N端His标签融合蛋白质粒品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

N端His标签融合蛋白质粒品牌是高品质的克隆与表达产品，由北京百奥莱博供应，用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多N端His标签融合蛋白质粒等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。

名称：N端His标签融合蛋白质粒品牌
规格：1μg
编号：YT481
品牌：百奥莱博
英文名：N-His plasmid（with CMV promoter）
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达N端和His tag(His标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5"端含有一个可以编码His标签的序列，因此可以表达出含有His标签的融合蛋白，可以方便地使用抗His的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

本质粒质粒的主要信息如下：

 

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
His tag	679-696
multiple cloning site	699-772
T7 promoter and T7 primer binding site	815-836
SV40 polyA signal	847-1230
f1 origin of ss-DNA replication	1368-1674
bla promoter	1699-1823
SV40 promoter	1843-2181
neomycin/kanamycin resistance ORF	2216-3007
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3008-3466
pUC origin	3595-4262

本质粒的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

储存条件：-20℃。

我公司的N端His标签融合蛋白质粒品牌，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·Ad-mCherry-GFP-LC3B
编号：YT160
英文名称：adenovirus expressing mCherry-GFP-LC3B fusion protein
规格：1ml|10×1ml
本品是一种可以表达mCherry-GFP-LC3B融合蛋白的腺病毒，可以用于感染细胞或组织后进行细胞自噬的检测。

LC3是酵母自噬关键蛋白ATG8在哺乳动物中的同源蛋白。LC3最初被分析鉴定为microtubule-associated protein 1 light chain 3。LC3蛋白家族包括LC3A、B、C和GABARAP等亚家族，其中对于LC3B的研究最为广泛。到目前为止，LC3B被认为是细胞自噬信号通路最为关键的标志性蛋白。LC3B是一个具有125个*基酸残基的蛋白，在蛋白合成后，被Atg4所酶切而失去了C端的22个*基酸蛋白，从而暴露出C端的甘*酸，人们把它命名为胞质形式的LC3B I。在细胞自噬的过程中，其C端暴露的甘*酸经过一个类似泛素化的过程，以ATG7为E1样激活酶， 以ATG3为E2样连接酶，以Atg12-Atg5-Atg16复合物为E3样连接酶，在C端甘*酸上共价连接上磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)而成为LC3B-PE即LC3B II。与胞质定位的LC3B I不同，LC3B II定位于自噬体的内膜和外膜上。在自噬体与溶酶体融合后，自噬体外膜上的LC3B II被Atg4所酶切，而自噬体内膜上的LC3B II则被溶酶体内的蛋白酶所降解。尽管LC3B II比LC3B I的分子量要大，但由于其极强的疏水性，在SDS-PAGE电泳时，LC3B II比LC3B I迁移得更快，其表观分子量分别为14kD和16kD。在用GFP-LC3B腺病毒感染细胞后，在非自噬的情况下，荧光显微镜下GFP-LC3B以弥散的形式存在于细胞质中；而在自噬的情况下，荧光显微镜下GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上，以斑点的形式表现出来。

自噬是一种在进化上高度保守的通过溶酶体吞噬并降解部分自身组分的细胞内分解代谢途径。自噬与多种生理功能有关，在饥饿等不利的环境条件下， 细胞通过自噬降解多余或异常的细胞内组分，为细胞的生存提供能量及原材料，促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性疾病、代谢疾病、病原体感染等都有密切关系。由于细胞自噬在生理和病理过程中都有重要作用，自噬已经成为细胞生物学领域的一个新的研究热点。

Ad-mCherry-GFP-LC3B是百奥莱博的重组腺病毒，感染后能够在靶细胞中有效表达红色荧光蛋白mCherry、绿色荧光蛋白(GFP)和LC3B的融合蛋白，呈现明亮的红色和绿色荧光，可以用于细胞自噬的检测。

自噬小体在与溶酶体融合过程中，溶酶体内的酸性环境会导致GFP荧光淬灭，这为追踪GFP-LC3B的细胞定位增加了难度。mCherry是一种来自于蘑菇珊瑚(mushroom coral)的单体红色荧光蛋白，当其与GFP进行LC3B的共同标记时，在GFP被溶酶体酸性环境所淬灭的情况下，可以发出红色荧光的mCherry因为其卓越的稳定性而被保留。因此，通过融合表达mCherry-GFP-LC3B蛋白，可以非常有效地追踪自噬过程。在用Ad-mCherry-GFP-LC3B腺病毒感染细胞后，在非自噬的情况下，荧光显微镜下mCherry-GFP-LC3B以弥散的黄色荧光(mCherry和GFP的综合效果)形式存在于细胞质中；而在自噬的情况下，荧光显微镜下mCherry-GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上，以黄色斑点的形式表现出来(LC3B dot or punctae)；当自噬体与溶酶体融合后，因GFP荧光的部分淬灭而以红色斑点的形式表现出来。

