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文献和实验CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
来看一下。提交订单，等待引物到达：华大基因的速度非常快，大约在 2 - 3 个工作日即可拿到，在等待期间需要准备好：LB + 抗生素抗性平板；感受态细胞及相应培养基；无内毒素的 Cas9 载体质粒；BbsI 限制性内切酶；质粒小提试剂盒；常规限制性内切酶。
. 质粒拷贝数低： 由于使用低拷贝数载体引起的质粒 DNA 提取量低，可更换具有相同功能的高拷贝数载体。 11. 菌体中无质粒： 有些质粒本身不能在某些菌种中稳定存在，经多次转接后有可能造成质粒丢失。例如，柯斯质粒在大肠杆菌中长期保存不稳定，因此不要频繁转接，每次接种时应接种单菌落。另外，检查筛选用抗生素使用浓度是否正确。 12. 碱裂解不充分： 使用过多菌体培养液，会导致菌体裂解不充分，可减少菌体用量或增加(以天根生化的质粒小提试剂盒中的溶剂配置为例)溶液 P1、P2 和 P3 的用量
【公告】丁香通试用中心：10月免费试用装精选（10月18日有更新）
。 2. 鼠尾直接PCR试剂盒（常温裂解）：一步法 PCR；处理鼠尾样本无需加热；用于高通量鉴定、筛选。 3. 通用植物直接PCR试剂盒：无需进行 DNA 纯化；高效特异性扩增样品；用于多种植物叶片的处理。 4.EDTA抗凝血直接PCR试剂盒：无需预处理血液；世界上血液耐受能力最强的 PCR 反应体系；安全可靠。 5.植物总RNA提取试剂盒：整套试剂盒RNase-Free；RNA得率高；质量高；安全快速。 有奖免费试用： RIPA裂解液(中) 火晶梯度PCR仪 康宁SORENSON
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