phi29 DNA聚合酶优惠

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")phi29 DNA聚合酶优惠，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：phi29 DNA聚合酶优惠
产地：国产|进口
编号：BTN100937
品牌：百奥莱博
规格：250U
英文名：φ29 DNA Polymerase
从Bacillus subtilis 噬菌体phi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶phi29 DNA Polymerase是一种高持续扩增能力的聚合酶(最长达70 kb)，具有很强的链置换和连续合成特性，并具有3´→5´核酸外切酶(校正)活性。本产品的浓度为10U/μL。

产品特点：
1．在所有已知的聚合酶中，具有最高的合成持续性和链置换活性。最长可合成70 kb长度的DNA片段。
2．中温条件下高保真复制。
3．扩增产物可直接用于下游应用，如 PCR、限制酶切、SNP基因分型等。

产品组成：

 

成分	规格
phi29 DNA聚合酶(10U/μL)	25μl
10×phi29 DNA聚合酶 Buffer	250μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

失活条件：65℃下10分钟热失活。

存储条件：100mM KCl，50mM Tris-HCl(pH7.5)，1mM DTT，0.1mM EDTA，0.5% NP40，0.5% Tween 20和50%甘油，贮存于-20℃。

10×phi29 DNA聚合酶Buffer的组成：330mM Tris-acetate(pH7.9 @ 37℃)，100mM Mg-acetate，660mM K-acetate,10mM DTT，1%(v/v)Triton X-100。

活性定义：1U指30℃条件下，10分钟内使0.5pmoL的dCTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

我公司的phi29 DNA聚合酶优惠，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·SuperTOPO-Amp TA克隆试剂盒
编号：BTN160686-25A
英文名称：SuperTOPO TA Cloning Kit
规格：25次
本试剂盒是基于Topoisomerase能够在几秒钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒，它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶，连接效率比野生型更高。

产品特点：
1.高效快速，连接反应几乎在几秒钟内完成，连接率几乎达到100%。
2.适用于具有A 尾巴的DNA片段使用。
3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。
4.转化时只需要37℃,10分钟复苏即可涂盘，免去冰浴、热休克和复苏步骤。
5. 零背景，无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选，故不需要IPTG-X-Gal培养基。
6. 本试剂盒按10μL标准反应体系，有25次和50次两种规格包装供选择。
7. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160686-25A是含Amp抗性TOPO载体，BTN160686-25K是含Kan抗性TOPO载体)。

试剂盒组成：

成分	规格
SuperTOPO-Amp载体	25μl(BTN160686-25A)
SuperTOPO-Kan载体	25μl(BTN160686-25K)
连接缓冲液	25μl
超纯水	1ml
说明书	1份

注意：BTN160686-25A提供SuperTOPO-Amp载体，BTN160686-25K提供SuperTOPO-Kan载体。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. PCR扩增或酶切回收DNA插入片段。如果是PCR制备插入片段，所用引物不能磷酸化，使用Taq系列的DNA聚合酶。
2.电泳检测并相对定量PCR片段或酶切回收片段(跟DNA marker比较)。
 并根据插入片段长度和下表确定每次连接反应需要的最佳用量：

插入片段长度	最佳用量
100-1000bp	20-50ng
1000-2000bp	50-100ng
2000-5000bp	100-200ng

3.在一个干净的塑料离心管中，室温下(不要放在冰上)设置如下连接反应体系：

成分	用量
纯化后的PCR产物	不超过8μl(详见注意事项)
SuperTOPO-Amp载体或 SuperTOPO-Kan载体	1μl
连接缓冲液	1μl
超纯水	补到10μL

 注意：如果使用未经纯化的PCR产物，则需要加入量不能超过1μL，否则PCR 体系会干扰连接体系。
4. 轻柔吹打混匀后，短暂离心，常温(20-30℃)放置0-5分钟。如果在冬天室温低于20℃，建议使用25℃水浴或金属浴。注意：连接时间超过5分钟的话连接效率会降低。
5. 如果当天不转化，可以将离心管放-20℃保存。如果转化，则取5μL连接液加到50-100μL刚刚融化的感受态细胞中，轻柔混匀。注意：本产品要求感受态细胞的转化效率不得低于5﹡10E7cfu/ug。
6. 如果片段长度小于2Kb，则不需要冰浴和热激，直接在离心管中加入500μL不含抗菌素的SOC或LB培养基，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μl左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
7. 如果片段长度长于2Kb，则按常规转化方式，先冰浴2-30分钟，然后42℃热激30秒，冰上防放置2分钟，再在离心管中加入500μL不含抗菌素的SOC或LB培养基，37℃ 250rpm培养60分钟，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μL左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
8. 用菌落PCR、直接测序或其他方法鉴定重组子。


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·先锋霉素溶液
编号：BTN120685
英文名称：Cephalotin Solution
规格：1mL
本产品为浓度100mg/mL的先锋霉素水溶液。参考浓度50mg/mL。先锋霉素(7-(2-Thienylacetamido)cephalosporanic acid sodiu*(代"m") salt；Cephalotin sodiu*(代"m") salt)，分子式：C16H15N2NaO6S2，分子量为：418.42，CAS号：58-71-9，溶于水。头孢菌素类抗生素因有共同的母核——7-*基头孢烷酸而得名，不同种类的头孢菌素所带侧链不同，而侧链是人工接上的，所以头孢菌素是一种半合成抗生素。之所以又叫“先锋”，那是从“头孢”的原文Ceph=.cefo译音而来。

储存条件：常温运输、4℃避光保存、有效期一年。

·糖原干粉(分子生物学级)
编号：BTN131189
英文名称：Glycogen Powder
规格：1g
本产品为分子生物学级糖原干粉。不含DNase，RNase，可以用作沉淀DNA或RNA的辅助沉淀剂。

储存条件：室温运输和保存，有效期一年。

·1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级)
编号：BTN101207
英文名称：Glycogen Powder
规格：250mL
本产品为分子生物学级糖原干粉。不含DNase，RNase，可以用作沉淀DNA或RNA的辅助沉淀剂。

储存条件：室温运输和保存，有效期一年。

·*酚蓝溶液(电泳级)
编号：BTN100882
英文名称：Bromophenol Blue Solution
规格：10mL
*酚蓝分子式为C19H10Br4O5S，分子量为669.97，CAS号为115-39-9。易溶于*氧化*溶液，溶于甲醇、乙醇和*酚，是一种pH指示剂，在pH3.0(黄)~4.6(蓝紫)范围，颜色由黄变蓝。本产是*酚蓝的1%水溶液，用作制备常用做电泳指示染料，其泳动率在0.5-1.4%琼脂糖中，相当于300bp dsDNA，在8% PAGE变性胶中相当于20bp dsDNA。如果含*酚蓝的上样液跟样品混合后变黄，则表示样品中酸性物质没去除干净，必须用1M Tris pH8.8调到*酚蓝呈蓝色，否则蛋白将向相反方向移动。

储存条件：常温运输及避光干燥保存，有效期一年。


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·DNA marker(λDNA/BstE II)
编号：BTN90602E
英文名称：DNA ladder(λDNA/BstE II)
规格：50次
 本系列产品为传统的酶切分子量标准，由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后，加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知，每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。
 每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5uL。

使用效果：


疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。

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