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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit
- 库存:
478
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)厂家直销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)厂家直销
产地:国产|进口
编号:BTN81109B
英文名:Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit
本酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,高效快速制备酿酒酵母化学感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品。
产品特点:
1.一次制备,-80℃保存,多次使用,免去每次转化都要制备酿酒酵母感受态细胞。
2. 操作简单,单溶液制备,除酵母培养的时间外,整个操作只需要30分钟
3. 主要用于酿酒酵母S. cerevisiae,也适用于其他多种实验用酵母菌株,包括S. pombe、C. albicans、Pichia pastoris等。
4. 受体酵母可以不含质粒,也可用于携带有选择性质粒的酵母。
5. 对酿酒酵母,最高转化效率可达到0.2-1×105个转化子/μg质粒DNA。对其他酵母,效率稍低,范围在100-2000个转化子/μg质粒DNA。
6. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化,例如YIp,YRp,YCp,YEp和YAC等。
7.可以用于酵母双杂交、定点突变(Site-Directed Mutagenesis)、基因破坏(Gene Disruption)、等位突变基因修复(Mutant Allele Recovery)等实验。
8. 本产品可以制备20 只酵母感受态细胞(需要200mL 酵母培养液),其中A型只用于制备感受态细胞,B型还带高效转化液。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
产品组成:
| 成分 | 20T(A) | 20T(B) |
| 制备液A | 120ml | 120ml |
| 制备液B | 6ml | 6ml |
| 制备液C | 10ml | 10ml |
| 转化液A | 无 | 30ml |
| 转化液B | 无 | 30ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
自备试剂:YPD培养基
使用方法:
一:酵母化学感受态细胞的制备
说明:按本方法制备1 管酵母化学感受态细胞就需要OD600达到0.6-1.0的新鲜酵母培养液10mL,用户需根据所需酵母感受态细胞的数量决定培养细胞的体积。如果超过10mL,则制备液的使用量需要按比例增加。
1. 挑取酵母受体菌的新鲜的单菌落(4℃放置不超过3周的也可以),接种到装在50mL离心管中的10mL的自备的YPD培养基中。
2. 30℃摇晃培养,摇床速度250rpm/分钟,直到OD600达到0.6-1.0(相当于0.6-1×107细胞/mL)。
3.室温3000rpm离心5 min,弃上清得酵母细胞沉淀。
4. 新鲜制备适量的酵母感受态制备工作液。对10mL 酵母需要5.25mL的工作液,其配制方法是:将4.75mL 制备液A、0.25mL 制备液B和0.25mL 制备液C 加入到一个无菌的离心管中后充分震荡混匀即可。酵母感受态制备工作液可放室温待用。
5. 用0.5倍体积的新鲜配制的酵母感受态制备工作液洗涤酵母细胞沉淀一次(对10mL 酵母则需要5mL 酵母感受态制备工作液)。即混合后振荡1分钟,室温3000rpm离心3分钟,去上清得洗涤后的酵母细胞沉淀。
6. 再用0.02倍体积的酵母感受态制备工作液充分重悬菌体(对10mL酵母,则需要0.2mL 酵母感受态制备工作液)。
7. 按每管0.2mL 分装到冷冻管中,放入保温冰盒中冷却半小时后再放入-80℃冰箱待用。0.2mL的感受态细胞足够1次转化使用。注意:放入保温冰盒的目的是使温度缓慢下降,急冻将使转化效率降低,这点跟大肠杆菌感受态制备过程不同。
二:化学转化酵母感受态细胞(只有B型提供相关试剂)
1. 将总体积不超过20μl的0.1-5μg质粒DNA 加到刚从-80℃冰箱取出的、还处于凝固状态的0.2mL 酵母感受态细胞上。注意:最好同时做一个不加质粒DNA的阴性对照组。
2.室温充分振荡直到凝固的感受态细胞完全融化。注意:此步非常关键,如果能在恒温振荡器上37℃振荡5分钟,则效果更好。
3. 加入1.4mL转化液A,轻柔颠倒混匀一分钟。
4. 30℃培养1小时。
5.室温3000g离心5秒,弃上清。
6.在酵母细胞沉淀中加1.0mL转化液B,振荡一分钟。
7.室温3000g离心5秒,弃上清。
8.在酵母沉淀细胞中加入适量(如100μl)的转化液B,混匀后在在选择培养基上全部涂盘。
9. 30℃培养3-5 天后即得酵母转化菌落。
更多有关北京现货酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)厂家直销的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·10%SDS溶液(不含RNase)
编号:BTN60702
英文名称:RNase-free SDS
规格:250mL
·银染清除剂
编号:BTN100603
英文名称:Silver Stain Scavenger
规格:30次
银染是目前最灵敏的非同位素蛋白质和核酸染色技术,对银染后的条带进行原位酶切(in-gel digestion)和后续MS分析是蛋白组学研究的重要手段。大量研究表明如果预先对银染条带进行去除银粒子的处理,则原位酶切更加有效,MS灵敏度更高。目前最常用的脱银粒子清除方法(如铁*酸*/硫代硫*(代"酸")*法、硫*(代"酸")铜/硫代硫*(代"酸")*法)的主要缺点是引入的金属离子会影响后续反应、有的成分还有毒性(如铁*酸*)、工作液极不稳定。为克服这些缺点,本公司开发了无毒环保的新型银粒子清除剂。
产品特点:
1.高效,5分钟处理即可清除PAGE胶中银染留下的银粒子。
2.成分不含金属离子,跟原位酶切和质谱分析(包括MALDI-TOEMS)等后续反应高度兼容,脱银后PAGE胶还可以再次银染或考染。
3.成分无毒环保,保障研究人员和环境的安全。
4.既可用于蛋白质银染后的脱银,也可用于核酸银染后的脱银。
5.即开即用,使用非常方便,不需要配制各种溶液。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30ml |
| 溶液B | 100ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
1.银染后,切下含所需蛋白条带的PAGE胶条用自备的去离子水摇晃浸泡2次,每次5分钟以去除电泳缓冲液。注意:不要使用整块PAGE胶。
2.用干净镊子将胶条转移到5-10mL的容器中(如5mL的塑料管或10mL的细菌培养管),加入1mL溶液A,摇晃5分钟。
3.直接在上步的管子中再加入3.3mL溶液B,继续摇晃直到染色脱去(一般需要约20分钟)。
4.取出脱色后的胶条,在去离子水中摇晃浸泡二次,每次5分钟。
5.胶条可以直接用于后续的再染色或质谱分析(需要先甲*(代"酸")酸化和脱水处理)。
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·DNA marker(pUC19/MspI)
编号:BTN90602C
英文名称:DNA ladder(pUC19/MspI)
规格:50次
本系列产品为传统的酶切分子量标准,由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后,加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知,每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。
每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5uL。
使用效果:
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
北京现货酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)厂家直销关键词:BTN81109B,酵母化学感受态细胞制备试剂盒,B型,酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型),Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit
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SJ0305 L-Dopa 左旋多巴
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