北京酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)现货

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百奥莱博专业生产供应北京酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)现货，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)
英文名：Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit
编号：BTN81109B
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
本酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理，高效快速制备酿酒酵母化学感受态细胞，用于长期冻存以备后续转化的产品。

产品特点：
1.一次制备，-80℃保存，多次使用，免去每次转化都要制备酿酒酵母感受态细胞。
2. 操作简单，单溶液制备，除酵母培养的时间外，整个操作只需要30分钟
3. 主要用于酿酒酵母S. cerevisiae，也适用于其他多种实验用酵母菌株，包括S. pombe、C. albicans、Pichia pastoris等。
4. 受体酵母可以不含质粒，也可用于携带有选择性质粒的酵母。
5. 对酿酒酵母，最高转化效率可达到0.2-1×105个转化子/μg质粒DNA。对其他酵母，效率稍低，范围在100-2000个转化子/μg质粒DNA。
6. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化，例如YIp，YRp，YCp，YEp和YAC等。
7.可以用于酵母双杂交、定点突变(Site－Directed Mutagenesis)、基因破坏(Gene Disruption)、等位突变基因修复(Mutant Allele Recovery)等实验。
8. 本产品可以制备20 只酵母感受态细胞(需要200mL 酵母培养液)，其中A型只用于制备感受态细胞，B型还带高效转化液。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

产品组成：

 

成分	20T(A)	20T(B)
制备液A	120ml	120ml
制备液B	6ml	6ml
制备液C	10ml	10ml
转化液A	无	30ml
转化液B	无	30ml
说明书	1份	1份

自备试剂：YPD培养基

使用方法：

一：酵母化学感受态细胞的制备
说明：按本方法制备1 管酵母化学感受态细胞就需要OD600达到0.6-1.0的新鲜酵母培养液10mL，用户需根据所需酵母感受态细胞的数量决定培养细胞的体积。如果超过10mL，则制备液的使用量需要按比例增加。
1. 挑取酵母受体菌的新鲜的单菌落(4℃放置不超过3周的也可以)，接种到装在50mL离心管中的10mL的自备的YPD培养基中。
2. 30℃摇晃培养，摇床速度250rpm/分钟，直到OD600达到0.6-1.0(相当于0.6-1×107细胞/mL)。
3.室温3000rpm离心5 min，弃上清得酵母细胞沉淀。
4. 新鲜制备适量的酵母感受态制备工作液。对10mL 酵母需要5.25mL的工作液，其配制方法是：将4.75mL 制备液A、0.25mL 制备液B和0.25mL 制备液C 加入到一个无菌的离心管中后充分震荡混匀即可。酵母感受态制备工作液可放室温待用。
5. 用0.5倍体积的新鲜配制的酵母感受态制备工作液洗涤酵母细胞沉淀一次(对10mL 酵母则需要5mL 酵母感受态制备工作液)。即混合后振荡1分钟，室温3000rpm离心3分钟，去上清得洗涤后的酵母细胞沉淀。
6. 再用0.02倍体积的酵母感受态制备工作液充分重悬菌体(对10mL酵母，则需要0.2mL 酵母感受态制备工作液)。
7. 按每管0.2mL 分装到冷冻管中，放入保温冰盒中冷却半小时后再放入-80℃冰箱待用。0.2mL的感受态细胞足够1次转化使用。注意：放入保温冰盒的目的是使温度缓慢下降，急冻将使转化效率降低，这点跟大肠杆菌感受态制备过程不同。

二：化学转化酵母感受态细胞(只有B型提供相关试剂)
1. 将总体积不超过20μl的0.1-5μg质粒DNA 加到刚从-80℃冰箱取出的、还处于凝固状态的0.2mL 酵母感受态细胞上。注意：最好同时做一个不加质粒DNA的阴性对照组。
2.室温充分振荡直到凝固的感受态细胞完全融化。注意：此步非常关键，如果能在恒温振荡器上37℃振荡5分钟，则效果更好。
3. 加入1.4mL转化液A，轻柔颠倒混匀一分钟。
4. 30℃培养1小时。
5.室温3000g离心5秒，弃上清。
6.在酵母细胞沉淀中加1.0mL转化液B，振荡一分钟。
7.室温3000g离心5秒，弃上清。
8.在酵母沉淀细胞中加入适量(如100μl)的转化液B，混匀后在在选择培养基上全部涂盘。
9. 30℃培养3-5 天后即得酵母转化菌落。
关键词：酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型),BTN81109B,Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit


除北京酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)现货外，我公司正在打折促销以下产品：

 

编号	名称
BTN120626	UTP溶液(100mM)
BTN90315	非冻型尿液DNA保存液
BTN130931	Southern级血液DNA提取试剂盒
BTN130930	百万碱基级血液DNA提取试剂盒
BTN90604C	PCR法DNA探针地高*(代"辛")标记试剂盒
BTN120654D	Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)
BTN100878	Western印迹膜封膜液(尼龙膜)
BTN100924	丽春红S染膜液
BTN90602E	DNA marker(λDNA/BstE II)
BTN70302	一步离心式石蜡清除剂
BTN131114	ABTS溶液(7mM)
BTN131007	中等RIPA裂解液
BTN131120	8M盐*(代"酸")胍溶液
BTN160697	1×TBS(含5%BSA，0.1%Tween20溶液)
BTN131123	考马斯亮蓝G-250
BTN60910	非冻型血液DNA保存液
BTN130815	taq酶抗体
BTN130507	镍柱原位清洁试剂盒
BTN131033	小鼠基因组DNA
BTN120694	制霉菌素溶液
BTN130941	木材DNA提取试剂盒
BTN90602C	DNA marker(pUC19/MspI)
BTN131052	β-巯基乙醇(蛋白级)
BTN131009	NP40裂解液
BTN130934	柱式石蜡包埋组织DNA提取试剂盒
BTN130530	His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂
BTN120511	CpG甲基转移酶(M.SssI)
BTN51208C	dNTP溶液(100mM)
BTN160802	丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")干粉(49.5%T,3%C)
BTN120501	柱式动物线粒体DNA提取试剂盒(测序级)
BTN131053	DTT(蛋白级)
BTN130865	Hoechst 33342干粉
BTN130672	核糖核酸酶RNase If
BTN80801	柱式拭子DNA提取试剂盒
BTN131081	重组蛋白A/G