SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)

特别提示：包括SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)
英文名称：SYBR Green II nucleic acid dyes
产品货号：BTN140234
产品规格：100μL

SYBR Green II染料是一种高敏感的核酸染色试剂，可以对RNA或者是单链的DNA进行染色。不传统的EB等染料相比，SYBR Green II染料具有灵敏度更高，低毒安全，可用于杂交前RNA质量的检测而不影响的转膜等显著优点。

产品特点：
1. 灵敏度高，信噪比高，样品荧光信号强，背景信号低。可检测出100pg RNA或者单链DNA。不EB相比，SRBR Green II -RNA 复合物所激发的荧光是EB-RNA 复合物激发荧光的7倍。在变性琼脂糖/尿素胶等条件下，SYBR Green II的灵敏度但仍高于EB，使用300nm 透射光显影，非变性凝胶中检测核酸的灵敏度可以达到5×10-7克。
2. 操作简单，无须脱色或冲洗。使用方便，丌影响其它修饰酶作用。完全可以代替银染，同时还兊服了银染实验过程复杂、操作繁琐、费时的缺点。
3. SYBR Green II 丌是特异性的结合RNA或者DNA 单链，其对单链的结合效率是双链的约2倍。不其他大部分核酸染料丌同，SYBR Green II 不RNA 结合的荧光量子产率和荧光范围高于不DNA 结合。
4.荧光范围广，可使用多种成像设备观测。zuì大激发波长在497nm处，次激发波长在245nm 附近。发射波长在520nm处产生。
5.适用范围广，可适用于多种电泳分析、DGGE和SSCP 及RNA 质量分析实验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
SYBR Green II染料检测核酸时即可用于预染也可电泳后染色。

1.预染实验
 取1μL 贮存液加入1ml TE缓冲液或者灭菌双蒸水中混匀，再加入1ml的6×loading buffer上样缓冲液混匀(此时溶液为1：2000 稀释，即为工作液)电泳时取1-2ul工作液和5ul电泳样品混匀后直接上样。
2.电泳后染色
a.电泳后，在室温、避光的情况之下准备染色液。染色液要在塑料器皿中制备而丌要在玻璃器皿中，因为玻璃表层对该试剂有吸附作用。
b.染料取出后室温放置，恢复室温后简单离心混匀。
c.染色液使用1×TBE缓冲液进行1：10，000 稀释。如果是琼脂糖甲醛变性胶，用1×TBE做1：5000的稀释。由于SYBR Green II RNA染色液灵敏度高，所以要选用新鲜的1×TBE缓冲液进行稀释，以克缓冲液中残存的杂质产生背景，影响实验结果。注意：为提高染色的灵敏度，需要保证缓冲液的PH 值7.5-8 之间。
d. 把胶放在塑料的染色容器中，加入足够染色液使之覆盖整块胶。用铝箔遮盖或者是放在暗处避光。在染色之前没有必要先将胶中的变性剂如尿素和甲醛洗出来，因为本产品复合物发出的荧光在甲醛或者尿素存在时丌会猝灭。
e.在室温下轻轻摇晃凝胶。聚丙*酰胺凝胶的zuì佳染色时间是10-40分钟，琼脂糖凝胶的zuì佳染色时间是20-40分钟。染色时间也可能随着凝胶的厚度和浓度变化。由于其荧光本底很低，凝胶染色后无需脱色。染色工作放在2-8℃ 避光保存，可以重复使用3-4次。
 注意：SYBR Green II RNA染色液丌影响RNA 向膜上的转移和northern中的后续实验。
3.染色胶显色和成像
 本产品所激发的荧光可以使用300nm和254nm光波照射，通过Wratten 15滤光片检测。注意：由于荧光本底较低，所以可以通过适当延长曝光时间的方法检测痕量的核酸。

除了SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×),，我公司还供应以下相关产品：



名称：RNA电泳液，10×
货号：BTN3150
规格：250mL
本品是预配的10×RNA专用电泳液，专门用于RNA甲醛变性胶电泳分析，产品成分为10×MOPS溶液。其特点是即开即用，用户不需要自己进行RNase灭活、高压灭菌、pH调节等操作。与Northern杂交等后续反应兼容。

