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- 技术资料
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427
- 英文名:
T7 DNA Polymerase(Unmodified)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")T7 DNA聚合酶(未修饰)优惠促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:T7 DNA聚合酶(未修饰)优惠促销
规格:300U
产地:国产|进口
英文名:T7 DNA Polymerase(Unmodified)
品牌:百奥莱博
T7 DNA聚合酶催化在感染过程中T7噬菌体DNA的复制。该蛋白二聚体具有两种催化活性,DNA聚合酶活性和较强的3´→5´核酸外切酶活性。由于该酶具有高保真性和快速延伸速率,因而特别适于长链DNA模板的复制。T7 DNA聚合酶由两个亚基组成,T7基因5蛋白(80kDa)和E.coli硫氧还蛋白(1kDa)。这两个蛋白分别克隆并在E.coli的T7表达系统过表达。
产品特点:
1.缺口填充(无链置换活性)。
2.定点突变中第二链的合成。
3.具有快速延伸的特性,故无需长时间温育。
4.T7 DNA聚合酶不能用于DNA测序。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T7 DNA聚合酶(10U/μL) | 30μl |
| 10×T7 DNA聚合酶反应缓冲液 | 1.5ml |
| BSA溶液(10mg/mL) | 0.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:对于不同的实验,各成分用量及反应时间可能不同,请根据具体实验具体调整。1×T7 DNA聚合酶反应缓冲液,加入0.05mg/mL BSA和自备的dNTPs,37℃温育。
热失活:75℃下反应20分钟。
单位定义(粘性末端活性单位):1 单位指在37℃条件下反应30分钟,能使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物中所需的酶量。
贮存液成分:50mM KPO4,1mM DTT,0.1mM EDTA,50%甘油,pH7.0@25℃。
我公司的T7 DNA聚合酶(未修饰)优惠促销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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·PCR专用LIC克隆套装
编号:BTN120402
英文名称:LIC Cloning Kit for PCR
规格:1μg
本产品就是基于LIC原理开发的即用型载体。LIC就是不依赖于连接的克隆技术(Ligation-Independent Cloning),它是继限制性内切酶切/连接酶克隆方法后出现的第二代DNA克隆技术,它效率高,尤其适用于大规模分子克隆,其原理如下:
产品特点:
1. 操作简单,一管式一步反应,只需加入插入片段即可,客户不需要购买任何额外的酶。
2.时间短,整个过程只要15分钟。
3.高效,比常用的AT克隆效率更高,阳性率接近于100%。
4. 克隆方向和位置精准和可控,适合表达型克隆工作。
5. 便于自动化,适合高通量克隆。
6.适用于长片段克隆。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| LIC载体(50μg/μL) | 1μg |
| 溶液A | 10μl |
| 溶液B | 150μl |
| 阳性对照插入片段 | 8μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:-20℃运输及保存,有效期一年。
一. PCR引物设计,合成和PCR反应
1. 按常规方法设计PCR引物,只是必须在一条引物5´端再加上GGCGGCCGCGGTAC序列,在另一条引物5´端加上GGCGCCGGCGGTAC序列。此序列决定克隆的方向,如果不在乎方向,可以随机组合。
2. 所用引物最好为HPLC纯化获得。注意:如果购买本公司产品,免费合成LIC引物一对。
3. 按常规的方法进行PCR,最好使用高保真DNA聚合酶。
4. 按常规的胶回收的方法回收PCR片段。注意:必须去除残余的dNTP和PCR引物,否则会极大降低LIC效率。
5. 对PCR片段电泳定量,即电泳后通过肉眼比较PCR片段和DNA Marker的相对强度,通过DNA Marker条带的浓度(一般商品化的DNA Marker每条带的浓度都是已知的)推测出PCR片段的浓度。
二. PCR片段与载体退火
1.在纯化的2μL PCR产物中加入0.4μL溶液A、2μL载体(100ng)以及5μL溶液B,混合。
注意:PCR产物跟载体的摩尔数比例最好是1:1。
2.室温放置5分钟。注意:保温时间长短很关键,不要轻易延长或缩短。
3.在PCR仪器上按75℃ 10分钟,然后放冰上或-20℃待用。
三.转化
1. 按常规方法进行转化。
2. 按菌落PCR方法筛选,可选用我公司的菌落PCR试剂盒(BTN50901)。进行快速筛选,需要T7和SP6 RNA聚合酶启动子引物。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购T7 DNA聚合酶(未修饰)优惠促销。
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