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北京双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)价格

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  • ¥130 - 1720
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN91202-CFK
  • 2025年07月11日
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    • 英文名

      Two-Enzyme One-Tube RT-PCR Kit

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      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应北京双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:北京双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)价格
    英文名:Two-Enzyme One-Tube RT-PCR Kit
    规格:50次
    编号:BTN91202
    本产品是经过精心优化的、基于MMLV 逆转录酶和Taq DNA聚合酶的双酶一管式RT-PCR试剂盒,它含有除模版RNA和其专一性引物以外的所有RT-PCR试剂,包括MMLV 逆转录酶、Taq DNA聚合酶、RT-PCR缓冲液等,可以在同一反应管内完成RNA→cDNA→PCR反应(RT-PCR反应)。

    产品特点:
    1.一管式完成RT-PCR反应,避免样品交叉污染。
    2. 即开即用,用户不需要单独准备RT-PCR所需的各种试剂。
    3. 主要成分只有两个RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix,将加样步骤减少到最低,极大降低了加样误差,增加了可重复性。
    4. 使用范围广,适用于从病毒RNA 到人RNA的各种RNA 模板。
    5.高灵敏度,每个RT-PCR 体系最低可以检测200拷贝的RNA分子,可扩增的模版RNA的最长达2000nt。
    6. 所得RT-PCR产物可以直接用于AT克隆。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    双酶一管式RT-PCR Buffer(2×) 750μl
    MMLV-Taq Mix 100μl
    RNase-free水 1ml
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    注意:所有离心管用前最好全部短暂离心几秒使管壁上溶液沉淀到管底。下面以一个30μL 体系的RT-PCR 为例,如果体积不同,各成分用量需要适当调节。
    1.在一干净的无RNase的PCR管中,先加入下列成分:
    成分 阴性对照 样品
    RNA模板(自备,分下面三种情况) 见下
    总RNA 100-500ng
    或poly(A)mRNA 10-500ng
    或体外转录得到的专一RNA 0.01 pg-500ng
    RNA特异性引物一(自备) 终浓度300nM 终浓度300nM
    RNA特异性引物二(自备) 终浓度300nM 终浓度300nM
    探针(仅对Realtime RT-PCR) 终浓度200nM 终浓度200nM
    RNase-free水 补到13μL 补到13μL
    双酶一管式RT-PCR Buffer(2×) 15μl 15μl
    MMLV-Taq Mix 2μl 2μl

    注:通常初次使用本试剂时,可用引物浓度300nM,探针浓度200nM进行实验,根据实验结果具体情况,在200~800nM 范围内调整引物浓度,在50~400nM 范围内调整探针浓度以达到最佳检测效果。引物、探针、待检样品的具体加量用户可以根据实际情况调整,同时增减DEPC 水用量,保证总反应体积不变即可。
    2. 轻柔混合均匀后放入PCR 仪中进行RT-PCR。
    3. 设定RT-PCR反应条件时,一般将RT的条件设定成42℃,30 钟,后接94℃变性5分钟,然后进入PCR循环(PCR参数将根据自备引物的Tm 值由用户自行决定注)、最后72℃,5分钟。对Realtime PCR,在复性步骤设置荧光检测,检测通道:FAM/HEX/VIC/ROX/CY5
    4. RT-PCR结束后取5-10μL电泳检查。

    注意事项:
    1. 使用已校准的移液器,选用一次性PCR反应管、离心管、tip 头等进行样本处理及配液等操作,所有用具应不含DNA酶和RNA酶。
    2.引物、探针设计过程中应尽可能避免发夹结构、二聚体等现象的发生,探针的位置尽可能靠近上游引物,PCR 目标片段最好小于200bp,尽可能在150bp以内。
    3. 实验样品尽可能新鲜,提取过程应严防RNA酶污染及操作不当导致的RNA 降解。
    4. 使用本产品时建议对RT-PCR扩增条件、引物浓度和样品用量进行调整,选择最适当的引物浓度、样品浓度和PCR扩增条件。
    5. 本产品使用前应在室温充分融解,并用漩涡震荡器充分混匀。
    6. 统一配液后分装以减少加样误差,每次实验应设置阴性对照。
    7. 禁止标记PCR反应管,避免外源性荧光信号干扰。
    8. PCR反应管中不能有气泡,否则会产生非特异的荧光信号。若有气泡,可先用手指将气泡弹破,然后再低速离心消除。
    9. 实时荧光PCR 仪器连续进行实验时,最好间隔一小时以上再使用。
    10. 实时荧光PCR 仪需经常校正和清洁载样板板孔。
    11. 若使用Roch LightCyclerTM荧光PCR 仪,应将毛细管放在专门套管中,以便分装反应体系和加入待检样品。前述操作完毕应低速离心数秒再将毛细管垂直缓慢放入样品架,以免折断;若发生折断,应小心取出,用专用小毛刷擦拭干净后方可进行扩增。
    12. 实验室应严格分区,避免PCR产物污染。

