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上海代轩生物科技有限公司
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质粒载体构建
质粒载体构建
载体构建(vectorconstruction)是把连接好的DNA分子运送到受体细胞中去。首先,必须寻找一种能进入细胞、在装载了外来的DNA片段后仍能照样复制的运载体。理想的运载体是质粒(plasmid),在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。当给质粒插入一段外源DNA片段后,它依然能够进行自我复制。 载体构建是分子生物学研究常用的手段之一。载体构建完成后可利用PCR原理进行测序验证。
一、载体构建服务说明
1、客户提供载体构建及改造所需的实验方案,目的基因产物以及载体来源及基因背景资料等。
2、若客户只提供组织、细胞等样本,还需提供目的基因NCBI登录号或电子版全序列。本公司将额外收取RNA提取及逆转录费用。
3、对于表达载体、报告基因载体以及病毒载体等的构建,您需要提供序列资料、希望克隆到的载体、酶切位点等资料;
二、结果提供
1.实验报告:包括实验方法、照片图片等;
2.构建好的重组质粒、含该质粒的甘油菌各一份
3.引物序列、载体图谱一份、测序结果各一份;
载体构建(vectorconstruction)是把连接好的DNA分子运送到受体细胞中去。首先,必须寻找一种能进入细胞、在装载了外来的DNA片段后仍能照样复制的运载体。理想的运载体是质粒(plasmid),在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。当给质粒插入一段外源DNA片段后,它依然能够进行自我复制。 载体构建是分子生物学研究常用的手段之一。载体构建完成后可利用PCR原理进行测序验证。
一、载体构建服务说明
1、客户提供载体构建及改造所需的实验方案,目的基因产物以及载体来源及基因背景资料等。
2、若客户只提供组织、细胞等样本,还需提供目的基因NCBI登录号或电子版全序列。本公司将额外收取RNA提取及逆转录费用。
3、对于表达载体、报告基因载体以及病毒载体等的构建,您需要提供序列资料、希望克隆到的载体、酶切位点等资料;
二、结果提供
1.实验报告:包括实验方法、照片图片等;
2.构建好的重组质粒、含该质粒的甘油菌各一份
3.引物序列、载体图谱一份、测序结果各一份;
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文献和实验相关实验
1、载体基本介绍 2、载体分类及应用 3、载体构建及应用注意事项
慢病毒载体构建.pdf
在丁香园见过很多大佬分享载体构建经验,所以我这里写的T载体构建只能算是入门级,给新手提供一点思路,有什么不足之处还希望大家多多指正。 我克隆的这个片段大小是1.8kb,用的是TaKaRa的LA-Taq酶做的PCR。 反应体系:5*buffer 5 ul MgCl2 5 ul dNTPs 8 ul Primer 1 1 ul Primer 2 1 ul LA-Taq 0.5 ul cDNA 1 ul (1ug左右基因组DNA) ddH2O up to 50 ul
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