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- 技术资料
- 保存条件：
4℃避光
- 供应商：
lablead
- 规格：
500T
Calcein AM /PI 试剂盒
货号：C30002
存储温度：4℃避光干燥
产品简介：
钙黄绿素-AM (Calcein-AM)和碘化丙啶(PI)溶液，分别对活细胞和死细胞染色，可用于同时对活细胞和死细胞进行荧光染色。Calcein-AM 的乙酸甲基酯亲脂性很高，使其可透过细胞膜。尽管 Calcein-AM 本身并不是荧光分子，但通过活细胞内的酯酶作用，Calcein-AM 能脱去 AM 基，产生的 Calcein 能发出强绿色荧光(激发: 490 nm，发射: 515 nm)。因此 Calcein-AM 仅对活细胞染色。另一方面，作为核染色染料的 PI 不能穿过活细胞的细胞膜。它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的DNA 双螺旋从而产生红色荧光 (激发: 535 nm， 发射: 617 nm)。由于 Calcein 和 PI-DNA 都可被 490 nm 激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用 545 nm 激发，仅可观察到死细胞。由于不同细胞系的最佳染色条件不同，我们建议个别确定 Calcein-AM 和 PI 的合适浓度。
试剂
Calcein-AM 2mM 50uL in DMSO; PI (2mM) 150uL in water
用荧光显微镜观察细胞形态
以 HeLa 细胞染色为例，请注意不同的细胞种类、不同浓度，有不同的观察条件。根据细胞条件，摸索不同条件下的细胞贴壁情况和试剂浓度的配制等最佳条件。
（1）用 1 ml 无水 DMSO 溶解 2 mg Calcein-AM，制备成 2 mmol/l 的 Calcein-AM 储备液，-20℃ 下密闭冷冻保存。
（2）用 1 ml ddH2O 溶解 2 mg PI，制备成 2 mmol/l 的 PI 储备液，-20 度下密闭冷冻保存，可以保存一年。
2.细胞染色
3.染色试剂的最佳浓度
注意事项
Calcein-AM 的 ester 部位遇到湿气会分解，使用后请在-20 度下密闭冷冻保存，防止水分进入。Calcein-AM 储备液用缓冲液或培养基等稀释时尽量现配现用。使用时一定要带手套、眼罩、口罩。万一接触到皮肤的话，迅速使用大量水清洗。
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用户评价
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文献和实验Well-established immunotherapy with R837-loaded boron neutron capture-shocked tumor cells；nano today；IF:17.6；DOI:10.1016/j.nantod.2023.101995