腺病毒感染细胞后为瞬时表达，通常不会与基因组DNA重组，不能用于筛选稳定细胞株。本产品感染体内外细胞后，有效表达时间通常不少于7天，不同细胞和组织的有效表达时间有所不同。感染10-14天后融合蛋白的表达很可能会大大减弱。

百奥莱博的Ad-mCherry-GFP-LC3B采用了成熟的E1缺陷型重组腺病毒载体系统，感染普通的细胞后不能进行扩增和重组，从而可以有效降低本产品在活体生物中的风险。

本产品可以在表达E1的HEK293A、HEK293等适当细胞中扩增。

本产品的滴度≥1×108 pfu/ml，使用时可以按照108pfu/ml进行计算。如果按照20 MOI感染6孔板的细胞，每孔50万细胞计算，共可以感染10个孔；如果按照20 MOI感染24孔板的细胞，每孔10万细胞计算，共可以感染50个孔。如果MOI值提高，则相应可以感染的孔数会减少；如果MOI值降低，则相应可以感染的孔数会增加。

注意事项：
1. 反复冻融会降低病毒滴度，如有必要请在收到本产品后分装保存。病毒融解后，如果在一周内使用，可以放置于4℃。如果-80℃保存时间超过一年，可能会导致滴度下降，此时建议重新测定病毒滴度。
2. 腺病毒感染需要细胞表面的CAR受体，请确认拟使用的细胞或组织可以被腺病毒感染。
3. 本产品使用前请仔细阅读附录1《腺病毒使用安全规范》。本产品生物安全等级为Biosafety Level 1 (BSL-1)，没有确凿证据显示会导致健康成人产生疾病，可以按照常规的微生物实验操作要求进行操作。

储存条件：-20℃，有效期1～2个月。


N端His标签融合蛋白质粒品牌关键词：N-His plasmid（with CMV promoter）,YT481,N端His标签融合蛋白质粒


·AP2凝胶迁移探针(10μM)
编号：YT199
英文名称：AP2 Probe For EMSA(10μM)
规格：30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP2 consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的AP2结合位点，可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的探针可以进行约90个同位素标记探针的反应，每次标记的探针可以测定约100个样品；或约可以进行60个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争(cold competition)，可以进行90-180个冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。

AP2 consensus oligo的序列如下：
5"-GAT CGA ACT GAC CGC CCG CGG CCC GT-3"
3"-CTA GCT TGA CTG GCG GGC GCC GGG CA-5"

本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记，也可以用于生物素标记。

注意事项：避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。

储存条件：-20℃，有效期一年。


N端His标签融合蛋白质粒品牌关键词：N-His plasmid（with CMV promoter）,YT481,N端His标签融合蛋白质粒

ARB11411 人绒毛膜促性腺激素(HCG)酶标法分析 Human chorionic gonadotrophin,hcg ELISA KIT
ARB12996 小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)Elisa方法检测 Mouse anti-smooth muscle antibody,asma ELISA KIT
十九酸甲酯 Calmagite 1731-94-8
ARB12081 大鼠内脂素/内脏脂肪素(visfAtin)ELISA代测服务 Rat visfatin ELISA KIT
*基甲基树脂 α-L-Fucosidase
73-40-5 Guanie 鸟嘌呤
ARB13254 小鼠游离脂肪酸(FFA)含量分析 Mouse free fatty acids,ffa ELISA KIT
ARB13594 兔子肝细胞生长因子(HGF)含量检测 Rabbit hepatocyte growth factor,hgf ELISA KIT
FMOC-D-丙*酸 Polymyxin B sulfate 79990-15-1
F050322 绵羊IgG抗体 Sheep IgG
DP314 N96血液基因组提取试剂盒
ARB11107 人乳头状瘤病毒抗体IgM(HPV-IgM)酶联免疫定量检测 Human papillomavirus igm,hpv-igM ELISA KIT
ARB14193 山羊蛋白聚糖(PG)ELISA代测服务 
ARB10023 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)检测服务 Human 5-lipoxygenase,5-lo/lox ELISA KIT
ARB12385 大鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)代做ELISA实验 Rat tumor necrosis factor β,tnf-β ELISA KIT
ARB10884 人抗流行性出血热(EHF-Ab)血清中含量检测 Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus antibody,ehfab ELISA KIT
E0609 抗凝裂解大牛血(无菌)
BTN130425 *基介质 Pheny Medium

我公司强烈推荐克隆与表达系列产品，热情期待您的咨询选购N端His标签融合蛋白质粒品牌。