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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
dA Tailing Kit
- 库存:
471
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")平末端DNA加A试剂盒批发,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:平末端DNA加A试剂盒批发
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:dA Tailing Kit
规格:50次
编号:BTN60105
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性,在只有dATP 存在的情况下,在平末端的DNA片段加上一个dA 尾巴,使平末端片段也能被T载体克隆。其流程图如下:

产品特点:
1. 简单,2×Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
3.产物可以直接用于与T载体的连接。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA polymerase(5U/μL) | 50μl |
| 2×Tailing Buffer | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:反应前纯化处理:
用Vent,Deep Vent,Pfu,Pwo等具有3 到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段,必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/*仿抽提或Proteinase K处理),否则它们将在加A反应时,切除掉加上的A尾巴,干扰反应。可以采取胶回收和酚/*仿抽提法等常规方法纯化,最后溶解在水或TE中,终浓度以0.1μg/μL为宜。
二:加A反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中,分别加入下列成分:
| 回收的DNA片段 | 0.2-2ug |
| 2×dA Tailing Buffer | 25μL |
| Taq DNA polymerase(5U/μL) | 1μL |
| 补水到 | 50μL |
| 72℃保温2小时 | |
三:反应后处理
加A反应后,Taq DNA pol
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平末端DNA加A试剂盒批发关键词:BTN60105,dA Tailing Kit,平末端DNA加A试剂盒
·阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测试剂
编号:BTN130821
英文名称:Alamar Blue Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit
规格:100次
阿尔玛蓝也称刃天青、天兰化*,树脂天青是一种安全,无毒的蓝色染料。加入培养液中,可作为氧分子电子传递链的受体,呈现由蓝向红转变的颜色变化,反映所研究的细胞或微生物对氧分子的消耗,因而常被用作氧化还原指示剂,以显示被观察细胞和细菌的代谢活动。阿尔玛蓝的颜色改变可用光度计测定。阿尔玛蓝的粉红色细胞代谢产物 也可用荧光检测,其激发光波长在530-560nm之间,发射光波长为590nm。其原理如下:
检测实验可以在微孔板中进行,如果用酶标仪检测结果,不仅检测操作更加简便,快速,而且可以对细胞和细菌的数量进行定量分析以及药物高通量筛选(High Throughput Screening,HTS),因此阿尔玛蓝法是一种简便、快捷、敏感、高效、安全而又经济的检测方法,可广泛地用于细胞增殖代谢,药物的细胞毒作用的体外测定以及病原微生物的快速检测与鉴定。与台盼兰、TTC、MTT、MTS等分析法相比,本产品具有下列特点:
1.阿尔玛蓝法操作简便,溶液稳定。
2.阿尔玛蓝法采用单一试剂,可以连续、快速地检测细胞的增生状态。
3.阿尔玛蓝对细胞无毒、无害,不影响细胞的抗体合成与分泌等活性,可以对同一批细胞的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察,同时几乎不干扰细胞正常代谢。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期一年。
使用方法:
1.细胞的增殖和细胞毒性实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2.每孔加入100μL细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入10³个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5×10³个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3.接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10μL特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10μL抑制因子或细胞毒药物。
4.培养结束后,取出本产品,置室温融化混匀,于洁净工作台内按10μL/孔加入微孔板中,在细胞培养箱内继续孵育12-24小时,培养液颜色由蓝变为粉红(如采用荧光分光光度法,只需孵育5-8小时)。
5.在570nm 测定吸光度,参考波长600nm。如无此滤光片,可用565nm和610nm的滤光片替代。
6.也可用荧光分光光度法检测,激发光波长在530-560nm之间,发射光波长为590nm。检测时间可在结果以荧光强度表示。
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