伤口愈合/细胞划痕实验新方法分享
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细胞划痕实验（Wound Healing)是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。基本的步骤包括“划痕”的制造，细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。
特点：
1. 在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。
2. 非常适合研究细胞与胞外基质（ECM），细胞与细胞之间相互作用引起的细胞 迁移。
3. 与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容，可用于分析细胞间的相互作用
4. 研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法。
传统实验方法实验步骤：
1. 培养板接种细胞之前先用marker笔在12孔板背面画横线标记（方便拍照时定位同一 个视野）。
2. 细胞消化后接入12孔板，数量以贴壁后铺满板底为宜（数量少时可培养一段时间至铺满板底）。
3. 细胞铺满板底后，用1 ml枪头垂直于孔板制造细胞划痕，尽量保证各个划痕宽度一致。（人工枪头制造划痕难以保证划痕宽度的一致性，影响实验结果，这也是该方法最大的缺陷。）
4. 吸去细胞培养液，用PBS冲洗孔板三次，洗去划痕产生的细胞碎片。
5. 加入无血清培养基，拍照记录。
6. 将培养板放入培养箱培养，每隔4-6小时取出拍照。
7. 根据收集图片数据分析实验结果。
Culture Insert方法
1. 准备细胞，培养液，culture Insert。
2. 如图，将细胞接种于Dish中间的Insert，细胞长满Insert 区域后用镊子移除Insert即可产生500 μm宽度的划痕。
3. 每隔4-6小时拍照记录。
4. 根据收集图片数据分析实验结果。
总结：相比较于传统的划痕实验，Ibidi的设计更科学、重现性更好：
除了保证划痕均一性的难题，相信各位同学觉得最难的还有后期实验结果的处理，这里给大家分享一个操作非常简单的在线软件，只需注册就可以免费使用，只要上传图片很快就能把实验结果发到注册邮箱，非常方便。
Analysis Data Contains:
Cell covered area
Speed of closure (available ≥ 5 images)
Acceleration characteristics (available ≥ 5 images)
Overview chart
Center piece approximation (available ≥ 10 images)
