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- 上海
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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pUC35s-mCherry
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pUC35s-mCherry植物荧光质粒
别称: pUC35s-mCherry
质粒属性
质粒简介
pUC35s-mCherry植物红色荧光瞬转表达质粒，本质粒由武汉淼灵生物科技有限公司构建并共享至淼灵质粒平台。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4053 bp ds-DNA circular SYN 01-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4053
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 439..784
/label=CaMV 35S promoter
/note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic
virus"
CDS 823..1533
/codon_start=1
/product="monomeric derivative of DsRed fluorescent protein
(Shaner et al., 2004)"
/label=mCherry
/note="mammalian codon-optimized"
/translation="MVSKGEEDNMAIIKEFMRFKVHMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEG
TQTAKLKVTKGGPLPFAWDILSPQFMYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNF
EDGGVVTVTQDSSLQDGEFIYKVKLRGTNFPSDGPVMQKKTMGWEASSERMYPEDGALK
GEIKQRLKLKDGGHYDAEVKTTYKAKKPVQLPGAYNVNIKLDITSHNEDYTIVEQYERA
EGRHSTGGMDELYK"
terminator 1550..1802
/label=NOS terminator
/note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"
rep_origin complement(2234..2822)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(2993..3853)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(3854..3958)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
181 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc
241 attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat
301 tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt
361 tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgccaa gctttcaaag atacagtctc
421 agaagaccaa agggcaattg agacttttca acaaagggta atatccggaa acctcctcgg
481 attccattgc ccagctatct gtcactttat tgtgaagata gtggaaaagg aaggtggctc
541 ctacaaatgc catcattgcg ataaaggaaa ggccatcgtt gaagatgcct ctgccgacag
601 tggtcccaaa gatggacccc cacccacgag gagcatcgtg gaaaaagaag acgttccaac
661 cacgtcttca aagcaagtgg attgatgtga tatctccact gacgtaaggg atgacgcaca
721 atcccactat ccttcgcaag acccttcctc tatataagga agttcatttc atttggagag
781 aacacggggg actctagagg atccccgggt ggtcagtccc ttatggtgag caagggcgag
841 gaggataaca tggccatcat caaggagttc atgcgcttca aggtgcacat ggagggctcc
901 gtgaacggcc acgagttcga gatcgagggc gagggcgagg gccgccccta cgagggcacc
961 cagaccgcca agctgaaggt gaccaagggt ggccccctgc ccttcgcctg ggacatcctg
1021 tcccctcagt tcatgtacgg ctccaaggcc tacgtgaagc accccgccga catccccgac
1081 tacttgaagc tgtccttccc cgagggcttc aagtgggagc gcgtgatgaa cttcgaggac
1141 ggcggcgtgg tgaccgtgac ccaggactcc tccctgcagg acggcgagtt catctacaag
1201 gtgaagctgc gcggcaccaa cttcccctcc gacggccccg taatgcagaa gaagaccatg
1261 ggctgggagg cctcctccga gcggatgtac cccgaggacg gcgccctgaa gggcgagatc
1321 aagcagaggc tgaagctgaa ggacggcggc cactacgacg ctgaggtcaa gaccacctac
1381 aaggccaaga agcccgtgca gctgcccggc gcctacaacg tcaacatcaa gttggacatc
1441 acctcccaca acgaggacta caccatcgtg gaacagtacg aacgcgccga gggccgccac
1501 tccaccggcg gcatggacga gctgtacaag tgagagctcg aatttccccg atcgttcaaa
1561 catttggcaa taaagtttct taagattgaa tcctgttgcc ggtcttgcga tgattatcat
1621 ataatttctg ttgaattacg ttaagcatgt aataattaac atgtaatgca tgacgttatt
1681 tatgagatgg gtttttatga ttagagtccc gcaattatac atttaatacg cgatagaaaa
1741 caaaatatag cgcgcaaact aggataaatt atcgcgcgcg gtgtcatcta tgttactaga
1801 tcggggtacc gagctcgaat tcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg tgaaattgtt
1861 atccgctcac aattccacac aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa gcctggggtg
1921 cctaatgagt gagctaactc acattaattg cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg
1981 gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga ggcggtttgc
2041 gtattgggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc
2101 ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa tcaggggata
2161 acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg
2221 cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct
2281 caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa
2341 gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc
2401 tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcaaa gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt
2461 aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg
2521 ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta tcgccactgg
2581 cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct acagagttct
2641 tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaagaacagt atttggtatc tgcgctctgc
