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- 百奥莱博
- 北京
- YT512-NJF
- 2025年07月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
- 库存：
513
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)说明书在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)说明书，产品信息：
类别：工具酶
英文名：Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶) | YT512 | 500U |
英文名：Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
产地：国产|进口
规格：500U
本酶是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA的3"羟基端加上dNTP。可以催化的寡核苷酸的最短长度为3个核苷酸。
用途：寡核苷酸或DNA 3"羟基末端标记；DNA末端加尾(DNA tailing)；5"-RACE；合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链等。
来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为小牛胸腺。
活性定义：37℃60分钟内，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3"羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件：200mM potassiu*(代"m") cacodylate(pH7.2),1mM CoCl2,0.1mM DTT,0.01%(v/v)Triton X-100,10μM oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[3H]-dTTP。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNase。
酶储存溶液：100mM KAc(pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01%(v/v)Triton X-100 and 50%(v/v)glycerol 。
Reaction Buffer(5X)：0.125M Tris(pH7.2 at 25℃),1M potassiu*(代"m") cacodylate,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM CoCl2。
失活或抑制：70℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金属离子螯合剂，较高浓度的铵根离子、*离子、碘离子和磷酸根均对Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。
储存条件：-20℃。
使用说明：
1. DNA 3’末端标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
待标记DNA————————————————————10 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X) ——————————————10µl
[α-32P]-ddATP, ~10TBq/mmol (3000Ci/mmol)————1.85 MBq (50µCi)
TdT (20U/µl) ——————————————————2µl
补充无核酸酶的去离子水 —————————————至50µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
说明：标记的效率和3’羟基末端的类型有关，3’突出末端的标记效率要显著高于3’缩进末端或平末端的标记效率。
2. DNA末端加尾(DNA Tailing)：
a. 参考下表格设置反应体系：
DNA片段 ————————————————————1 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X)——————————————4µl
dATP or dTTP——————————————————130pmol
或 dGTP or dCTP (四种中通常只需加入一种)————60pmol
TdT (20U/µl)——————————————————1.5µl
补充无核酸酶的去离子水—————————————至20µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
说明：在上述反应条件下，每个3’羟基末端可以加上100-130个dA或dT，或20-30个dC或dG。
3. 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。
末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)说明书专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司
关键词：YT512,末端脱氧核糖核酸转移酶,TdT酶,Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)
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关于末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)说明书的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
| 编号 | 类别 | 名称 |
| YT321 | 抑制剂激活剂 | HDAC抑制剂(组蛋白去乙酰化酶抑制剂)(丁酸*)(Sodium Butyrate) |
| YT559 | 酶和辅酶 | N-乙酰*基葡萄糖转移酶 |
| YT163 | 其他培养基 | 多聚L-赖*酸溶液 |
| YT224 | 凝胶迁移EMSA | HIF-1α凝胶迁移探针(10μM) |
| YT341 | 抑制剂激活剂 | MDM2拮抗剂(Nutlin-3) |
| YT347 | 抑制剂激活剂 | FRAP/mTOR抑制剂(Rapamycin) |
| YT428 | 其他培养基 | *苄青霉素*(细菌培养用) |
| YT192 | 凝胶迁移EMSA | 洗涤液(5X，YT190专用) |
| YT817 | 一抗 | LKB1抗体 |
| YT842 | 一抗 | 磷酸化Rb(Ser807/811)抗体 |
| YT481 | 克隆与表达 | N端His标签融合蛋白质粒 |
| YT149 | 细胞凋亡与增殖 | 罗丹明123 |
| YT356 | 抑制剂激活剂 | PI3K抑制剂(Wortmannin) |
| YT704 | 一抗 | 兔抗cMet抗体 |
| YT571 | 酶和辅酶 | 胆碱激酶 |
| YT213 | 凝胶迁移EMSA | β-Catenin/TCF凝胶迁移探针(1.75μM) |
| YT547 | 酶和辅酶 | 丙*酸脱*酶 |
| YT622 | 蛋白质研究 | 彩色预染蛋白分子量标准(15-120kD) |
| YT099 | 免疫检测 | Cy3抗大鼠免疫荧光染色试剂盒 |
| YT603 | 酶和辅酶 | 果糖异构酶 |
| YT102 | 免疫检测 | Alexa Fluor 350抗兔免疫荧光染色试剂盒 |
| YT199 | 凝胶迁移EMSA | AP2凝胶迁移探针(10μM) |
| YT436 | 其他培养基 | 胰蛋白胨 |
| YT330 | 抑制剂激活剂 | 出核转运抑制剂(Leptomycin B) |
| YT917 | 抑制剂激活剂 | TLR4激活剂(超纯LPS) |
| YT304 | 抑制剂激活剂 | 抗氧化剂Lipoic acid(硫辛酸) |
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文献和实验罗氏公司TUNEL细胞凋亡检测程序 （In situ cell death detection kit-POD法） 一、 原理： TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素（fluorescein）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT
200bp核小体DNA多聚体. DNA双链断裂或只要一条链上出现缺口而产生的一系列DNA的3’-OH末端可在脱氧核糖核苷酸 末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸化酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3’-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法一般称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL). 由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3’-OH形成,很少能够被染色.低分子量的DNA分离后,也可使
细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程，染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca2+和Mg2+依赖的核酸内切酶作用下，在核小体单位之间被随机切断，形成180～200bp核小体DNA多聚体。 DNA双链断裂或只要一条链上出现缺口而产生的一系列DNA的3'-OH末端可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸化酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端
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