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- NobleRyder
- P9846
- 北京
- 2025年12月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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99
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2个月
- 供应商：
北京诺博莱德科技有限公司
- 保存条件：
已收到实际货物为准
产品简介：
Western封闭液即Western Blocking Buffer，可用于蛋白印迹中转移了蛋白样品的PVDF膜或NC膜的封闭，主要由TBS、BSA、防腐剂等组成。封闭后可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合，降低背景，增强信噪比。每张膜封闭大约需要10～15ml封闭液。
产品组成：
| 编号 名称 |
P9846 | Storage |
| Western Blocking Buffer | 100ml | 4℃ |
| 使用说明书 | 1份 | |
自备材料：
1、 TBST或Western洗涤液
2、 摇床
Western封闭液
操作步骤(仅供参考)：
1.2蛋白印迹转膜后加入Western洗涤液，在摇床上摇动洗涤蛋白膜1～2min。
2.取恰当容量的容器加入Western Blocking Buffer，在摇床上摇动室温封闭60min。
3.直接进行一抗孵育等后续操作。
注意事项：
1.如果对于一些背景非常高的抗体，可以4℃封闭过夜。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Western封闭液
有效期： 2个月有效。
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文献和实验1:500 - 1:5,000 for immunohistochemistry on tissue sections 1:5,000 - 1:100,000 for ELISA and Western blotting with chromogenic substrates 1:10,000 - 1:200,000
哈哈,深蒙各位侠士对于兄弟的厚爱和信赖,恐怕我会令大家失望 真正做western我也做的不多,不过由于效果都不是很差,所以就对于整个过程中的某些参数对于结果的影响没有深究,正所谓真正经历实验失败的人才会对具体细节理解深刻一样,但是从关于western方面的文献和资料来看,有关各个参数对于结果的影响是有高质量的paper阐述的,所以大侠们的这些问题和想法个人认为完全是可以做出一篇小论文评述的 这两天刚好有些时间,就把曾经看的资料都大致再看了一下,自己总结了一下,可能仍然对上述大侠
细胞， 收集裂解液至离心管中，在振荡器上混匀4～15min，14000g离心15min(4℃)，弃沉淀，用Bradford法或其它蛋白质测定方法测定上清中蛋白浓度以调整上样体积和上样量，进行 Western杂交时还需设置内或外参照，通常用beta-actin。 注意：一般上样20~30 μg已足够，如待检蛋白为低丰度蛋白，可加大上样量 至100μg，但电泳条带易拖尾，可制备亚细胞组份或采用更敏感的检测方法。 电泳分离(参照SDS-PAGE电泳方法) 转膜
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