北京即用型高保真PCR试剂盒报价

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北京即用型高保真PCR试剂盒报价的品牌：百奥莱博，是优质的核酸扩增(PCR)产品，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多即用型高保真PCR试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。

名称：即用型高保真PCR试剂盒
英文名：Instant HiFi PCR MasterMix
品牌：百奥莱博
编号：BTN90708
规格：1.5mL
本产品是即用型的2×高保真PCR预配反应液，含有除引物、模板以外的所有PCR试剂，包括Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等，特别适合于高保真PCR反应。

产品特点：
1. Pfu DNA聚合酶是使用最广泛的高保真酶，其保真度为普通Taq酶的10倍。
2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，非常方便，简化了PCR的准备工作。
3. PCR反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配置。由于加样过程少，有利于减少污染，降低实验误差。
4. 本产品A型含电泳染料，PCR反应液可直接上样电泳，进一步简化了操作。
5. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化，反应的灵敏度高，特异性强。
6.适用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验，得到的PCR产物可用于平末端克隆。

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期限为12个月。

使用方法：
将本产品与用户自备的模板，引物混合液按下列推荐使用量(30μL反应体系)加入PCR 管中即可进行PCR，反应结束后直接取5-15μL电泳检查扩增结果。如果反应体系不是30μL，各成分需要按比例增加或减少。

 

试剂		加入量
2×高保真PCR MagicMix		25μL
DNA模板(自备)	哺乳动物基因组DNA	0.5-1μg
	酵母基因组DNA	5-500ng
	细菌基因组DNA	0.5-50ng
	质粒DNA	5-500ng
	PCR回收片段	1-100pg
PCR引物(自备)		10-20pmol each
补水到		30μL

参考扩增条件：

预变性	94℃	4min
PCR(30个循环)	94℃	30s
	50℃	30s
	68℃	0.5kb/min
延伸	68℃	10min

注意事项：
1. 本产品的Pfu DNA聚合酶比Taq DNA聚合酶的延伸反应速率低，因此我们推荐的扩增延伸反应时间为每kb 需2 分种。
2. Pfu酶3´-5´外切酶活性可降解引物，所以强烈建议在冰上配置完成PCR反应液后，立即放入PCR 仪中进行扩增，扩增完毕后立即进行电泳检测。
3. 本产品扩增产物为平末端，不可以直接进行TA 克隆，可以使用ClionB载体(BTN51104)进行克隆。如需要进行TA克隆，建议对PCR产物纯化后，用加A 试剂盒(BTN60105)加A后再进行TA克隆。
4. 由于Pfu 无 5´到 3´外切酶的活性，所以本试剂盒不能用于实时荧光PCR。

疑难解答：
Q：为何Pfu DNA Polymerase扩增效率不如Taq DNA Polymerase？
A：一是由于Pfu DNA Polymerase 具有3´-5´的外切活性，所以在合成过程中，该酶会随时校对新添加的核苷酸是否配对，影响了合成效率；二是它能通过3´-5´的外切活性使引物部分降解，降低引物结合模板的能力，进而影响扩增效率。三是上面提到的尿嘧叮抑制作用。
Q：使用本产品时还有哪些注意事项？
A：1.引物长度和浓度一般应比常规的PCR 长和高(考虑到被Pfu DNA Polymerase的3´-5´的外切活性降解的因素)；
 2.最好在反应前加Pfu DNA Polymerase。
关键词：即用型高保真PCR试剂盒,Instant HiFi PCR MasterMix,BTN90708


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编号	名称
BTN60904	一站式RNA电泳套装
BTN120720	柱式冻存血液DNA提取试剂盒
BTN60603	即用型蓝白T载体A型(T7-SP6，有MCS)
BTN131013	ATP溶液，1mM
BTN80906	一站式miRNA柱式大提试剂盒
BTN130901	酵母生产及产孢培养基
BTN131272	Masson三色染色试剂盒
BTN90603B	随机引物法DNA探针生物素标记试剂盒
BTN131105B	酪蛋白溶液(PBS)
BTN131036	5´末端同位素标记试剂盒
BTN90602J	DNA marker(λ-EcoT14 I)
BTN70906	NTP溶液(10mM)
BTN120653B	填入法DNA末端标记试剂盒(生物素标记dUTP)
BTN100879	过硫*(代"酸")铵(电泳级)
BTN60206	*苄青霉素溶液
BTN131291	Methacarn固定液
BTN51101	常态细胞转化液(免感受态细胞制备)
BTN130898	MAL指示剂培养基
BTN80804	柱式真菌RNA提取试剂盒
BTN101106	沉淀型TMB显色试剂盒
BTN131116	pNPP干粉
BTN130532	EGTA溶液(0.5mg/mL，蛋白级)
BTN80206	两管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)
BTN90604C	PCR法DNA探针地高*(代"辛")标记试剂盒
BTN80808	蛋白酶抑制剂混合液
BTN90318	柱式DNA清除剂
BTN70804	一步法单菌落质粒DNA提取试剂盒
BTN60803	可保种型蓝白T载体
BTN100103A	裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒
BTN130699	RNase抑制剂(小鼠源)(40U/μL)
BTN120309	T3 RNA聚合酶
BTN131123	考马斯亮蓝G-250
BTN80901	柱式动物RNA大量提取试剂盒
BTN160685-25K	SuperTOPO-Kan通用克隆试剂盒
BTN111205	DNA洗脱液2.0