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细胞膜/胞浆/核膜蛋白分步提取试剂盒

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  • BB-31042
  • 2025年07月16日
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    • 保存条件

      2-8℃

    • 保质期

      一年

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      大量

    • 供应商

      贝博生物

    • 规格

      50T/100 T

    规格:50T产品价格:¥1000.0
    规格:100 T产品价格:¥1700.0
    产品概述 product description

    贝博® BBproExtra® 细胞膜蛋白/胞浆蛋白/核膜蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织,如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织中分步提取细胞膜蛋白/胞浆蛋白/细胞核膜蛋白/核内蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。 本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组份,包括细胞质膜、核膜和各种细胞器膜。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。 

    2-8℃
     
    有效期
    一年
    检测方法
    WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA等
    适用样本
    动物细胞
    产品特点
    1.使用方便,从细胞,组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
    2.将蛋白提取的时间缩短至1小时。
    3.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
    4.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
    5.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
     
     
    使用方法
    1. 提取液制备:
    每400 μl冷的蛋白提取液A/B/D中都分别加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物和2 μl磷酸酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
    2. 取5-10×106个细胞,在4℃,800×g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干。
    3. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
    4. 每5×106个细胞中加入400 μl冷的蛋白提取液A,混匀后,在4℃条件下用试剂盒所配针筒反复吸吹细胞,使细胞完全破裂。
    5. 在4℃,1000×g条件下离心5分钟。
    6. 将上清(I)吸入另一干净离心管,在沉淀中加入100-200 μl冷的提取液B,高速涡旋振荡15秒,充分混匀。
    7. 将混匀的提取液B置4℃低速振荡30-60分钟。
    8. 将提取液B在37℃条件下水浴10分钟。
    9. 将提取液B在37℃下1000×g -2000×g力离心5分钟,此时溶液分为两层(对着光线看),上层为核内蛋白,下层是核膜蛋白约为20-40 μl。小心移除上层,用1-2倍体积的冰冷的提取液D溶解下层即为细胞核膜蛋白。
    10. 在步骤6中所得到的上清(I)中加入5 μl提取液C,充分混匀。
    11. 在2-8℃振荡20-30分钟。
    12. 在37℃水浴10分钟。
    13. 在37℃下 1000×g离心3分钟,此时溶液分为两层,上层是胞浆蛋白部分,下层部分(II)是细胞膜蛋白约为40-50 μl。
    14. 将上层小心吸入另一预冷的干净离心管,即可得到胞浆蛋白。
    15. 用50-150 μl冰冷的提取液D溶解步骤13中的下层部分(II),即得细胞膜蛋白。
    16. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

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    该产品被引用文献
    参考文献
    1.Manying Wang, et al.
    20(S)-ginsenoside Rg3 promotes myoblast differentiation and protects against myotube atrophy via regulation of the Akt/mTOR/FoxO3 pathway
    Biochemical Pharmacology 2020

    2.GuoDe Wu, et al.
    microRNA-592 blockade inhibits oxidative stress injury in Alzheimer's disease astrocytes via the KIAA0319-mediated Keap1/Nrf2/ARE signaling pathway
    Experimental Neurology 2020

    3.YuyaoXiang, et al.
    2,3,5,6-Tetramethylpyrazine improves diet-induced whole-body insulin resistance via suppressing white adipose tissue lipolysis in mice
    Biochemical and Biophysical Research Communications 2020

    4.Yi Yan, et al.
    Transcriptional regulation of microRNA-126a by farnesoid X receptor in vitro and in vivo
    Biotechnology Letters 2020

    5.Meng Wang, et al.
    trans-Cinnamaldehyde Reverses Depressive-Like Behaviors in Chronic Unpredictable Mild Stress Rats by Inhibiting NF-κB/NLRP3 Inflammasome Pathway
    Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine 2020
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      :主要由微滴板载、滑板、传动带、滑轨和走板电机等组成。磁力传动可提高整机的密封性,微滴板载与其驱动机构之间由机壳左部的导板完全隔离。在磁力作用下,微滴板载在机壳左部的导板内来回运动,完成微滴板载的进退功能。 (3)压力和真空单元:主要由真空/压力泵、真空管路、压力管路、电磁阀、洗液瓶和废液瓶等组成。 (4)电源开关、处理器控制单元及外设:电源开关为电磁阀、升降电机,提供直流电源。处理器系统由单片机、程序存储器、数据存储器及相应的锁存译码芯片构成,通过I/O接口来控制键盘和显示屏等外设

    • 【求助】请教提取核蛋白的方法,应该注意什么?

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    • 蛋白质浓缩提取和细胞裂解产品介绍

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