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叶绿体蛋白提取试剂盒(2D电泳用)-酶法

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    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      50T

    叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器,光合作用就是在叶绿体中进行的, 由于具有这一重要功能,所以叶绿体一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器。跨膜蛋白承担各种生物功能,在生物的各种发展过程中扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套,因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。 贝博® BBproExtra® 叶绿体蛋白提取试剂盒用简便的方法可以从各种植物样本中提取叶绿体蛋白,提取过程简单方便。 本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解膜组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白样本不含有高浓度的盐成分,可直接用于等电聚焦、双向电泳。如需要用于报告基因检测、SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验的试剂盒,请选用贝博其他货号的试剂盒。

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    1. 提取液制备:
    每500 μl冷的蛋白提取液C中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
    2. 取500 mg-1 g新鲜植物叶片样本,用纯水洗净擦干后去除叶梗和粗脉,用手术剪刀或锋利的刀片剪切碎,切成0.5 mm*0.5 mm细块。
    3. 加入500 μl提取液A,充分混匀。
    4. 将悬液置振荡器上室温振荡12-72小时。
    5. 在1000×g条件下离心5-10分钟,弃上清,收集沉淀。
    6. 在沉淀中加入2 ml提取液B用组织搅碎机/匀浆机/Dounce匀浆器充分匀浆。
    7. 将匀浆用100 um细胞筛过滤。
    8. 将滤液500×g力离心3分钟。将上清移入另一干净离心管。
    9. 将上清3000×g力离心10分钟。弃上清,收集沉淀。
    10. 在沉淀中加入300 μl -500 μl蛋白提取液C,充分混匀。 在2-8℃条件下振荡30-45分钟。
    11. 将提取液在4℃,12000×g条件下离心5分钟,取上清。
    12. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或调整相应的浓度后直接用于下游实验。

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