北京农杆菌AGL1化学感受态细胞价格

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名称：北京农杆菌AGL1化学感受态细胞价格
规格：10×100μL
品牌：百奥莱博
编号：BTN140382
产地：国产|进口
 AGL1菌株为C58，RecA型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif和羧苄青霉素抗性基因carb，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒 pTiBo542DT-DNA，此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA 插入植物基因组必需的元件，pTiBo542DT-DNA质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA 顺利转移)。

 本产品为AGL1 农杆菌化学感受态细胞，适用于水稻、杨树、拟南芥等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。

基因型：C58 RecA(rifr/carbr)Ti pTiBo542DT-DNA Succinamopine。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期一年。

自备试剂：质粒DNA、液氮等

使用方法：

转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。
2. 无菌条件下，向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒，每100μL感受态细胞加1μg(体积不大于10μl)质粒DNA，轻柔混匀。冰水浴中静置5分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻5分钟(注：也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟，不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基，28-30℃振荡培养2～3小时。使菌体复苏，表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌，保留100μl左右上清，轻轻吹打重悬菌体，均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上，待平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28-30℃培养48-72小时。(注：当平板只含有50μg/mLkan时，28℃培养48小时即可；平板中同时加入50μg/mL kan，20μg/mL rif时，需28℃培养60小时；如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要28℃培养72-90小时)。

更多有关北京农杆菌AGL1化学感受态细胞价格的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
组织蛋白快速提取试剂盒(离心柱法，2D电泳用)   50T|100 T
ARB12103 大鼠甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)免费代测 Rat mannma binding protein/mannan binding lectin,mbp/mbl ELISA KIT
ARB10099 人EJ抗体/抗甘*酰tRNA合成酶抗体(EJ/GlyRS)含量分析 Human anti-ej-antibody，ej/glyrs ELISA KIT
28631-66-5 **(代"胺")蓝(醇溶) Aniline blue water soluble
6%绵羊红细胞 100ml
Tris-EDTA缓冲液(1×TE,pH7.4)   500ml
ARB10142 人P*黏蛋白/胎盘*黏蛋白(P-cAd)Elisa方法检测 Human placenta cadherin,p-cad ELISA KIT
ARB12526 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)elisa检测 Rat inhibitory subunit of nf-κbα,ikbα ELISA KIT
氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率比色法)   100T
ARB12598 大鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)检测服务 Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 4,timp-4 ELISA KIT
SJ0245 Doxycycline-HCL 盐*(代"酸")强力霉素
乙酸* AHMT 127-08-2
BTN90707 动植物总蛋白微量提取试剂盒 Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit
PY02-377  菌种芽孢培养基  250克  
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·96孔板病毒RNA提取试剂盒(离心法)
编号：BTN80922
英文名称：Virus RNA extraction kit with 96-well plate(Centrifugal method)
规格：1次|5次

·一站式生物素检测TUNEL试剂盒(DAB法)
编号：BTN81026
英文名称：One-Stop Biotin-Based TUNEL Kit
规格：10次
TUNEL就是末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口及末端标记(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)，它是一种高灵、敏度、快速检测细胞凋亡的方法。其原理是在发生凋亡细胞中会有大量的具有切口的DNA片段、或具有游离3´-OH端、长度是180-200bp倍数的DNA片段，TdT(末端脱氧核苷酸转移酶)可以以不依赖模板的方式进行标记，如参入荧光素、生物素或地高*(代"辛")等标记的dUTP，而正常细胞DNA几乎没有游离的3´-OH和切口，所以通过对标记物的显色反应和荧光显微镜或流式细胞仪检测就可以区分正常和凋亡的细胞。

试剂盒特点：
1．一站式，不需要额外准备专用的试剂(但客户还是需要自备常规的试剂，如水、PBS和细胞涂片所需试剂)。
2．高灵敏度，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，适合检测早期的细胞凋亡。
3．特异性高，只标记凋亡细胞，而不标记坏死细胞。
4．快速，整个操作过程仅需1-2个小时即可完成。
5．方便，一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。
6．适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)，本试剂盒足够处理十张切片使用。

试剂盒组成：

 

成分	规格
1×TdT Buffer	0.5ml
TdT酶(20U/μL)	10μl
蛋白酶K溶液(200μg/mL)	1ml
Streptavidin-HRP	50μl
DAB干粉	1mg
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、样本预处理(操作步骤仅供参考，本试剂盒不提供相关试剂)
下面所用的固定液、淬灭液和通透液均需要新鲜配制。固定液是溶于pH7.4的PBS中的、浓度为4%的多聚甲醛溶液；淬灭液是用甲醇将H2O2原液(30%)稀释到3%而得；通透液是溶于0.1%柠檬酸*中的、浓度为0.1%的Triton X-100溶液。

