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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
213
- 英文名:
MagBeads DNA Purification Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
RT(15~30℃)
- 规格:
5ml|50ml
特别提示:包括磁珠法DNA纯化回收试剂在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:磁珠法DNA纯化回收试剂
英文名称:MagBeads DNA Purification Kit
产品货号:WE0205
产品规格:5ml|50ml
本试剂提供了一种简单、快速、高效的核酸纯化方法。该产品可用于二代测序建库时DNA的选择性或非选择性回收,以及PCR产物的纯化回收。MCPure与样品按一定比例混合后,磁珠选择性将核酸吸附。经两步漂洗后,洗脱得到的DNA纯度高,A260/A280的比值在 1.7-1.9之间, A260/A230的比值通常在2.0以上。经该试剂盒纯化得到的DNA适用于PCR,Real-Time PCR, 测序,southern blotting等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 96次 |
| Buffer KCL | 96ml |
| Buffer KCW1(浓缩液) | 72ml |
| Buffer KCW2(浓缩液) | 60ml |
| Buffer EB | 30ml |
| 蛋白酶K | 2×25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 2×1.25ml |
| Magbeads PN | 4ml |
自备仪器及试剂:磁力架|80%乙醇|洗脱液:Buffer EB(10 mM Tris-HCl, pH 8.0);去离子水(pH在7.0-8.0之间)。
产率举例:
| 片段长度 | 典型产率 |
| 5000 bp | 高至90% |
| 1000 bp | 高至90% |
| 500 bp | 高至80% |
| 200 bp | 高至70% |
实验前准备及重要注意事项:
1、冰冻、离心、超声会对MCPure中的磁珠造成不可逆的损害。
2、MCPure中磁珠长期放置后会聚集成团,从而使磁珠表面积减小,降低样品回收得率,使用前一定要涡旋振荡彻底混匀磁珠。
3、使用前,建议将MCPure涡旋震荡混匀后分装到1.5ml的离心管中,每管分装1mlMCPure。
4、本试剂不适用于纯化回收小于100 bp的DNA片段,如果要回收小于100 bp的DNA片段,建议将MCPure的用量增加到样品体积的4倍。
5、进行DNA的选择性回收时,MCPure对于DNA溶液中的离子浓度较为敏感。不同厂家的二代测序建库试剂得到的接头连接后的DNA溶液以及PCR扩增产物中离子浓度不同,所以用MCPure做DNA选择性回收时,试剂用量有所不同。
操作步骤:
1、涡旋振荡MCPure 20秒,使其彻底混匀为均一溶液。
2、向1.5ml的离心管中加入纯化的DNA溶液。
3、向上一步的离心管中加入2倍样品体积的MCPure,涡旋震荡5秒后室温静置5分钟。
4、将上一步的离心管放于磁力架上,直至磁珠完全吸附(约需5分钟)。
5、保持离心管固定于磁力架上,彻底弃去溶液,期间避免接触磁珠。
6、继续保持离心管固定于磁力架上,向离心管中加入250μl新鲜配置的80%乙醇。
7、保持离心管固定于磁力架上,待悬起的磁珠完全吸附后彻底弃去乙醇。
8、重复步骤6-7两次。
9、保持离心管固定于磁力架上静置放置10分钟,使乙醇完全挥发干净。
10、将离心管从磁力架上取下,加入20-100μl EB(自备)或去离子水,涡旋振荡使磁珠完全重悬于洗脱液中后,室温放置5分钟。
11、将离心管放于磁力架上直至磁珠完全吸附(约需5分钟)。
12、将洗脱液转移至一个新的1.5ml离心管中。此时,可弃去磁珠。
纯化回收得率的计算:
我们建议通过琼脂糖电泳纯化前后的样品进行回收得率的计算。我们不建议通过260 nm处的光吸收值来计算回收得率。因为溶液中单链、双链DNA和dNTP以及一些纯化前的某些杂质在260 nm处都有光吸收,这样在计算回收前样品中DNA浓度时会得到一个假的、虚高的DNA浓度。
储存条件:室温(15~30℃)
我公司销售的磁珠法DNA纯化回收试剂报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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