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。

名称：电泳级耐热型SYBR染料
货号：BTN61201
规格：50μL
本品是改良型的SYBR Green I，它跟常规的SYBR Green I相比检测灵敏度相当，但具有耐热、耐水解的特点，所以十分稳定，使用更加方便。

产品特点：
1. 稳定，本产品浓缩液可以在常温下存放一年以上，方便运输和保存。本产品的1X工作液在常温下的半衰期为120 多天，比常规的SYBR Green I(5天)长20倍以上。
2. 使用方便多样，既可以在制备凝胶时加入到融化的琼脂糖凝胶中，还可以象常规的SYBR Green I、SYBR Gold、SYBR safe、GelStar一样用于电泳后染色。
3. 灵敏，其检测灵敏度跟SYBR Green I相同，比EB 灵敏200-100倍。
4.低毒、环保、健康。
5.可检测各种核酸分子，包括dsDNA、ssDNA、RNA和Oligo。
6. 兼容性好，不但与常用的TAE、TBE和5分钟超快电泳缓冲液SuperBuffer-2等兼容，还与常用的UV 检测系统和可见光激发检测系统兼容。
7. 对 DNA 泳动速度的影响小于常规的SYBR Green I。
8. 半衰期长，自然损耗低，可多次使用，使其相对使用成本比常规的SYBR Green I和其它非对称花青类染料低。

储存条件：常温运输保存(避光)，保存期为一年。

本产品可以在电泳中染色，优点是用量少，但如果与DNA的比例没达到zuì佳时，带型容易弥散；也可以在电泳后染色，优点是不会对DNA电泳产生干扰，但用量大，还需要额外的染色过程。客户可以根据需要选择使用方法。百奥莱博不建议将本产品用于染色后再上样(即先将其与DNA 混合然后再上样)，也不建议将其用于PAGE(因分子较大,难以进入凝胶)。

使用方法之一：电泳中染色(仅适于琼脂糖凝胶电泳)
1. 按常规方法制备琼脂糖凝胶，胶中不能含任何其他染料。
2. 将按1：10000的比例将SuperSYBR 直接加到熔化的琼脂糖凝胶中并充分摇晃均匀(5μl可以加入到50mL 熔化的琼脂糖凝胶中)，然后倒胶。
3.其余的上样、电泳、UV 观察等步骤按常规操作进行。在254nm 紫外照射透视下，与双链DNA 接合的SuperSYBR 呈现绿色荧光。拍照时zuì好使用绿色滤光片。如果使用300nm 紫外照射透*仪观察也可以，但效果不如254nm。
4. 未用完的胶可以反复融化，如果保存时间在一周以上，zuì好闭光。
 注意：本方法的灵敏度比在熔化的琼脂糖凝胶中加EB染色的方法高，比电泳后染色经济(后者用量大)。SuperSYBR与DNA 结合同SYBR Green I跟DNA的结合一样，有时会影响DNA样品的相对迁移率。如果出现DNA电泳带弥散的现象，说明SuperSYBR和DNA的比例没达到zuì佳，可以适当调节DNA的上样量。

使用方法之二：电泳后染色
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用水将10000×SuperSYBR 原液稀释2500倍成4×工作液(如：将5μl SuperSYBR 原液加到10mL 水和2.5mL 5 M NaCl中，加NaCl的目的是促进SuperSYBR与DNA的结合)。由于SuperSYBR 对玻璃和非聚丙*材料具有一定亲和力，故建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙*类容器。
3. 将电泳后染色工作液倒入合适的聚丙*容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。
4.在 254nm紫外照射透视下，与双链DNA 接合的SuperSYBR 呈现绿色荧光。拍照时zuì好使用绿色滤光片。如果使用300nm 紫外照射透*仪观察也可以，但效果不如254nm。
 注意：电泳后染色工作液可以冷冻避光储存，可以在一个星期内重复使用多次。