SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)(国产,进口

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名称：SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)(国产,进口)
产地：国产|进口
英文名：SYBR Green II nucleic acid dyes
规格：100μL
SYBR Green II染料是一种高敏感的核酸染色试剂，可以对RNA或者是单链的DNA进行染色。不传统的EB等染料相比，SYBR Green II染料具有灵敏度更高，低毒安全，可用于杂交前RNA质量的检测而不影响的转膜等显著优点。

产品特点：
1. 灵敏度高，信噪比高，样品荧光信号强，背景信号低。可检测出100pg RNA或者单链DNA。不EB相比，SRBR Green II -RNA 复合物所激发的荧光是EB-RNA 复合物激发荧光的7倍。在变性琼脂糖/尿素胶等条件下，SYBR Green II的灵敏度但仍高于EB，使用300nm 透射光显影，非变性凝胶中检测核酸的灵敏度可以达到5×10-7克。
2. 操作简单，无须脱色或冲洗。使用方便，丌影响其它修饰酶作用。完全可以代替银染，同时还兊服了银染实验过程复杂、操作繁琐、费时的缺点。
3. SYBR Green II 丌是特异性的结合RNA或者DNA 单链，其对单链的结合效率是双链的约2倍。不其他大部分核酸染料丌同，SYBR Green II 不RNA 结合的荧光量子产率和荧光范围高于不DNA 结合。
4.荧光范围广，可使用多种成像设备观测。最大激发波长在497nm处，次激发波长在245nm 附近。发射波长在520nm处产生。
5.适用范围广，可适用于多种电泳分析、DGGE和SSCP 及RNA 质量分析实验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
SYBR Green II染料检测核酸时即可用于预染也可电泳后染色。

1.预染实验
 取1μL 贮存液加入1ml TE缓冲液或者灭菌双蒸水中混匀，再加入1ml的6×loading buffer上样缓冲液混匀(此时溶液为1：2000 稀释，即为工作液)电泳时取1-2ul工作液和5ul电泳样品混匀后直接上样。
2.电泳后染色
a.电泳后，在室温、避光的情况之下准备染色液。染色液要在塑料器皿中制备而丌要在玻璃器皿中，因为玻璃表层对该试剂有吸附作用。
b.染料取出后室温放置，恢复室温后简单离心混匀。
c.染色液使用1×TBE缓冲液进行1：10，000 稀释。如果是琼脂糖甲醛变性胶，用1×TBE做1：5000的稀释。由于SYBR Green II RNA染色液灵敏度高，所以要选用新鲜的1×TBE缓冲液进行稀释，以克缓冲液中残存的杂质产生背景，影响实验结果。注意：为提高染色的灵敏度，需要保证缓冲液的PH 值7.5-8 之间。
d. 把胶放在塑料的染色容器中，加入足够染色液使之覆盖整块胶。用铝箔遮盖或者是放在暗处避光。在染色之前没有必要先将胶中的变性剂如尿素和甲醛洗出来，因为本产品复合物发出的荧光在甲醛或者尿素存在时丌会猝灭。
e.在室温下轻轻摇晃凝胶。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶的最佳染色时间是10-40分钟，琼脂糖凝胶的最佳染色时间是20-40分钟。染色时间也可能随着凝胶的厚度和浓度变化。由于其荧光本底很低，凝胶染色后无需脱色。染色工作放在2-8℃ 避光保存，可以重复使用3-4次。
 注意：SYBR Green II RNA染色液丌影响RNA 向膜上的转移和northern中的后续实验。
3.染色胶显色和成像
 本产品所激发的荧光可以使用300nm和254nm光波照射，通过Wratten 15滤光片检测。注意：由于荧光本底较低，所以可以通过适当延长曝光时间的方法检测痕量的核酸。

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·MMLV逆转录酶(无RNase H活性)
编号：BTN131209
英文名称：MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-)
规格：1000U
M-MLV逆转录酶(RNase H缺失)，是RNA依赖的DNA聚合酶，可用于长mRNA(＞5kb)为模板的cDNA合成。它是M-MLV 逆转录酶的一种类型，已经经过基因改造，去除了RNase H的活性。虽然许多研究者已经成功使用M-MLV RT(H+)进行了一些cDNA制备应用及分析，但是缺失了RNase H活性的逆转录酶为长cDNA的制备及包含高比例全长cDNA的文库制备提供了更好的选择。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·RNase抑制剂(人源)(40U/μL)
编号：BTN3290
英文名称：RNase Inhibitor From Human
规格：2500U
本品是从细菌中分离的重组人RNase Inhibitor，其分子量为50 KD，能通过与RNase A 1:1形成非共价的复合体而抑制后者的活性，Ki为3*10-14M，该反应是可逆的，通过尿素及硫基类试剂能够解离复合体，使RNase 复活而抑制剂不可逆失活。本品属蛋白质性质，与其它竞争性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同，可以很容易地通过*酚处理将其从反应体系中除去。

产品特点：
1. 抑制范围广，可以抑制RNase A、RNase B、RNase C等RNase的活性，但不能抑制RNase T1、RNase H、S1 RNase和Aspergillus RNase的活性。
2.与SP6、T3和T7 RNA polymerase、AMV和MMLV 逆转录酶、Taq DNA聚合酶等兼容。
3.在广泛的pH范围(pH5-8)有活性。
4. 应用范围广，可以用于RT-PCR、cDNA 合成、in vitro transcription or translation等需要抑制RNase活性的酶反应中。

储存条件：低温运输，-20℃及保存，有效期一年。

使用方法：一般在有RNA的反应体系中加1-10U即可。

疑难解答：
Q：本产品抑制 RNase的Ki值是多少？
A：本产品是混合物，不能确定其Ki值。
Q：百奥莱博的液相RNase清除剂和RNA保存液都可以保存 RNA，都能灭活/抑制溶液中 2 ng/μL左右的RNase，它们的主要区别何在？
A：一是原理不同。前者通过共价修饰使 RNase 失活(类似于DEPC)；后者通过竞争抑制保护 RNA(类似于RNase Inhibitor)。二是兼容性不同。前者与很多后续反应兼容，故 RNA可以直接使用；后者会抑制很多后续反应，需要去除后在使用 RNA。三是稳定性不同。后者比前者更稳定，更耐热。

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