对贴壁细胞或细胞涂片
1．将自然晾干的贴壁细胞或细胞涂片浸入固定液中室温固定30-60分钟。为改善细胞的渗透性，可将固定好的样本放在70%乙醇中-20℃放置过夜。为防止样本脱落，可使用硅烷处理的载玻片或采用多聚赖*酸铺片。
2．用自备的PBS漂洗2次，每次5分钟。
3．浸入淬灭液中室温放置10分钟后，用PBS漂洗2次，每次5分钟。
4．浸入通透液中，冰上放置2分钟后，用PBS漂洗 2次，每次5分钟。用吸水纸吸干样本周围水分，待用。
对石蜡组织切片
1．将切片置于染缸中，用二甲*脱蜡2次，每次5分钟；再分别用100%、95%、90%、80%、70%的乙醇和PBS各洗一次，每次3分钟。
2．在每张切片上滴加100μl蛋白酶K工作液(10μl蛋白酶K溶液+90μlPBS缓冲液)并在室温放置15-30分钟以降解交联的蛋白和其他内源蛋白。注意：蛋白酶K工作液的用量和处理时间一般都需根据样品的不同而单独进行优化，此处的用量只供参考。蛋白酶K处理后不需要再淬灭内源蛋白酶。
3．用PBS漂洗4次，每次3分钟。此步不能省略，否则残留的蛋白酶K将会降解后面降压加入的TdT。用吸水纸吸干样本周围水分，待用。
对冰冻切片
1．将切片在固定液中室温固定20-60分钟，PBS洗涤2次，每次10分钟。
2．浸入淬灭液中室温放置10分钟后，用PBS漂洗两次，每次5分钟。
3．浸入通透液中冰上放置2分钟后，用PBS漂洗两次，每次5分钟。用吸水纸吸干样本周围水分，待用。
阳性对照样本
所有处理步骤跟样品一样，只是在最后还需在样品上滴加100μL自备的DNase I反应液室温放置10-30分钟。反应液含40mM Tris-HCl pH7.9，10mM NaCl，6mM MgCl2，10mM CaCl2和不同浓度的DNaseI(冷冻切片需3U/mL、石蜡切片需1500 U/mL、一般样本需10U/mL)。用PBS洗两次，每次5分钟。用吸水纸吸干周围水分后待用。

二、标记和显色反应
1．配制所需量的TdT酶反应液：将1μl TdT酶加入到 50μl 1×TdTBuffer中即可。TdT酶反应液需即用即配，不宜保存，否则酶会失活。
2．在除阴性对照外的每个样本上滴加50μl TdT酶反应液，加盖玻片后37℃避光放置60分钟。注意：加盖玻片可使反应液均匀分布，并避免其挥发。阴性对照只滴加50μl不含TdT酶的反应液。
3．用自备的PBS清洗3次，每次 5分钟，用吸水纸吸干样本周围残留液体。
4．将5μl Streptavidin-HRP溶液加入45μl PBS中，混匀后全部加在切片上并加盖玻片，37℃避光放置30分钟。
5．用自备的PBS清洗4次，每次5分钟，用吸水纸吸干样本周围残留液体。
6．滴加50μl 新鲜配制的DAB工作液(将1mg DAB干粉溶于1mL PBS中，取50μL与1μl 30% H2O2混合即得DAB工作液，剩余的DAB溶液可-20℃避光保存)，室温显色10分钟。
7．PBS漂洗4次，前3次每次1分钟，最后1次5分钟。
8．光学显微镜下观察、拍照。亦可用苏木素或甲基绿复染复染后再观察。


北京农杆菌AGL1化学感受态细胞价格关键词：BTN140382,农杆菌AGL1化学感受态细胞,E.coli AGL1 Chemical Competent Cell

PL0801 中量质粒提取试剂盒(溶液型，无内毒素，转染级)
ARB13879 猪白介素6(IL-6)酶免分析 Porcine interleukin 6,IL-6 ELISA KIT
PY04-017  新鲜番茄汁  5ml×10支  每支添加于95ml改良番茄汁琼脂培养基基础中制成改良番茄汁琼脂培养基，用于乳酸菌菌落总数的测定
尿胆红素定性检测试剂盒(Harrison法)   50T
ARB13145 小鼠活化素A(ACV-A)检测服务 Mouse activin a,acv-a ELISA KIT
D-天冬*酸 Carbonate Buffer solution 1783-96-6
ARB10781 人抗弓形体IgM抗体(Anti-tox IgM)酶标法分析 Human anti-toxoplasma igG antibody,anti-tox igG ELISA KIT
C1201 小鼠血清(无菌过滤)
ARB10008 人15脂加氧酶(15-LO/LOX)酶联免疫定量检测 Human 15-lipoxygenase,15-lo/lox ELISA KIT
干酪素* Sodium citrate dihydrate 9005-46-3
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87-89-8 Inositol 肌醇
尿素(Urea)检测试剂盒(二乙酰一肟比色法)   100T
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F020220 山羊抗人IgG FC抗体 Goat Anti-Human IgG(FC)
ARB10006 人12羟二十烷四烯酸(12-HETE)Elisa方法检测 Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid,12-hete ELISA KIT
ARB13430 鸡巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)代做ELISA实验 Chicken alternative macrophage activation-associated cc chemokine 1,amac-1 ELISA KIT
血清/血浆游离DNA提取试剂盒 
BTN100833 PMSF溶液 PMSF Solution

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