- ¥420
- BMD
- BC305-01
- 2026年01月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-70
- 供应商：
上海觅拓
- 规格：
20×50μl
LBA4404菌株为农杆菌Ach5型背景(Hoekema et al., 1983)，核基因中含有利福平抗性基因(Rif)。此菌株还携带一种自身转运功能丧失的质粒(disarmed Ti plasmid)，LBA4404菌株含有章鱼碱型Ti质粒pAL4404，该质粒含有vir基因（vir基因是TDNA插入植物基因组所必需的元件，pAL4404质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可辅助植物双元表达载体的T-DNA的转移）。pAL4404质粒含有链霉素抗性(Str)，赋予LBA4404菌株链霉素抗性。LBA4404农杆菌适用于番茄、烟草等植物的转基因操作。LBA4404电转感受态特别适用大质粒的转化，经pCAMBIA2301 质粒检测转化效率大于105 cfu/μg DNA。
产品特点
基因型：Ach5 (Rif R) Ti pAL4404 (StrR), Octopine type
产品储存
-70℃保存，避免反复冻融。
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文献和实验相关专题 DNA连接与转化 农杆菌感受态细胞的制备 1.挑取少许农杆菌LBA4404，接种于5ml LB液体培养基 (含50mg/L STR)中，28℃、200r/mim培养过夜。 2.取2ml培养物于LB液体培养基 (含50mg/L STR) 中继续培养，直至OD800 为0.5左右。 3.将培养物置冰浴中30min，4℃、5000r/min、离心5min，弃去上清液。 4.用10ml冷
双元载体的农杆菌转化1.1农杆菌感受态细胞的制备1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线，28℃培养。1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中，220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中，28℃220rpm振荡培养至OD600=0.5。1.1.4. 转入无菌离心管，5000rpm离心5min,去上清液。1.1.5. 加入10ml预冷的0.1M的CaCl2溶液，轻轻悬浮细胞，冰上放置
试剂准备： LB培养基: 500mL 双蒸水：600mL 高压灭菌 预冷 10%甘油：1000mL 预冷 250ml离心杯：高压灭菌 预冷 50mL离心管数个，250mL摇瓶4个，1.5mL EP管 高压灭菌 制备步骤： 1、接种原代菌（DH5α或DH10B），次日挑取单菌落，放入1mL LB培养基中，37℃，300rpm，6 hr
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