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3年
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pMRX-IP-GFP-LC3-RFP-LC3ΔG
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100
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上海柯雷生物
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20ul
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文献和实验verarzhch 因实验急用,求一点质粒,检验细胞是否发生自噬。RFP-LC3或myc-LC3。谢谢!本人在上海,可购可换。 bzy0222 我有GFP-LC3。 yzg831 我们实验室也有的 喜龙 bzy0222 wrote: 我有GFP-LC3。 请问您的质粒是购自哪里的,能不能
的高低。荧光蛋白-LC3▬直接观察自噬流的方法GFP-LC3指示技术:无自噬时,GFP-LC3融合蛋白弥散在胞浆中;自噬形成时,GFP-LC3融合蛋白转位至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点,一个斑点相当于一个自噬体,可以通过计数来评价自噬活性的高低。但是绿色斑点增多并不一定代表自噬活性增强,也有可能是自噬溶酶体降解途径受阻。RFP-GFP-LC3 双荧光自噬指示体系:用于标记及追踪LC3以及自噬流的变化。自噬诱导后,融合表达的荧光蛋白-LC3蛋白锚定于自噬体膜上并与自噬体一起与溶酶
溶酶体,即由于GFP荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。 我们在显微镜成像后红绿荧光merge后通过merge后出现的黄色斑点即只是自噬体.红色的斑点指示自噬溶酶体,通过不同颜色斑点的计数可以清晰的看出自噬流的强弱。 如下图:细胞转染mRFP-GFP-LC3病毒后给予氨基酸剥夺处理2小时后出现明显增强的自噬以及自噬流。 红色斑点是自噬溶酶体(mRFP),黄色斑点是自噬体(RFP+GFP). 通过不同颜色斑点的计数可以清晰看出自噬
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