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- 技术资料
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-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
C-His plasmid(with CMV promoter)
- 库存:
759
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括YT471型C端His标签融合蛋白质粒哪里卖在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:YT471型C端His标签融合蛋白质粒哪里卖
产地:国产|进口
编号:YT471
英文名:C-His plasmid(with CMV promoter)
品牌:百奥莱博
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端和His tag(His标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5"端含有一个可以编码His标签的序列,因此可以表达出含有His标签的融合蛋白,可以方便地使用抗His的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| multiple cloning site | 680-740 |
| c-His tag | 741-758 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 811-832 |
| SV40 polyA signal | 844-1227 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1365-1669 |
| bla promoter | 1694-1818 |
| SV40 promoter | 1838-2176 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 2211-3002 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3003-3461 |
| pUC origin | 3590-4257 |
本质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
YT471型C端His标签融合蛋白质粒哪里卖正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·DNA Ladder(200bp-12kb)(12条带)(DNA分子量标准)
编号:YT425
英文名称:DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands)
规格:100次
本DNA Ladder是一种即用型DNA分子量标准,包含了12条双链DNA条带,可以满足各种常规DNA电泳分析的分子量参照需要。本DNA Ladder共含12条带,分别为200bp、500bp、800bp、1000bp、1500bp、2000bp、3000bp、4000bp、5000bp、6000bp、8000bp和12000bp 。
本DNA ladder中2000bp条带亮度较高,是其它条带亮度的3倍,使辨别条带更加容易。本DNA ladder中已添加了含有*酚蓝的DNA上样缓冲液,可以直接使用。每孔上样5微升,即可观察到非常清楚的DNA条带。
储存条件:-20℃,有效期1年。
注意事项:
1. 如果使用强致癌的*化乙锭(EB),须注意避免DNA ladder在使用时被*化乙锭污染,操作时一定要采取适当的防护措施。推荐使用本公司无毒的核酸红色染料(YT015)或核酸绿色染料(YT016)。
2. 电泳时请尽量使用未用过的电泳缓冲液和新配制的琼脂糖凝胶,以免影响电泳效果。
·HDAC4抗体
编号:YT793
英文名称:anti-HDAC4 antibody
规格:>20次
本抗体是用经过适当修饰的人工合成的人HDAC4*基端一段多肽(aa 1-19)作为抗原制备而成的抗HDAC4小鼠单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本HDAC4抗体识别的是总HDAC4(total HDAC4),可以检测内源性的HDAC4,未发现和其它HDAC蛋白有交叉反应。
染色质由重复的核小体(necliosome)构成,而核小体则包含了由Histone H2A,H2B,H3和H4各两个分子组成的八聚体和与该八聚体结合的DNA。组蛋白(histone)上的一些Lys位点,可以被乙酰化修饰,从而影响染色质的空间结构,最终影响该区域的基因转录调控。通常当组蛋白被乙酰化时,染色质处于相对松散的构象,此时转录因子可以结合到该区域促进相关基因的转录。反之,当组蛋白被去乙酰化时,染色质结构会变得相对致密,该区域相关基因的转录就会被抑制。组蛋白可以被多种乙酰化酶乙酰化,包括PCAF,p300/CBP,GCN5,SRC-1,TAFII250,BRCA-2和Patt1等。组蛋白去乙酰化酶包括HDAC(histone deacetylase)家族和Sirtuin家族(Sirt家族)。HDAC家族包括HDAC1,HDAC2,HDAC3,HDAC4,HDAC5,HDAC6,HDAC7,HDAC8,HDAC9,HDAC10和HDAC11。通常HDAC可以去乙酰化染色质中某些特定区域的组蛋白,导致该区域的染色质结构变得相对紧密,从而抑制该区域相关基因的表达。Class I HDAC包括HDAC1,2,3,8;Class II HDAC包括HDAC4,5,6,7,9,10。Sirtuin家族被称为Class III HDAC。Class IV HDAC只包括HDAC11。HDAC1,2,8主要定位在细胞核;而HDAC3则在细胞核和细胞浆都有分布,并且分布在膜结构上。Class II HDAC在特定条件下可以在细胞核和细胞浆之间穿梭(shuttle in and out)。HDAC在命名时被称为组蛋白去乙酰化酶,但事实上它们可以去乙酰化多种多样的蛋白。例如,HDAC6可以和微管(microtuble)结合,可以去乙酰化tubulin,Hsp90和cortactin等。目前发现大量的蛋白可以被乙酰化修饰,因此HDAC等乙酰化修饰酶被认为在基因转录调控、信号转导、生长发育、分化凋亡、代谢性疾病和肿瘤等多种生理病理过程中发挥重要作用。HDAC的抑制剂目前被认为是很有前景的肿瘤治疗药物。
HDAC4有其自身的核定位信号(nuclear localization signal,NLS)和出核信号(nuclear export signal,NES)。HDAC4可以和14-3-3或MEF2相互作用,从而定位到细胞核中发挥作用。HDAC4在TGF信号通路中也有一定作用。HDAC4可以调控骨骼和肌肉的发育。另外,维持适当的HDAC4蛋白水平和保持良好的视力有密切关系。