2701 tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg
2761 ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc
2821 aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt
2881 aagggatttt ggtcatgaga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt ttaaattaaa
2941 aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac agttaccaat
3001 gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga tctgtctatt tcgttcatcc atagttgcct
3061 gactccccgt cgtgtagata actacgatac gggagggctt accatctggc cccagtgctg
3121 caatgatacc gcgagaccca cgctcaccgg ctccagattt atcagcaata aaccagccag
3181 ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc cgcctccatc cagtctatta
3241 attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt cgccagttaa tagtttgcgc aacgttgttg
3301 ccattgctac aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg tatggcttca ttcagctccg
3361 gttcccaacg atcaaggcga gttacatgat cccccatgtt gtgcaaaaaa gcggttagct
3421 ccttcggtcc tccgatcgtt gtcagaagta agttggccgc agtgttatca ctcatggtta
3481 tggcagcact gcataattct cttactgtca tgccatccgt aagatgcttt tctgtgactg
3541 gtgagtactc aaccaagtca ttctgagaat agtgtatgcg gcgaccgagt tgctcttgcc
3601 cggcgtcaat acgggataat accgcgccac atagcagaac tttaaaagtg ctcatcattg
3661 gaaaacgttc ttcggggcga aaactctcaa ggatcttacc gctgttgaga tccagttcga
3721 tgtaacccac tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt tactttcacc agcgtttctg
3781 ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg acacggaaat
3841 gttgaatact catactcttc ctttttcaat attattgaag catttatcag ggttattgtc
3901 tcatgagcgg atacatattt gaatgtattt agaaaaataa acaaataggg gttccgcgca
3961 catttccccg aaaagtgcca cctgacgtct aagaaaccat tattatcatg acattaacct
4021 ataaaaatag gcgtatcacg aggccctttc gtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pUC35s-mCherry植物荧光质粒
别称: pUC35s-mCherry
| 复制子: | pUC |
|---|---|
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 植物 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Amp |
| 筛选标记： | |
| 荧光蛋白： | 红色 |
质粒简介
pUC35s-mCherry植物红色荧光瞬转表达质粒，本质粒由武汉淼灵生物科技有限公司构建并共享至淼灵质粒平台。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4053 bp ds-DNA circular SYN 01-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4053
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 439..784
/label=CaMV 35S promoter
/note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic
virus"
CDS 823..1533
/codon_start=1
/product="monomeric derivative of DsRed fluorescent protein
(Shaner et al., 2004)"
/label=mCherry
/note="mammalian codon-optimized"
/translation="MVSKGEEDNMAIIKEFMRFKVHMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEG
TQTAKLKVTKGGPLPFAWDILSPQFMYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNF
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GEIKQRLKLKDGGHYDAEVKTTYKAKKPVQLPGAYNVNIKLDITSHNEDYTIVEQYERA
EGRHSTGGMDELYK"
terminator 1550..1802
/label=NOS terminator
/note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"
rep_origin complement(2234..2822)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(2993..3853)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(3854..3958)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
181 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc
241 attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat
301 tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt
361 tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgccaa gctttcaaag atacagtctc
421 agaagaccaa agggcaattg agacttttca acaaagggta atatccggaa acctcctcgg
481 attccattgc ccagctatct gtcactttat tgtgaagata gtggaaaagg aaggtggctc
541 ctacaaatgc catcattgcg ataaaggaaa ggccatcgtt gaagatgcct ctgccgacag
601 tggtcccaaa gatggacccc cacccacgag gagcatcgtg gaaaaagaag acgttccaac
661 cacgtcttca aagcaagtgg attgatgtga tatctccact gacgtaaggg atgacgcaca
721 atcccactat ccttcgcaag acccttcctc tatataagga agttcatttc atttggagag
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901 gtgaacggcc acgagttcga gatcgagggc gagggcgagg gccgccccta cgagggcacc
961 cagaccgcca agctgaaggt gaccaagggt ggccccctgc ccttcgcctg ggacatcctg
1021 tcccctcagt tcatgtacgg ctccaaggcc tacgtgaagc accccgccga catccccgac
1081 tacttgaagc tgtccttccc cgagggcttc aagtgggagc gcgtgatgaa cttcgaggac
1141 ggcggcgtgg tgaccgtgac ccaggactcc tccctgcagg acggcgagtt catctacaag
1201 gtgaagctgc gcggcaccaa cttcccctcc gacggccccg taatgcagaa gaagaccatg
1261 ggctgggagg cctcctccga gcggatgtac cccgaggacg gcgccctgaa gggcgagatc
1321 aagcagaggc tgaagctgaa ggacggcggc cactacgacg ctgaggtcaa gaccacctac
