- ¥420
- BMD
- BC306-01
- 2025年09月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海觅拓
- 规格：
20×50μl
AGL1菌株为农杆菌C58, RecA型背景(Lazoet al.,1991)，核基因中含有利福平抗性基因(Rif)和羧苄青霉素抗性基因(Carb)。此菌株还携带一种自身转运功能丧失的质粒(disarmed Ti plasmid)，AGL1菌株含有琥珀碱型Ti质粒pAGL0(pTiBo542DT-DNA)，该质粒含有vir基因（vir基因是TDNA插入植物基因组所必需的元件，pAGL0(pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可辅助植物双元表达载体的T-DNA的转移）。pAGL0(pTiBo542DT-DNA)质粒还含有Str抗性基因，赋予AGL1菌株链霉素抗性。AGL1农杆菌适用于水稻、拟南芥、杨树等植物的转基因操作。AGL1 电转感受态特别适用大质粒的转化，经pCAMBIA2301 质粒检测转化效率大于105 cfu/μg DNA。
产品特点
基因型：C58RecA (Rif R/CarbR) TipTiBo542DT-DNA(StrR) ,Succinamopine type
产品储存
-70℃保存，避免反复冻融。
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文献和实验（如 Cas9）（图 2）,Cas9 能够将该序列进行切除（图 3）。正是基于细菌的这种后天免疫防御机制，CRISPR/Cas9 技术应运而生，从而使科学家们利用 RNA 引导 Cas9 核酸酶实现对多种细胞基因组的特定位点（如 NHEJ 非同源性末端接合) (图 4) 进行修饰。为什么要电转？CRISPR 革命已经开始，将 CRISPR 结构导入特定细胞 (如干细胞、神经细胞、造血细胞、受精卵, 等等) 用普通地方法往往很困难。电穿孔技术可使这些细胞在精确的电脉冲作用下，在细胞膜上形成瞬时的空隙
北京生物研究所的团队优化了 CAR-T 生产的电转染条件，可以在 6 天内生产出对肿瘤细胞有正常杀伤效果的 CAR-T 细胞。 无论做基础研究还是在临床的免疫治疗中，拥有一套关于人原代T细胞工程的有效基因转导系统是十分重要的。假病毒系统和电转染是目前最流行的基因转导策略，但与病毒颗粒介导的方法相比，电转染理论上更安全，因为它没有使转导的基因整合到宿主基因组上。此外，电转导具有方便、快捷的有点，使其更有吸引力。在此，北京生物研究所的研究者开发了一种用于生产嵌合抗原受体(CAR)-T 细胞的电转
试剂准备： LB培养基: 500mL 双蒸水：600mL 高压灭菌 预冷 10%甘油：1000mL 预冷 250ml离心杯：高压灭菌 预冷 50mL离心管数个，250mL摇瓶4个，1.5mL EP管 高压灭菌 制备步骤： 1、接种原代菌（DH5α或DH10B），次日挑取单菌落，放入1mL LB培养基中，37℃，300rpm，6 hr
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