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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输、-20℃保存、有效期一年。
- 保质期:
长期
- 英文名:
ET SSB
- 库存:
729
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
极高热稳定单链结合蛋白品牌由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多极高热稳定单链结合蛋白等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:极高热稳定单链结合蛋白品牌
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:ET SSB
规格:50μg
极高热稳定性单链结合蛋白(ET SSB)是从极度耐热的微生物中分离得到的单链DNA结合蛋白质,在95℃温育60分钟后,依然具有全部活性。因为具有极高的热稳定性,ET SSB可用于需要高温反应条件的实验中,如核酸扩增反应和测序反应。
产品特点:
1.提高DNA聚合酶的延伸能力;
2.稳定和标记ssDNA结构;
3.增加PCR反应的产量和特异性;
4.增加RT-PCR中,反转录的产量和延伸能力;
5.改善强二级结构区域的DNA测序;
6.通过ssDNA结合和链置换,增强RecA蛋白的活性。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
关于极高热稳定单链结合蛋白品牌的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·Tris饱和酚
编号:BTN3191
英文名称:Tris-Saturated Phenol
规格:100mL
本产品是将重蒸酚用Tris-HCl(pH8.0)缓冲液充分饱和而得,pH在8左右,不会再吸收样品中的水分。它可用于DNA提取时去除蛋白质。
储存条件:常温运输和保存、避光。有效期一年。
疑难解答:
Q:提取DNA时一定要用Tris饱和酚吗?
A:不一定,最重要的是pH,Tris(其实是Tris-HCl)只是pH缓冲液,用其饱和酚的目的是提高酚的pH。如果用其他缓冲液使酚的pH升高到7以上,也可以用于DNA纯化。如果低于此pH,DNA可能会进入酚相而丢失。
·10nt随机引物(0.5μg/uL)
编号:BTN131227
英文名称:Octomer
规格:250
本产品为长度为10nt的随机引物,序列为5´-(NNNNNNNNNN)-3´,主要用于cDNA的合成和DNA探针标计。
储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。
疑难解答:
Q: 随机引物的长度对cDNA合成有何影响?
A: 文献报道,长度为10个nt的随机引物合成cDNA的效果好于6nt长的随机引物。
·柱式土壤DNA提取试剂盒
编号:BTN71205
英文名称:Soil DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒专门用于从各种土壤样品和河海沉积物中提取高质量的DNA的试剂。
试剂盒特点:
1. 去污染效果更好,得到的DNA可以直接作为PCR模板或酶切,不需要再进行去腐殖酸处理。
2. 操作过程更加简单快速,整个操作只需要10多分钟,扩容性好。
3.产量高,每克土壤一般可以提取到5-50μg DNA,片段长度在20-50 Kb,OD260/280一般都在1.8以上。
4.适合于各种土壤(包括河海沉积物)。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 25ml |
| 溶液B | 25ml |
| 溶液C | 40ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,保存期为一年。
使用方法:
1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后充分混匀,取0.5mL加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取0.1-0.3 g的土壤,加入到含预热溶液A的离心管中,震荡器上剧烈震荡5-10分钟。如果是扩量操作,可以使用更多土壤和较大离心管。也可以将同一种土壤在较大离心管中震荡处理,然后再分到1.5mL离心管中。注意:不论使用大的还是小的离心管,一定要让管底的土壤震荡起来。
3. 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
4. 12000~15000g室温离心3分钟,将上清转移到一新离心管中(上清液一般呈淡黄色或深棕色,实际颜色取决于腐殖酸的含量,上清液的体积一般为300-400μl)。
5.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀,溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6. 将离心管冰浴至少5分钟。
7. 12000~15000g室温离心3分钟,转移上清到新的1.5mL离心管中,上清液颜色将比第4步得到的上清的颜色稍淡,体积在0.7mL左右。
注意:下面第8-第9步的*仿抽提操作可以省略,直接进入第10步,但DNA的产量会低50%左右,OD260/280在1.7-1.8。如果直接进入第10步,则转移的溶液体积不要超过0.6mL,否则没有空间加溶液C。
8. 加入0.2mL的*仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
9. 12000~15000g室温离心3分钟,小心转移上清到新离心管中。说明:离心后两相交界面将有白色膜状物,其中有机相部分颜色较深,一般呈淡棕色。上清的颜色取决于土壤中腐殖酸的含量。将上清转移到新的1.5mL离心管时,不要超过0.6mL,否则没有空间加溶液C。如果有多余的可以弃之不用。
10. 加入1.5倍体积的溶液C,上下颠倒30秒混匀。
11. 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液)。
12. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
13. 如果有必要,可以再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。增加一步洗涤能使最后得到的DNA的纯度稍有提高,但产量稍微有所降低。
14. 12000~15000g室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
15. 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中,加入50-100μL DNA洗脱液2.0。
16.室温放置离心吸附柱1-2分钟。
17. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为DNA样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
疑难解答:
Q: 如何判断提取的DNA没有腐植酸污染?
