反应时的标准使用量为每50μl反应液使用1μl(终浓度200μM)
储存条件:-20℃。
·核酸助沉剂
编号:ALH059
英文名称:Auxiliary precipitating nucleic acid reagent
规格:1ml|5ml
本品是一种分子生物学级Poly多聚物溶液,在乙醇沉淀时加入5-10μl 本品即可明显提高核酸沉淀的得率,更可使痕量DNA的回收率达到95~98%,同时可选择性去除短引物(<22bp)片段和dNTP,用于沉淀回收标记探针,去除未标记dNTP。与生物源性的核酸沉淀助剂如糖原和tRNA相比,本品本身绝无核酸污染也无DNA酶和RNA酶活性,同时不影响酶切、连接、转录、PCR、转化转染等,也不影响核酸电泳和DNA-蛋白相互作用。本品已成为最常用的核酸助沉剂。
产品特点:
1.明显提高DNA或RNA沉淀的得率。
2.痕量DNA和RNA(20pg)回收达95~98%。
3.不影响酶切、连接、转录、PCR等反应。
4.不影响电泳和DNA-蛋白相互作用。
使用方法:
1. 提高DNA或RNA沉淀回收效率的使用方法:
①在1ml RNA 或者DNA 溶液中加入4-8 μl 本品,颠倒混匀。
②按照标准的乙醇沉淀法来沉淀RNA 或者DNA,如加入3M PH5.2 醋酸钠溶液(沉淀RNA 时应该使用无RNA 酶处理的溶液)到终浓度0.3 摩尔(约1/10 体积),然后加入2 倍体积的无水乙醇,混匀后室温或者冰箱放置10-30 分钟,12000 转离心10 分钟,弃上清,70%乙醇漂洗一遍,去上清,晾干沉淀,将沉淀重新溶解于适量DEPC 处理水(RNA 沉淀)或者其它如TE 缓冲液中。
2. 提高DNA或RNA产率的使用方法:
每一毫升总RNA提取试剂或者DNA提取试剂加入4~8μl本品。
注意事项:
本品会增加RNA 或者DNA 的光密度值,因此测量光密度值的时候,为了消除本品影响,应该按照同样的实验过程做一个空白对照样品(使用同样的试剂和本品,但是不含有RNA 或者DNA 样品,将最后的本品沉淀溶解在和样品一样的溶解液中)。测量样品和空白对照在260和280nm 的光密度值。将样品的光密度值减去空白对照的光密度值,便可以得到实际的样品的光密度值。如果定量不需要很精确,也可以估测。
储存条件:室温,12个月
酵母DNA提取试剂盒厂家关键词:酵母DNA提取试剂盒,酵母基因组DNA提取试剂盒
·强效EB去除剂
编号:ALH424
英文名称:EB Eraser
规格:50次|100次
本品是专用于清除溴化乙锭(EB)污染的产品。它能有效破坏溴化乙锭的结构,消除EB的致癌性,从而实现清洁EB污染的目的。适用于清除电泳缓冲液、生化溶液和固体表面的EB污染(如试验台、离心机、玻璃器皿、不锈钢制品等)。使用EB Eraser将EB污染物处理后,再丢弃可以保护环境不受EB污染物影响。本品能破坏EB的结构,消除EB的荧光,并使其致突变性降低99.5%以上。
产品组分:
溶液A————————200ml
去除剂B———————50g
注意事项
1. 溶液A 有腐蚀性,并且操作EB 过程中为保护您的安全,请戴手套和眼罩操作。
2. 化学试剂配制和处理EB 过程中可能有微量刺激有害气体产生,请在通风橱中操作。
3. 没有一种方法可以100%消除EB,因此即使处理后,应该戴手套小心操作,而不应该视为100%安全。有条件者,最好定期检测致突变性,确保处理过程的正确。
储存条件:室温,有效期1年。
酵母DNA提取试剂盒厂家关键词:酵母DNA提取试剂盒,酵母基因组DNA提取试剂盒
·反转录试剂盒
编号:ALH266
英文名称:Reverse transcriptase Kit
规格:50次|100次
本试剂盒是可以除去基因组DNA进行 Real Time RT-PCR 反应的专用反转录试剂。本试剂盒为一管式反转录预混Mix,5 × TRUE RT MasterMix中含有反转录第一链合所需的所有试剂(RTase、RNase Inhibitor、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、Buffer)。 通常Real Time RT-PCR等实验需要先用DNase I消化去除RNA中残留的基因组DNA(gDNA) ,但是传统DNase I 处理复杂并容易造成 RNA 的降解和损失。本试剂盒中使用了具有DNA分解活性的特殊 gDNA Eraser 2-5分钟消除gDNA残留,不需要DNase 消化和后续繁琐步骤。反转录步骤采用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成,具有更高的检测效率和敏感度。
试剂盒组分(100次):
gDNA Eraser-——————————————100μl
10×gDNA Eraser Buffer—————————100μl
5×TRUE RT MasterMix——————————400μl
RNase free H2O—————————————2ml
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. gDNA Eraser 、5 × TRUE RT MasterMix非常粘稠,溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失,用前请点甩离心后使用,并且避免吸头外壁沾附损失。gDNA Eraser可以每次按照0.8μl使用,5 × TRUE RT MasterMix可以每次按照3.8μl使用,也不影响使用效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
北京百莱博科技有限公司专业生产DNA纯化产品,欢迎来电咨询选购酵母DNA提取试剂盒厂家。
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文献和实验Genomic DNA Mini Kit 人或动物组织及培养细胞的基因组DNA提取试剂盒 29、QuickSpin BactoGenomic DNA Mini Kit(细菌基因组DNA提取试剂盒) 30、QuickSpin YeastoGenomic DNA Mini Kit(酵母基因组DNA提取试剂盒) 31、QuickSpin Plant Genomic DNA Mini Kit(植物及丝状真菌基因组DNA提取试剂盒) 31、QuickSpin Plasmid Miniprep Kit(质粒
最近 WB 的结果趋势不是很理想,因为给了蛋白 B 的抑制剂蛋白 B 却没有明显变化。于是大伙儿一合计,可能需要再看看蛋白质之间的相互作用,会不会是抑制剂影响了蛋白 B 和蛋白 C 之间的结合,而不是直接导致蛋白 B 的降解。大家都知道研究蛋白质相互作用的三大经典方法是:酵母双杂交(Y2 H),免疫共沉淀(CoIP)和 GST pulldown。结合我们课题组的这个实验,因为只需看看蛋白 B 和 C 之间的结合,而且已知蛋白 B 和 C 是会结合的,所以可能用 CoIP 最简便。那么问题
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