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    ·MMLV逆转录酶(无RNase H活性)
    编号:BTN131209
    英文名称:MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-)
    规格:1000U
    M-MLV逆转录酶(RNase H缺失),是RNA依赖的DNA聚合酶,可用于长mRNA(>5kb)为模板的cDNA合成。它是M-MLV 逆转录酶的一种类型,已经经过基因改造,去除了RNase H的活性。虽然许多研究者已经成功使用M-MLV RT(H+)进行了一些cDNA制备应用及分析,但是缺失了RNase H活性的逆转录酶为长cDNA的制备及包含高比例全长cDNA的文库制备提供了更好的选择。

    储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。

    ·柱式白色念球菌RNA提取试剂盒
    编号:BTN130847
    英文名称:Candida albicans RNA Column extraction kit
    规格:50次
    M-MLV逆转录酶(RNase H缺失),是RNA依赖的DNA聚合酶,可用于长mRNA(>5kb)为模板的cDNA合成。它是M-MLV 逆转录酶的一种类型,已经经过基因改造,去除了RNase H的活性。虽然许多研究者已经成功使用M-MLV RT(H+)进行了一些cDNA制备应用及分析,但是缺失了RNase H活性的逆转录酶为长cDNA的制备及包含高比例全长cDNA的文库制备提供了更好的选择。

    储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。

    ·TdT加尾法DNA地高*(代"辛")标记试剂盒
    编号:BTN90605C
    英文名称:TdT-Tailing DNA Labeling Kit
    规格:5次
    本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3´端添加dNTP尾巴的原理而设计,该反应的示意图如下:
    TdT加尾法DNA地高*(代

    产品特点:
    1.快速,15分钟即可完成标记反应。
    2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记,还可用于3´突出的双链DNA标记,但后者标记效率稍低。
    3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
    4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高*(代"辛")标记核苷酸三种选择。
    5. 同时提供非标记的dATP,用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
    6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。

    试剂盒组成:
    成分 规格
    TdT缓冲液,5× 20μl
    TdT(末端转移酶,10U/μL) 10μl
    dATP,2mM 5μl
    标记核苷酸 (A、B、C不同,见注)
    超纯水 1ml
    说明书 1份

    注:A型用于自选标记,用户需自备标记核苷酸,本产品不提供标记核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针,请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度):
    成份 用量
    探针DNA 100-200 pmol
    TdT Buffer,5× 4μl
    标记核苷酸,1mM
    (A型需自备标记核苷酸)
    1μl
    dATP,2mM (见下注)
    TdT末端转移酶(10U/μL) 2μl
    超纯水 补到20μl

    注:dATP可以不加,但这样得到的加尾全部是标记核苷酸,由于空间阻碍,灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好,掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中,以控制标记的密度,提高比活。具体比例如何可以自己优化。
    2. 37℃反应15分钟,延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在,一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长);如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本试剂盒只提供dATP而已),每条探针上可加上约100个核苷酸,平均含5个标记核苷酸
    3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
    4. 如果需要,可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率,带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
    5. 如果是非同位素标记,探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针,请不要酚/*仿抽提,因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
    6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA,加入前还需热变性)。如果不立即使用,非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年,同位素标记的探针DNA不能放置。


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    ARB11043 人环磷酸鸟苷(cGMP)含量检测 Human cyclic guanosine monophosphate,cgmp ELISA KIT
    BOC-L-酪*酸甲酯 Fast Red TR Salt hemi(zinc chloride) sal 4326-36-7
    PY01-018  牛胆酸*  25克  
    BL1399 线粒体提取试剂盒
    柠檬酸* Itaconic acid 5785-44-4
    F030806 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a*BIOTIN
    F030431 胶体金标记兔抗绵羊IgG抗体 Rabbit Anti-Sheep IgG*GOLD
    变旋酶 Streptozotocin 9031-76-9
    L-高*丙*酸 Ticarcillin disodiu*(代"m") salt  943-73-7
    ARB13048 小鼠环磷酸鸟苷(cGMP)elisa检测 Mouse cyclic guanosine monophosphate,cgmp ELISA KIT
    乙酰辅酶A 2-Aminothiazol-4-acetic acid 102029-73-2
    磷酸* 3-(2-Aminoethylamino)propyldimethoxymethylsilane 10377-52-3
    BTN131072 预稀释BSA蛋白标准品 Instant BSA Standard
    001009 驴血清 100ml|500ml
    F020103 兔抗辣根过氧化物酶抗体 Rabbit Anti-HRP
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    50-23-7 
    DL-苹果酸* CAPS Sodium salt 17482-42-7
    J0304          兔抗马IgG(H+L)抗血清            

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