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366
- 英文名:
C-His plasmid(with CMV promoter)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括YT471型C端His标签融合蛋白质粒价格厂家在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:YT471型C端His标签融合蛋白质粒价格厂家
编号:YT471
规格:1μg
英文名:C-His plasmid(with CMV promoter)
品牌:百奥莱博
产地:北京
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端和His tag(His标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5"端含有一个可以编码His标签的序列,因此可以表达出含有His标签的融合蛋白,可以方便地使用抗His的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| multiple cloning site | 680-740 |
| c-His tag | 741-758 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 811-832 |
| SV40 polyA signal | 844-1227 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1365-1669 |
| bla promoter | 1694-1818 |
| SV40 promoter | 1838-2176 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 2211-3002 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3003-3461 |
| pUC origin | 3590-4257 |
本质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
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YT471型C端His标签融合蛋白质粒价格厂家关键词:C-His plasmid(with CMV promoter),C端His标签融合蛋白质粒,YT471
·Caspase 3抑制剂(Ac-DEVD-CHO)
编号:YT146
英文名称:Caspase 3 Inhibitor Ac-DEVD-CHO
规格:10mM×0.1ml|5mg
本品是一种非常强的Caspase 3抑制剂,可以抑制由Caspase3激活导致的细胞凋亡。也可以抑制Caspase 7。本品是一种可逆的Caspase 3抑制剂,也是最常用的细胞凋亡抑制剂之一,常用于观察特定的细胞凋亡是否通过Caspase 3激活来介导。可以用于抑制培养细胞内的Caspase 3,也可用于抑制体外纯化或粗抽提的Caspase 3。在体外对Casapse 3的IC50=200pM。本品10mM包装产品配制在DMSO中,可以直接使用。5mg包装为粉末装。
分子式:C20H30N4O1
分子量:502.5
纯度:>95%。
注意事项:
1. 如果每次使用量少,使用次数较多,请适当分装。反复冻融会影响本抑制剂的使用效果。
2. 如果希望适当稀释后再分装保存,请使用DMSO进行稀释。
3. 本Caspase 3抑制剂Ac-DEVD-CHO在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
储存条件:-20℃,有效期一年。
·AP2凝胶迁移突变探针(10μM)
编号:YT202
英文名称:AP2 Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP2 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-AP2的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
EMSA突变探针-AP2的序列如下:
5"-GAT CGA ACT GAC CGC TTG CGG CCC GT-3"
3"-CTA GCT TGA CTG GCG AAC GCC GGG CA-5"
EMSA突变探针-AP2中AP2的公认的结合位点发生了突变,从而使AP2无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和AP2的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和AP2的结合的条带不会被抑制。参考下图。
图1. 一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
储存条件:-20℃,有效期一年。
YT471型C端His标签融合蛋白质粒价格厂家关键词:C-His plasmid(with CMV promoter),C端His标签融合蛋白质粒,YT471
·EGFR抑制剂(AEE788)
编号:YT923
英文名称:3NVP-AEE788
规格:10mM×0.2ml|5mg|25mg
本品是一种有效的EGFR和HER2/ErbB2抑制剂,IC50分别为2nM和6nM,对VEGFR2/KDR、c-Abl、c-Src和Flt-1作用效果稍弱,对Ins-R、IGF-1R、PKCα和CDK1没有抑制作用。
CAS:497839-62-0
分子式:C27H32N6
分子量:440.58
纯度:98.1%
结构式:
AEE788也抑制KDR、c-Abl、c-Src和Flt-1,IC50为50-80nM。AEE788对ErbB-4、PDGFR-β、Flt-3、Flt-4、RET和c-Kit没有作用效果,也不抑制Ins-R、IGF-1R、PKC-α和PKA。AEE788作用于A431细胞,有效抑制EGFR磷酸化,IC50为11nM。AEE788作用于CHO细胞和BT-474细胞,分别抑制KDR和ErbB2的磷酸化,对A31细胞PDGF诱导的磷酸化作用没有影响。AEE788抑制NCI-H596、MK、BT-474和SK-BR-3细胞增殖,IC50分别为78、56、49和381nM。AEE788也抑制EGFR突变包括32D/EGFR和32D/EGFRvIII促进的细胞增殖。AEE788也抑制EGF和VEGF促进的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖,IC50分别为43和155nM。AEE788作用于人类皮肤SCC细胞系(Colo16、HaCaT、SRB1和SRB12细胞)抑制EGFR、VEGFR-2、Akt和MAPK的磷酸化,导致生长得到抑制,且诱导凋亡。AEE788为0.2-1.0μM时,作用于HT29细胞,抑制EGFR和Akt的磷酸化。AEE788作用于髓母细胞瘤细胞系,抑制细胞增殖,抑制EGF和神经调节蛋白诱导的HER1、HER2和HER3激活。AEE788作用于对化学剂敏感且抗化学剂的髓母细胞瘤细胞时抑制生长。
AEE788作用于NCI-H596或DU145移植瘤模型,抑制肿瘤生长,只轻微改变体重,这种作用存剂量依赖性。AEE788按50mg/kg剂量作用于NeuT/ErbB2 GeMag模型诱导肿瘤衰退达57%。AEE788作用于A431肿瘤和GeMag肿瘤,分别有效抑制EGF诱导的EGFR磷酸化和ErbB2磷酸化。AEE788抑制VEGF诱导的血管生成,这样作用存在剂量依赖性,但是不会抑制FGF诱导的血管生成。AEE788按50mg/kg剂量作用于Colo16移植瘤,抑制54%肿瘤生长,因为EGFR、VEGFR、Akt和MAPK的磷酸化得到抑制。AEE788按50mg/kg剂量作用于盲肠和腹膜,也抑制肿瘤生长,抑制50%以上,且作用于移植在裸鼠盲肠的HT29细胞时,降低淋巴癌转移的发生率,抑制达70%,对体重没有影响。AEE788作用于HT29盲肠癌,明显降低pEGFR和pVEGFR的表达水平,但是不改变EGF、VEGF、EGFR或VEGFR的表达水平。和CPT-11联用,AEE788明显抑制淋巴癌转移AEE788抑制Daoy、DaoyPt和DaoyHER2移植瘤的生长,抑制分别达51%、45%和72%。AEE788作用于K562肿瘤细胞,可以促进LBH589调节的活性氧簇的产生,可以增强凋亡。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
我公司正在打折促销克隆与表达全系列产品,恭候您的咨询选购YT471型C端His标签融合蛋白质粒价格厂家。
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文献和实验。当某一个标签的使用,一是能构成表位利于纯化和检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组蛋白进行分离纯化。使用His-tag有下面优点:1.标签的分子量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD,一般不影响目标蛋白的功能;2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解
)利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组 蛋白进行分离纯化。使用His-tag有下面优点: 标签的分子 量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD,一般不影响目标蛋白的功能; His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析 去除杂蛋白,使复性不受其它蛋白
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