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- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
T7 DNA Polymerase(unmodified)
- 库存:
877
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")T7 DNA聚合酶(未修饰)促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:T7 DNA聚合酶(未修饰)促销
品牌:百奥莱博
英文名:T7 DNA Polymerase(unmodified)
规格:300U
编号:BTN130618
产品简介:
T7 DNA聚合酶催化在感染过程中 T7 噬菌体 DNA 的复制。该蛋白二聚体具有两种催化活性:DNA聚合酶活性和较强的 3" →5" 外切核酸酶活性。由于该酶具有高保真性和快速延伸速率,因而特别适于长链 DNA 模板的复制。具体有下列特点:
1.缺口填充(无链置换活性)
2.定点突变中第二链的合成
反应条件:
1X T7 DNA聚合酶反应缓冲液 [20 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT,pH 7.5 @ 25℃] 。加入 0.05 mg/ml BSA和dNTPs(不随酶提供)。37℃温育。
Buffer 成分:
50 mM KPO4,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50% Glycerol,pH 7.0 @ 25℃
单位定义:
1 单位指 37℃ 条件下,30 分钟内能催化 10 nmol 的 dNTPs 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
热失活:
75℃ 20 分钟。
注意事项:
1.该酶具有快速延伸的特性,故不需长时间温育。
2.T7 DNA聚合酶不能用于 DNA 测序。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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文献和实验对于 Taq 酶扩增性能更强。 1. 选择热启动酶降低非特异性扩增 在使用 Taq 酶进行扩增时,有时会出现非特异性扩增,可能的原因可以从模板、引物、体系、程序中一一排查。如模板是否被污染,引物特异性如何,Mg2+浓度偏高等等,其中一个不可忽视的原因是 DNA 聚合酶的种类是否合适。如果排查了其它原因仍旧有非特异性产物,可以选择热启动酶重新实验,即可有效减少或消除体系中其它产物的积累。常用的热启动酶分为两类:一类是化学法修饰的热启动酶,如 Ace Taq ,预变性 95℃5 - 10 min 即可
一、概述T7 DNA聚合酶最初具有5'→3'聚合酶活性以及单链和双链3'→5'外切酶活性。当T7 DNA聚合酶用适当方法处理后,可使3'→5'外切酶活力明显下降。改造后的T7 DNA聚合酶又称T7测序酶。使用T7测序酶得到的测序数据具有在每个碱基位置都有相对均匀的配对参入。因此, 放射自显影所得到的结果较为清晰易辩,对于许多模板来说,使用含有dGTP的混合物即可得到理想的测序结果。然而,如果出现了带压缩的问题,则用含dITP的混合物来取代常规的dGTP。dITP的掺入,使在富含GC的模板中
分子.复制子(replicon)复制子:基因组中能单独进行复制的单位.每个起始点到终止点的区域为一个复制子.起始点(origin of replication ,ori):原核生物DNA分子中只有一个,长度 200bp左右.大肠杆菌ori C有245 bp.真核生物有多个复制起始点.终点(ter):D,A,C,B(23bp共有序列)Tus(terminator utilization substance)识别终止序列.复制的方向:单向或双向原核生物DNA聚合酶(DNA polymerase,DNA
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