常态细胞转化液(免感受态细胞制备)库存

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常态细胞转化液(免感受态细胞制备)库存是高品质的克隆与表达产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多常态细胞转化液(免感受态细胞制备)等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。

名称：常态细胞转化液(免感受态细胞制备)库存
规格：20次
英文名：Tranzol
编号：BTN51101
本品能使各种常态的E.coli细胞直接用于快速转化实验，使广大用户不再因为简单的转化实验而再为感受态细胞的制备，保存和运输等繁琐的事情而操心，大大地缩短了基因克隆实验的时间，提高使用者的工作效率。

产品特点：
1. 不需专门制备感受态细胞,直接使用常态的细胞进行质粒转化,随用随配,十分方便。
2. 常态细胞包括新鲜培养的菌液,新鲜的或4℃放置数月的培养基菌落,甘油菌种保存液等。
3.适用菌种和质粒广泛,用过的E.coli菌种包括K12 系的DH5a和Tg1，B 系的BL21(DE3)。用过的质粒有pGEM，pET和Clion系列等。
4.转化效率适中，使用10ng质粒转化一般能得到上万个转化子)效率在10E5 到10E6 CFU/ug质粒之间),使用3-5μL连接液转化一般能得几千个转化子,足够筛选重组子使用(但不适合构建文库)。
5. 单管快速操作，整个操作可以在一个1.5mL塑料离心管中进行，最短可以在三十分钟内完成，不需要过夜细菌培养,热休克处理甚至恒温摇床,极其适用于自动化的大规模克隆筛选工作。
6. 稳定性好，本可以在-20℃条件下长期保存而不用担心转化效率的降低,而感受态细胞在同样条件下会迅速失去活性。

成分	规格
常态转化液	1ml
阳性对照(pGEM3或pUC19)10μL,1ng/μL	5T
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 标记无菌的1.5mL塑料离心管并加入1mL液体培养基(如SOC或LB)，每次转化试验最好加上阳性对照(用提供的pGEM3或其他质粒)和阴性对照(不加DNA)各一个。
2. 如果使用E.coli菌落,则直接用接种环,无菌牙签或无菌吸头从培养皿上挑取1-5个菌落(直径在3-5 mm之间)到每个离心管中，用移液枪轻柔吹打散开。如果使用甘油菌种保存液,则直接取50-100μl菌种液到1mL培养液中。如果使用单个菌落培养得到的新鲜培养液，则取1mL培养了3-4小时的菌液直接从第4步开始。
3. 37℃保温1小时(如果保温时间延长到3-4小时，可以提高转化效率一倍，但过长则转化效率又开始降低)。
4.室温10000rpm离心1分钟后小心移弃上清(液体培养基)，离心速度低于10000rpm则细菌沉淀易丢失。沉淀的细菌约芝麻或麦片大小为宜。细胞过多或过少都不好。
5. 短暂离心，用移液枪小心将残留的培养液(约50μl)吸出，否则残留培养基将会严重影响转化效率，故此步不能省略。
6. 加入50μl 冰浴的Clion转化液并小心将细胞吹打均匀。
7. 加DNA样品。在样品管中加入1-5μl连接反应液并轻柔吹打均匀；在阳性对照管中加入5 ng阳性质粒(没被酶切的载体，也可以使用常用的pGEM，pUC，pBR322等质粒)；在阴性对照管中加入连接反应的阴性对照，如果没有则不加入任何溶液或加入1-5μl无菌水。
8. 将上述离心管置于-20℃直到液体凝固为止(一般需要20分钟到1小时)，然后冰浴放置5-10分钟。
9.在每个离心管中加入1mL无抗菌素的SOC或LB培养液，混匀后置37℃水浴保温1小时以便让抗性基因表达,否则将没有转化子生长。
10. 将溶液充分吹打混匀后分别取30-200μl分别涂于含相关的抗菌素的培养盘上，剩余溶液最好留4℃待用。
11. 37℃ 16-24小时培养，阴性对照盘上不应有任何落菌，否则可以判断操作中有污染或培养基中抗菌素浓度不够。使用质粒转化的阳性对照100μl涂盘一般能有上千个菌落。连接样品转化所得菌落数将取决于连接反应效率等多种因素，100μl的涂盘一般有几十到几百个转化子。

使用效果：

左图是用10 ngClionG载体转化10个E.coli Tg1菌落后得到的转化子。右图是用3μL连接液(ClionB载体+1 Kb DNA片段,10μL反应体系)转化10个E.coli DE3菌落后37℃过夜保温得到的转化子。涂盘量均为200μL。

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3-(N-玛啡啉)丙磺酸*盐 o-Dianisidine dihydrochloride 71119-22-7
离子交换剂Ⅴ Zearalanone
BTN80403 RNase-free水 RNase-free Water
盐*(代"酸")洛美沙星 Trehalose anhydrous 98079-52-8
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·一站式平末端克隆试剂盒
编号：BTN131126
英文名称：One-Stop Blunt-ended Cloning Kit
规格：20次
基因片段用Pfu等DNA聚合酶扩增得到的产物为平末端，直接克隆比较困难。做T/A克隆时，需要在其末端添加单个碱基A。本试剂盒提供了在平端添加单个A所需的所有试剂，大大方便后续的T/A克隆及序列分析。

产品特点：
1.适用范围包括：由高保真 DNA聚合酶如 Pfu、Pwo 、DeepVent等扩增而来的PCR产物；一些限制性内切酶如 EcoRV 、SmaI等酶切产生的DNA片段；粘端DNA用DNA聚合酶补平后的片段。
2.可以在任何平末端DNA片段两端分别补上单个脱氧腺嘌呤 A，间接将PCR产物克隆到T载体上。
3. 操作快速，5分钟就可以完成 。
 

成份	规格
ddH2O	1mL
平末端载体	20μl
10×克隆Buffer	0.5mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1.在离心管中加入下列溶液：

成份	用量
DNA Fragment	10ng
10× Cloning Buffer	5μL
平末端载体	1μL
ddH2O	up to 50μL

2. 72℃保温，5分钟。
3.产物回收或者 -20℃保存备用。


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·中性亲和素蛋白
编号：BTN131090
英文名称：Nuetral Avidin
规格：10mg
中性亲和素蛋白是一种去糖基化形式的亲和素，因此对外源凝集素的结合降低至检测不出的水平，而对结合生物素的亲和性(Ka=1015M-1)没有任何损失。中性亲和素蛋白等电点为中性，这样可以避免非特异的结合。另外它表面的赖*酸残基让它可以被衍生或者进行蛋白标记。中性亲和素蛋白的分子量为60000，对生物素的特异结合能力大约为14μg/mg蛋白，接近理论最大活性。

产品特点：
➤相比抗组*酸抗体背景更低。
➤可进行抗体剥离和重新检测。
➤ 去糖基化，将外源凝集素结合降低至不可检测水平。
➤可在组织化学中用于生物素封闭试剂。
➤ 结合能力为11-17μg生物素/mg中性亲和素蛋白。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

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