大肠杆菌Stbl3化学感受态细胞优惠

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大肠杆菌Stbl3化学感受态细胞优惠由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多大肠杆菌Stbl3化学感受态细胞等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。

名称：大肠杆菌Stbl3化学感受态细胞优惠
编号：BTN121112
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：0.1mL*10
本产品是衍生自大肠杆菌HB101菌株，经特殊工艺处理得到的感受态细胞。特别适用于克隆不稳定载体片段，如含有同向重复序列的慢病毒DNA和其他反转录病毒载体。使用pUC19质粒检测，本产品转化效率可达108。

产品特点：
1. 本产品是常规质粒制备的宿主菌，可进行蓝白斑筛选。
2. 本产品是复制慢病毒载体系统推荐使用的菌株，对慢病毒载体等较大的质粒转化的效果好，能够有效抑制长片段末端重复区的重组，减低错误重组的可能性。
3. 非常稳定，能提高慢病毒载体或其他不稳定载体的克隆效率。

菌株基因型：F– mcrB mrr hsdS20(rB–，mB–)recA13 supE44 ara-14 galK2lacY1 proA2 rpsL20(StrR)xyl-5 λ– leu mtl-1

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

想要了解更多关于大肠杆菌Stbl3化学感受态细胞优惠的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·L-谷胱甘肽(还原型)
编号：BTN120705
英文名称：Glutathione
规格：5g
还原型谷胱甘肽是人类细胞质中自然合成的一种肽，由谷*酸、半胱*酸和甘*酸组成，含有巯基(－SH)，广泛分布于机体各器官内，作为一种抗氧化剂，可以保护肝脏细胞膜，增强肝脏的解毒能力，为维持细胞生物功能呈有重要作用。本产品可用于配制纯化GST标签蛋白的洗脱液。



储存条件：常温运输，4℃保存，有效期两年。

·KOD DNA聚合酶
编号：BTN101002
英文名称：KOD DNA Polymerase
规格：250U
KOD DNA Polymerase是从克隆有Thermococcus Kodakaraensis DNA聚合酶基因的质粒在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来。该酶所具有的超强3´→ 5´外切酶活性使得其扩增保真性比Pfu DNA Polymerase更高，保真性是Taq的约50倍，同时具有合成速度快的特点，聚合速度约为普通Pfu DNA Polymerase的5倍，Taq DNA Polymerase的2倍，达到100-138bp/秒，可以在短时间内获得高产量的扩增产物，特别适合于高保真地扩增6 kb以内的PCR产物，扩增所得的DNA为平末端，可用于基因克隆、表达及突变分析等分子生物学实验。

产品组成：

 

成分	规格
KOD DNA聚合酶(5U/μL)	5μl
10×KOD DNA聚合酶缓冲液	1ml
dNTP mix(10mM Each)	0.1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存、有效期一年。

活性定义：1U指75℃条件下，30分钟内使10nmoles的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

使用方法：
一、建议PCR条件(以50μl反应体系为例)

成分	体积	终浓度
模板	-	＜0.5μg
正向引物(10μM)	1μl	0.2μM
反向引物(10μM)	1μl	0.2μM
10×KOD DNA聚合酶缓冲液	5μL	1×
dNTPs(10mM each)	1μL	0.2mM
KOD DNA聚合酶	0.25-0.5μL(1.25-2.5U)	-
超纯水	补足到50μL	-

注：实际操作中计算好需补加水的量后，建议先加水，然后按上述顺序添加其它成分，最后添加KOD DNA聚合酶。最好在冰浴上混合PCR各种成分，防止KOD DNA聚合酶降解引物和模板。待各成分充分混匀后，离心数秒，使反应混合物沉到管底。然后将反应管置于PCR仪中进行扩增。

二、关于
PCR条件的优化
1.质粒或者噬菌体模板(模板量5-20ng，循环参数如下表)

循环参数	目标DNA<1kb	目标DNA<2kb	目标DNA3-4kb	目标DNA5-6kb
Step 1	94℃ 2分钟	94℃ 2分钟	94℃ 2分钟	94℃ 2分钟
Step 2	94℃ 20秒	94℃ 20秒	94℃ 20秒	94℃ 30秒
Step 3	Ta 20秒	Ta 20秒	Ta 20秒	Ta 30秒
Step 4	72℃ 20秒	72℃ 30秒	72℃ 40秒	72℃ 60秒
Step 5	72℃ 5分钟	72℃ 5分钟	72℃ 5分钟	72℃ 5分钟
Repeat step 2-4 for 30-35个循环
Ta=Tm－5℃

2.基因组DNA和cDNA模板(基因组DNA模板量为50-100 ng，1-2μl cDNA(起始转录用的RNA为500 ng)，循环参数如下表)

循环参数	目标DNA<2kb
Step 1	94℃ 2分钟
Step 2	94℃ 20-30秒
Step 3	Ta 15-20秒
Step 4	72℃ 20-60秒
Step 5	72℃ 5分钟
Repeat step 2-4 for 30-35个循环
Ta= Tm - 5℃

