YT468型C端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)厂商

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名称：YT468型C端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)厂商
英文名：C-YFP plasmid（with CMV promoter）
品牌：百奥莱博
规格：1μg
编号：YT468
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含YFP(Yellow Fluorescent Protein, 黄色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个YFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有YFP标签的融合蛋白。利用YFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白表达水平和细胞内定位，也可以利用YFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。YFP与GFP高度相似，可尝试用GFP抗体检测YFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

本质粒的主要信息如下：

 

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
Multiple cloning site	651-740
YFP	741-1460
T7 promoter and T7 primer binding site	1510-1531
SV40 polyAsignal	1543-1926
f1 origin of ss-DNA replication	2064-2370
bla promoter	2395-2519
SV40 promoter	2539-2877
Neomycin/kanamycin resistance ORF	2912-3703
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3704-4162
pUC origin	4291-4958

本质粒(5010bp)的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

储存条件：-20℃。

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Hot Taq酶 Trypsin inhibitor(soybean)
胃蛋白酶抗原修复液   100ml
9001-12-1 CollagenaseⅢ  胶原酶Ⅲ
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多聚甲醛-戊二醛混合固定液(4%/0.5%)   500ml
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1390-65-4 洋红 Carmine
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L-天冬酰胺 N-Z-S-phenyl-L-cysteine 70-47-3
乙酸*溶液(2mol/L,pH4.0,无菌)   500ml
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*酚蓝 5-Aminolevulinic acid hydrochloride 115-39-9
叶绿素铜*盐 4′-Chloroacetanilide 11006-34-1
002006 EDTA抗凝羊血 100ml|500ml
DL-丙交酯 TNBS 95-96-5
姬姆萨染色液(10×) Giemsa stain  2×100ml|2×500ml
L-甲基多巴 Ethylenediamine dihydrochloride 41372-08-1
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苦酮酸 H-Leu-Ome?HCl 550-74-3
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F030508 FITC标记兔抗人血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-HSA*FITC
*检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝比色法)   50T
SJ0725 D-Hank，s 含酚红 含** 
BTN100940 石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒 FFPE WGA Kit
BL1120 柠檬酸*缓冲液0.01mol/L， pH6.0，干粉
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PY02-211  产芽孢肉汤  250克  
D-天冬酰胺一水物 Chlorosulphonphenol S 2058-58-4或5794-24-1
ARB13431 鸡分泌型免疫球蛋白A(SIgA)尿液中含量检测 Chicken secretory immunoglobulin a,siga ELISA KIT
BTN120615 dATP溶液,100mM dATP Solution
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·细胞膜绿色荧光探针(DiO)
编号：YT174
英文名称：DiOC18(3)
规格：10mg
本探针是最常用的细胞膜荧光探针之一，呈现绿色荧光。DiO是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiO被激发后可以发出绿色的荧光，DiO和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱参考下图。其中，最大激发波长为484nm，最大发射波长为501nm。



CAS：34215-57-1
分子式：C53H85ClN2O6
分子量：881.72

DiO可以溶解于无水乙醇、DMSO和DMF，溶解度约为1-2.5mg/ml。发现较难溶解时可以适当加热，并用超声处理以促进溶解。

DiO被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。DiO通常不会明显影响细胞的生存力(viability)。DiO对于细胞膜染色的荧光强度通常要低于DiI，有时对于某些经过固定的组织的染色效果欠佳。

DiO除了最简单的细胞膜荧光标记外，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

用于细胞膜荧光标记时，DiO的常用浓度为1-30μM，最常用的浓度为5-10μM。DiO可以直接染色活的细胞或组织，染色时间通常为5-20分钟。对于固定的细胞或组织，通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。

注意事项：荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

储存条件：4℃避光，有效期一年。

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