A:方法一是目测法,即看得到的溶液是否无色。如果呈淡棕黑色或淡黄色,说明可能是少量残留的未除尽的腐植酸。方法二是检测最大光吸收。注意:有腐植酸污Q: 如何判断提取的DNA没有腐植酸污染?
A:方法一是目测法,即看得到的溶液是否无色。如果呈淡棕黑色或淡黄色,说明可能是少量残留的未除尽的腐植酸。方法二是检测最大光吸收。注意:有腐植酸污染并不表示 DNA 不能使用,有的腐殖酸并不抑制 PCR扩增。
Q: 腐殖酸的最大吸收波长是多少?
A:腐植酸(humic acid)是一大类呈棕黑色或黑色的物质,其结构千差万别,土壤中腐殖酸的组成和特点随土壤不同而不同,所以其最大吸收波长也各不相同,有的土壤的腐殖酸在 260nm 有最大吸收(见 Appl.Environ. Microbiol.,63:4993,1997),有的则在 340nm。所以用特定的波长测定 OD 值时波长的选定要根据土壤而决定。Sigma,Fluke等公司出售的腐植酸产品成分一般比较简单,其最大吸收波长不能推广到成分更为复杂的土壤腐殖酸样品。
Q:是否腐植酸都会抑制后续的DNA反应?
A:否,因为腐植酸是一大类物质的统称,他们的结构和特性各不相同,所以是否对后续反应有影响最好通过实验来验证。如果用提取的DNA溶液原液进行反应而反应没发生,而对照样品(已知的不含污染的DNA)能够发生,说明可能抑制作用。
Q:如果得到的DNA样品还是含有抑制后续反应的腐植酸,如何去除?
A:如果提取的DNA原液不能扩增,可以将样品稀释10倍和100倍再进行 PCR,抑制作用一般可以解除。如果仍然抑制,可以使用我公司的PCR Inhibitor Scavenger(BTN60804)。如果仍然不能解除,则可以通过柱式腐殖酸清除剂(BTN60801)或先电泳,再用超大片段胶回收试剂 Magic Gel DNArc(BTN60706)纯化土壤 DNA,去除残留抑制剂。其中后两方法最有效,得到的原液一般可以直接扩增。
Q:在用土壤 DNA进行细菌专一性 PCR时,为何没加 DNA 模版的阴性对照有扩增产物出现?
A:这是由于使用的Taq DNA聚合酶一般从E.coli表达菌株中提取,提取过程中污染了E.coli的基因组 DNA,而使用的广谱细菌专一性引物可以识别所有细菌DNA基因组DNA模版,所以会产生扩增。建议使用高质量的Taq DNA聚合酶。
极高热稳定单链结合蛋白品牌关键词:ET SSB,极高热稳定单链结合蛋白,BTN130664
·一管式拭子DNA提取试剂盒
编号:BTN60501
英文名称:One-tube swab DNA extraction kit
规格:100次
本试剂盒专门用于从口腔拭子中快速提取能够用于PCR的基因组DNA。也可以用于提取微量血液,精液,血斑/精斑等法医物证的DNA。
产品特点:
1.快速,整个操作过程只需要十分钟,在一个离心管中完成。
2. DNA样品可直接用于PCR反应。
3.样品可以在4℃长期保存。
4. 不需要使用任何有毒的试剂。
5. 性价比高。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 无菌拭子 | 100只 |
| 1.5mL离心管 | 100只 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存。有效期一年。
使用方法:
1. 将医用棉球拭子涂抹面颊的口腔内表面约十次,放入加有0.5mL溶液A的1.5mL塑料离心管中。
2. 剪去口腔拭子柄部,留药棉头于离心管中,盖上离心盖后振荡一分钟。
3. 95℃保温5分钟,用镊子取出离心管中药棉头,并在离心管壁尽量挤出其中的液体。
4. 加入50μl的溶液B,振荡半分钟。
5.室温12000 g离心2分钟。
6. 直接取上清作为模板加入到PCR反应体系中进行扩增,所加量以PCR的总体积的1/5为宜(即50μl的PCR 体系加10μl处理液)。
7. 剩余样品放4℃保存。
使用效果:
图注:用本产品提取涂抹面颊后的拭子的口腔上皮细胞DNA,最后分别取5μl(5号样)和10μl(10 号样)作为模板进行PCR,反应完后取10μl上样电泳。扩增片段为人-actin基因,长度为610bp,M表示100bp DNA Ladder,最大片段为600bp。电泳在SuperBuffer-2中进行,300 V,5分钟。
疑难解答:
Q:能否浓缩第六步上清中的DNA?
A:可以用盐/乙醇法浓缩DNA,用浓缩后的DNA做模板扩增效果更好。
极高热稳定单链结合蛋白品牌关键词:ET SSB,极高热稳定单链结合蛋白,BTN130664
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