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即用型易错PCR试剂盒

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  • YLKBIO
  • YLK-T0060
  • 国产
  • 2025年12月18日
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      100

    • 英文名

      Instant Error-prone PCR Kit

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      优利科(上海)生命科学有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      100次

    产品简介:

    中文名称:即用型易错PCR试剂盒
    英文名称:Instant Error-prone PCR Kit
    产品规格:100次
    产品货期:
    1-2天
    产品运输:低温运输
    产品介绍:
    制突变PCR


    产品细节图片1

    产品及特点:

    易错 PCR 是在采用 DNA 聚合酶进行目的基因扩增时,通过调整反应条 件来改变扩增 过程中的突变频率, 从而以一定的频率向目的基因中随机引入 突变,获得蛋白质分子的随 机突变体。其关键在于对合适突变频率的选择,突 变频率太高会导致绝大多数突变为有害 突变, 无法筛选到有益突变; 突变频 率太低则会导致文库中全是野生型群体。本产品基于 以上原理研制。它具有下 列特点:
    1. 操作简便;
    2. 突变没有趋向性, 突变率稳定, 突变率为 0.66%;
    3. 本产品只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段 扩增。
    4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR)。



    产品细节图片2

    规格及成分:

     
    成 份 十孔盒包装
    易错 PCR Mix,2× 1.5 mL
    易错 PCR 专用 MnCl2,10× 300 uL
    使用手册 1 份

    运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为 12 个月。

    本产品仅供科研

    产品细节图片3

    使用方法:


    1. 易错 PCR 体系 推荐反应体系(30 μl)
    试剂 用量
    模板 DNA 10- 100 ng
    Primer F (10 μM) 1 μl
    Primer R (10 μM) 1 μl
    2× Error Prone PCR Mix 15 μl
    10× MnCl2 3 μ
    ddH2O Up to 30 μl

    2. 易错 PCR 程序 按用户已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR ,如果没有优化的 PCR 条件,可先尝试下面的 PCR 程序。
    过程 温度 时间
    预变性 95℃ 3 min
    30-60 cycles 变性 95℃ 30 sec
    退火 45℃ 30 sec
    延伸 72℃ 1 min/kb

    3. 结果检测:反应结束后取 5 μl 反应产物,加入适量上样缓冲液,然后进行琼 脂糖凝 胶电泳,检测是否得到预期片段大小的 PCR 产物。
    4. 胶回收易错 PCR 扩增产物、克隆并对单菌落进行功能筛选或测序分析、如 果需要增 加突变率,可以突变后的 DNA 为模板,进行连续易错 PCR。


    产品细节图片4

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