北京碱性磷酸酶(偶联级)说明书

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北京碱性磷酸酶(偶联级)说明书是高品质的工具酶产品，由北京百奥莱博供应，用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多碱性磷酸酶(偶联级)等工具酶产品请联系我司咨询订购。

名称：北京碱性磷酸酶(偶联级)说明书
英文名：Alkaline Phosphatase,Conjugation Grade
编号：BTN130552
规格：500U
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
碱性磷酸酶(ALP或AKP)广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织，经肝脏向胆外排出。这种酶能催化核酸分子脱掉5´磷酸基团，从而使DNA或RNA片段的5´-P末端转换成5´-OH末端。它由一组同功酶构成，目前已发现有AKP1、AKP2、AKP3、AKP4、AKP5与AKP6等。碱性磷酸酶是免疫诊断产品最常用的标记酶之一。与辣根过氧化物酶(HRP)相比，ALP用作标记酶的优点是，稳定性高、灵敏度高。本产品为重组酶，是用分子生物学手段通过大肠杆菌体内重组、表达、分泌，然后通过亲和纯化得到的高纯度、高活性的酶。

产品特点：
1．外观为无色澄清透明液体。
2．来源为大肠杆菌，分子量94KD，纯度≥95%(SDS-PAGE)，活性≥2000DEA Units/mg(2DEA Units/uL)，在pH7.5-9.5之间，活性稳定。
3．广泛应用于免疫学研究，如酶联免疫反应(ELISA)、Western Bolt、免疫荧光反应、化学发光等定性或定量分析，即用ALP与显色剂或去磷酸化后能发光的底物相互作用来揭示靶与检测酶复合物的存在。

储存条件：常温运输，4℃保存，保存期一年。

活性定义：37℃、pH9.8的缓冲条件下，以对硝基*(代"*")磷酸二*(pNPP)为底物，每分钟催化产生1μmol的对硝基*(代"*")酚所需要的酶量为一个酶活性单位。

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·末端脱氧核苷转移酶(TdT酶)
编号：BTN120312
英文名称：Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
规格：500U
末端脱氧核苷转移酶 TdT是一种模板非依赖型DNA聚合酶，催化在寡核苷酸、单链和双链DNA的3´-OH重复添加脱氧核糖核苷酸。TdT反应需要含有至少3个碱基的短序列作为引物。以RNA为模板时，TdT性能严格依赖于受体RNA 3´-末端的三级结构和核苷酸的种类。总的来说，TdT对RNA模板的作用效率比DNA模板低。

产品特点：
1．通过Okayama-Berg法给载体或cDNA加上互补同聚尾。
2．线性双链DNA的各类3´-OH末端同聚物加尾。
3．本寡聚脱氧核苷酸和DNA标记。
4．5´-RACE(快速扩增cDNA末端)。
5．凋亡反应的原位定位。

产品组成：

 

成份	规格
末端脱氧核苷转移酶	25μL(20U/μL)
5×反应 Buffer	0.4mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量。

使用方法：
1．建议按照下表添加如下反应成分
DNA 3´端加尾反应(20μL体系)：

5×反应Buffer	4μL
DNA片段	1pmol of 3´-ends
dATP or dTTP或dGTP or dCTP	130pmol或60pmol
末端脱氧核苷转移酶	1.5μl(30U)
补超纯水到	20μL

DNA 3´端加尾标记反应(50μL体系)：

5×反应Buffer	10μL
线性DNA	10pmol
标记的核苷酸(约10TBq/mmol)	1.85MBq
末端脱氧核苷转移酶	2μl(40U)
补超纯水到	50μL

2．37℃反应15 min。
3．70℃加热10分钟或添加2μL的0.5M EDTA溶液灭活酶，终止反应。


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·DNA marker(100-2000bp)
编号：BTN70503R
英文名称：DNA ladder(100-2000bp)
规格：50次
 本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5μL。

使用效果：

注：750bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL

疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀，亮度相当，但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色，加大EB浓度等方法解决。


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