1381 aaggccaaga agcccgtgca gctgcccggc gcctacaacg tcaacatcaa gttggacatc
1441 acctcccaca acgaggacta caccatcgtg gaacagtacg aacgcgccga gggccgccac
1501 tccaccggcg gcatggacga gctgtacaag tgagagctcg aatttccccg atcgttcaaa
1561 catttggcaa taaagtttct taagattgaa tcctgttgcc ggtcttgcga tgattatcat
1621 ataatttctg ttgaattacg ttaagcatgt aataattaac atgtaatgca tgacgttatt
1681 tatgagatgg gtttttatga ttagagtccc gcaattatac atttaatacg cgatagaaaa
1741 caaaatatag cgcgcaaact aggataaatt atcgcgcgcg gtgtcatcta tgttactaga
1801 tcggggtacc gagctcgaat tcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg tgaaattgtt
1861 atccgctcac aattccacac aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa gcctggggtg
1921 cctaatgagt gagctaactc acattaattg cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg
1981 gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga ggcggtttgc
2041 gtattgggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc
2101 ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa tcaggggata
2161 acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg
2221 cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct
2281 caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa
2341 gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc
2401 tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcaaa gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt
2461 aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg
2521 ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta tcgccactgg
2581 cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct acagagttct
2641 tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaagaacagt atttggtatc tgcgctctgc
2701 tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg
2761 ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc
2821 aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt
2881 aagggatttt ggtcatgaga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt ttaaattaaa
2941 aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac agttaccaat
3001 gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga tctgtctatt tcgttcatcc atagttgcct
3061 gactccccgt cgtgtagata actacgatac gggagggctt accatctggc cccagtgctg
3121 caatgatacc gcgagaccca cgctcaccgg ctccagattt atcagcaata aaccagccag
3181 ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc cgcctccatc cagtctatta
3241 attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt cgccagttaa tagtttgcgc aacgttgttg
3301 ccattgctac aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg tatggcttca ttcagctccg
3361 gttcccaacg atcaaggcga gttacatgat cccccatgtt gtgcaaaaaa gcggttagct
3421 ccttcggtcc tccgatcgtt gtcagaagta agttggccgc agtgttatca ctcatggtta
3481 tggcagcact gcataattct cttactgtca tgccatccgt aagatgcttt tctgtgactg
3541 gtgagtactc aaccaagtca ttctgagaat agtgtatgcg gcgaccgagt tgctcttgcc
3601 cggcgtcaat acgggataat accgcgccac atagcagaac tttaaaagtg ctcatcattg
3661 gaaaacgttc ttcggggcga aaactctcaa ggatcttacc gctgttgaga tccagttcga
3721 tgtaacccac tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt tactttcacc agcgtttctg
3781 ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg acacggaaat
3841 gttgaatact catactcttc ctttttcaat attattgaag catttatcag ggttattgtc
3901 tcatgagcgg atacatattt gaatgtattt agaaaaataa acaaataggg gttccgcgca
3961 catttccccg aaaagtgcca cctgacgtct aagaaaccat tattatcatg acattaacct
4021 ataaaaatag gcgtatcacg aggccctttc gtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1320/pRSETB-mKO2大肠荧光质粒 |
| P1321/pRSETB-mCherry大肠荧光质粒 |
| P1582/pNCS-mCyRFP1大肠荧光质粒 |
| P1675/pGEX-TagRFP大肠荧光质粒 |
| P3013/pE2-Crimson大肠荧光质粒 |
| P0027/pET28a-EYFP大肠荧光质粒 |
| P1322/pRSETB-mVenus大肠荧光质粒 |
| P1190/pT7-His-Venus大肠荧光质粒 |
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文献和实验相关实验
引物。引物ZY1-35S和ZY2-EPSPS扩增35S和cp4-EPSPS之间的片段，引物ZY3-NOS和ZY4-NOS扩增NOS终止子序列。内源基因Lectin基因引物按文献设计。上述3对引物的序列信息由上海博亚生物技术有限公司合成。 1．3 实验方法 1．3．1 总DNA提取 参照文献，用CTAB法提取植物总DNA。 1．3．2 PCR体系及反应条件 双重PCR反应体系：1×buffer，2.5mmol/L MgC12，0.25mmol/L dNTP，primers(0.4 μ
5.0软件自行设计了两对引物。引物ZY1-35S和ZY2-EPSPS扩增35S和cp4-EPSPS之间的片段，引物ZY3-NOS和ZY4-NOS扩增NOS终止子序列。内源基因Lectin基因引物按文献设计。上述3对引物的序列信息由上海博亚生物技术有限公司合成。1．3．1 总DNA提取 参照文献，用CTAB法提取植物总DNA。 1．3．2 PCR体系及反应条件 双重PCR反应体系：1×buffer，2.5mmol/L MgCI2，0.25mmol/L dNTP，primers（0.4μmol/L ZY
室完成。 1.2 农杆菌菌株 大肠杆菌DH5α为受体菌，克隆质粒为PUC19，植物表达载体为PROKⅡ，根癌农杆菌菌株LBA4404,由中国科学院北京微生物所提供。具有ACC脱氨酶基因，长度为1kb,位于表达载体pROKⅡ35s上。 1.3 实验方法 1.3.1 哈密瓜无菌苗的获得 分别取皇后、伽师瓜种子去皮,70%的酒精溶液浸泡1min,再用0.1%的升汞溶液消毒6～
pUC35s-mCherry植物荧光质粒
￥100 - 1000