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F030301 胶体金标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*GOLD
CYB163077 溶菌酶-FITC(订制)
ARB11401 人神经保护因子(CVNPF)酶联免疫定量检测 Human cobra venom neuronal protective factor,cvnpf ELISA KIT
SJ0235 DPBS
没食子酸月桂酯 5-BrdC 1166-52-5
KT203 Long Taq PCR MasterMix
PY02-352  假单胞菌琼脂基础培养/CN琼脂基础  250克  
22189-32-8 Spectinomycin  盐*(代"酸")壮观霉素
F030307 胶体金标记兔抗卵清蛋白抗体 Rabbit Anti-OVA*GOLD
ARB12487 大鼠总补体(CH50)检测服务 Rat 50% complement hemolysis,ch50 ELISA KIT
D-焦谷*酸 Ethyl caprate 4042-36-8
N-(2-羟yi基)哌*(代"嗪")-N"-4-丁磺酸 Brij-35 161308-36-7
BTN51101 常态转化液 Tranzol
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·免DNA提取PCR试剂盒(细胞组织裂解物直接PCR试剂盒)
编号：BTN130985
英文名称：Cell Lysate PCR Mix
规格：100次
本产品是可以直接用新鲜的动物、植物、细菌样品的裂解液进行PCR扩增的试剂盒。

产品特点：
1. 操作简单，免去DNA提取、蛋白去除、RNA去除等步骤，5分钟即得用于PCR的模板。
2. 兼容性广，可以用于几乎所有的分子生物学样品，包括细菌、昆虫、真菌、各种植物、各种动物、法医样品(包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、口腔细胞和FTA卡)、石蜡组织切片等。
3. 提供离心管专用研磨杵，便于处理棘手样品。
4. 环保健康，不使用任何有毒有害的试剂。
5. 尤其适用于大规模育种筛选和临床筛选。
6. 本试剂盒可以处理100份不同的样品，足够100次PCR实验。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	12ml
溶液B	12ml
PCR MagicMix 3.0	1ml
研磨杵	100只
说明书	1份

储存条件：溶液A、溶液B和离心管专用研磨杵可以常温和放置，PCR MagicMix 3.0需要低温运输、-20℃保存。有效期一年。

使用方法：
1. 首次使用本产品时需要详细检查溶液A和溶液B是否有结晶析出。如果有需要37℃溶解后摇晃均匀待用。未用完部分可以放常温保存。
2. 根据材料不同参考下表取少量样品到1.5mL塑料离心管中。

样品种类	取样量
动物组织	1-5mg
鼠尾	2mm长
血液样品	不超过20μl
植物叶片	1-5mg
植物种子(去皮)	1-5mg
酵母培养物	0.2-0.5mL培养物沉淀
细菌培养物	0.2-0.5mL培养物沉淀

注意：未列出样品，用户需要自己摸索最佳用量。对富含多醌多酚的植物材料(如棉花)，组织使用量最好不要超过0.5mg。
3. 加入100μl溶液，确保溶液A完全将样品淹埋。
4. 用研磨杵小心将样品在离心管内捣碎。血液一般情况捣碎30秒即可；实体组织需要捣碎到溶液的颜色变浑浊(植物叶片的话，溶液的颜色将变成绿色)。如需更多研磨杵，可从我司另购。对棘手的样品，还可以增加95℃保温10-60分钟一步，待温度冷却到室温后再进入下一步。残留的实体组织碎片不会影响后续试验。
5. 加入100μL溶液B，震荡10秒混匀。
6. 常温12000rpm离心2分钟。
7. 将上清液转移到一个干净的1.5mL离心管中。如果不用，可以放-80℃长期保存。如果用于后续PCR，请直接进入下步。
8. 直接用裂解液作为模板设置30μl体系的PCR反应体系如下：

成分	用量
PCR MagicMix 3.0	15μl
细胞裂解液(来于上步)	1-5μl
自备PCR引物1(10uM)	1μl
自备PCR引物2(10uM)	1μl
补水到	30μl

注意：裂解液体积最好不要超过PCR体积的1/10。如果需要增加模板的加入量，则PCR体系应该相应的增加。如果加入5μL裂解液，则可以使用50μL的PCR体系。
9. 放入PCR仪中进行PCR,PCR参数需要根据引物Tm值和靶分子长度等参数设置。一般不低于35次循环。
10. PCR结束后取5-10μL直接上样电泳(本产品不需要上样液)，红色染料电泳速度相当于50bp DNA片段。

注意事项：
1．如果反应体系不是30μl，各成分需要等按比例增加或减少。
2．如果细胞裂解液中有不明PCR抑制物(植物、土壤和血液等DNA样品常含此类抑制物)，可以在PCR体系中加入1/10的PCR抑制物清除剂(BTN60804，30μL体系中加3μL)，可能会对PCR有帮助。

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