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文献和实验运用Cell Based Elisa检测信号通路蛋白和磷酸化蛋白
results of phosphorylated proteins磷酸化的试剂盒中的抗体是经过大量筛选,选取了高特异性和低背景的抗体。p-P38MAPK抗体是基于P38的磷酸化Thr180到Tyr182这个位点多肽片段所制备。P-JNK抗体是基于人的Thr183和Tyr185.这个抗体可以同时识别P-JNK1和P-JNK2.我们在运用Cell Based Elisa P38和JNK两个试剂盒做检测的同时,又用传统的WB方式来验证这个结果。经过反复验证,都得出了同样的结果, Cell Based
提示我模型中的通路究竟涉及哪个亚型,而我又没有那么多经费一个一个亚型去试,故我想能不能就检测总的PKC激活水平,毕竟有亚型被激活,那总的活化PKC水平也应该会升高啊!虽然敏感性和特异性肯定没有单独检测一个亚型的高。 还想请教:Phospho-PKC (pan) (gamma Thr514) Antibody 和Phospho-PKC (pan) (βII Ser660) Antibody 这两个抗体的针对的亚型有什么不同?既然都是pan,那是否说都是针对所有的亚型,只是磷酸化的残基不同
米宝 这俩天做实验,极其郁闷。我做的总AKt和pAkt,大鼠脑组织,第一次跑总AKT的时候,我觉得可能是因为蛋白是提取的浓度比较好吧,出来了一条浓浓的条带,三组总AKt都出了,接下来做pAkt,就出了一个带,效果挺明显的。后来再做pAkt的时候,跑了4张膜,显影的时候,太干净了,上面什么都没有,甚至连个杂带,斑点 都没!实验是在实验员的领导下完成的,技术上基本没什么纰漏,查阅本版面有关这问题方面的介绍,有的解释说pakt降解了!一抗是用的Phospho-Akt
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