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文献和实验蛋白;③含多个内部起始序列和多个终止转移序列 T多次跨膜的膜蛋白。 2. GFP的特性 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)是一种能够自身催化形成发色结构,并在蓝光或紫外光的激发下发出荧光的新型报告基因。GFP的发现及其研究迅速发展,使人们能够在正常生活条件下对活细胞内分子水平上进行的各种过程及其分子机理进行观察和研究。目前的研究表明,GFP能在多种生物,如细菌,酵母,植物及哺乳动物中
产物; (3)其表达产物能进行定量测定。 一、在植物基因工程研究领域,已使用的报告基因主要有以下几种: 胭脂碱合成酶基因(nos)、章鱼碱合成酶基因(ocs) nos、ocs这两个基因是致瘤土壤农杆菌(Agrobacterium tumfaciens)的Ti质粒 特有的,对Ti质粒 进行改造,用相应的致瘤农杆菌转化植物体时,如果外源基因转入植物体中,则这两种报告基因在植物根茎叶中均能表达,不受发育调控,检测时直接用转化体提取液进行纸电泳,染色后在紫外光下观察荧光即可。 新霉素磷酸转移
用X-光片或专门仪器进行检测。具有检测速度快、灵敏度比cat基因高30~1000倍、费用低、不需使用放射性同位素等优点,得到了广泛的采用。 β-D-葡萄糖苷酶基因 该酶催化底物形成β-D-葡萄糖苷酸,它在植物体中几乎无背景,组织化学检测很稳定,可用分光光谱 、荧光等进行检测。 除此之外还有庆大霉素转移酶基因等 在动物基因表达调控的研究中,已使用的报告基因主要有以下几种: 绿色荧光蛋白(gfp)基因等。 绿色荧光蛋白来源于海洋生物水母,其基因可在异源组织中表达并产生荧光,GFP Cdnad
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