产品组份:
HDAC4抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原物种:人
免疫原:经过适当修饰的人工合成的人HDAC4*基端一段多肽(aa 1-19)
克隆性:单克隆
宿主:小鼠
用途:WB,IP,IC, ELISA
交叉反应性:人,小鼠,大鼠
同种型:IgG2a
HDAC4分子量:~140kD
推荐稀释比例:WB(1:1000),IP(1:100),IC(1:200),ELISA(1:5000)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
储存条件:-20℃,有效期一年。
YT471型C端His标签融合蛋白质粒哪里卖关键词:C端His标签融合蛋白质粒,YT471,C-His plasmid(with CMV promoter)
PY02-071 西蒙氏枸橼酸盐琼脂 250克
ARB12653 大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白(EotAxIn 1/CCL11)Elisa方法检测 Rat eotaxin 1 ELISA KIT
ARB13055 小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)elisa检测 Mouse transforming growth factorβ2,tgfβ2 ELISA KIT
PY02-416 m-TGE肉汤 250克
DP424 TRNzol Universal总RNA 提取试剂
C1601 驴血清(无菌过滤)
ARB11374 人前列腺素F2α(PGF2α)elisa测定使用说明书 Human prostaglandin f2α,pgf2α ELISA KIT
ARB12864 小鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)定量分析 Mouse regulated on activation in normal t-cell expressed and secreted,rantes ELISA KIT
74-79-3 L-Arginine L-精*酸
PY02-148 DNA酶甲基绿琼脂基础 100克
SJ0742 大鼠白细胞分离液
ARB10320 人中期因子(MK)含量测试 Human midkine,mk ELISA KIT
ARB11388 人活化凝血因子Ⅻ(FⅫA)酶标法分析 Human activated coagulation factor Ⅻ,fⅫa ELISA KIT
麦芽糖醇 L-(+)-Ribose 585-88-6
ARB14262 猪核因子kb(NFkb)酶联免疫定量检测
73049-39-5 小牛胸腺DNA DNA(calf thymus)
ARB12765 小鼠L选择素(L-SelectIn/CD62L)elisa检测说明书 Mouse l-selectin ELISA KIT
66-84-2 D-Glucosamine D-*基葡萄糖
PY02-226 我妻氏培养基基础 250克
ARB12875 小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)检测服务 Mouse soluble myosin heavy chain 2,smhc-2 ELISA KIT
YT471型C端His标签融合蛋白质粒哪里卖关键词:C端His标签融合蛋白质粒,YT471,C-His plasmid(with CMV promoter)
·L-谷*酸氧化酶
编号:YT552
英文名称:L-Glutamate Oxidase (Crude Enzyme)
规格:100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的L-谷*酸氧化酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,用于催化L-谷*酸生成H2O2O、*和α-酮戊二酸。
CAS:39346-34-4
外观:半透明黄色溶液
酶促反应:L-glutamate + O2 + H2O = 2-oxoglutarate + NH3 + H2O2
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
我公司生产供应销*(代"售")的克隆与表达正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购YT471型C端His标签融合蛋白质粒哪里卖。
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文献和实验一,酵母表达系统毕赤酵母表达系统(invitrogen公司):分泌型质粒pPIC9K,宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha (甲醇诱导)宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二,原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签(N端):PET5-(a)氨苄抗性带His标签(N端):PET28-(a)卡那抗性带His标签(C端):PET24-(b)卡那抗性带His标签(C端):PET21-(a)氨苄抗性带His标签(N端)+TrxA(硫氧还蛋白):PET-32
后,2000倍稀释大量培养。 含有疏水基团的重组蛋白往往对宿主菌有毒性。因此,除非有特殊的意义,应当去除插入片段中编码信号肽序列或穿膜区的序列。然而,也有少数包含信号肽的蛋白可以在膜间质少量的表达。这种情况下,建议诱导前培养温度降低为25度。 有些蛋白,尤其是小于10KDa的蛋白在E. coli中不稳定,可能很快被细菌中的蛋白酶降解。克服这种困难的方法包括:降低培养温度到30度;使用一种或多种蛋白酶缺陷的宿主菌;使用QIAGEN公司的表达质粒pQE-16、pQE-40,使生成目标多肽与DHFR的融合蛋白
-16、pQE-40,使生成目标多肽与DHFR的融合蛋白;如果是纯化过程中蛋白易降解,则可以在纯化试剂中加入甘油以及蛋白酶抑制剂,并且确保整个操作在4度完成。 2、如何在E. coli中表达高度毒性的蛋白? 在E. coli中表达高度毒性的蛋白往往是很困难的。毒性基因表达‘泄漏’会杀死宿主菌,尤其在早期的生长或转化后,可以使含有突变的不表达质粒的细菌选择性生 长。因此,要表达高毒性的蛋白,需要更高水平的lac 抑制蛋白。推荐同时使用QIAGEN公司的pQE-80L系列表达载体和M15
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