FastKing cDNA 第一链合成试剂盒 ( 去基因组

                               ——可轻松通读高GC 和复杂模板
单链RNA 因链间氢键作用而存在广泛的复杂二级结构区域，普通反转录酶在遇到复杂二级结构时可能会导致反转录的终止，从而无法成功完成cDNA 的合成。而新一代King 反转录酶具有独特的结构域，可以破坏RNA 链间的氢键作用力，从而打开RNA的复杂二级结构，保证反转录的正常进行。


实验结果

3min 高效去除基因组DNA

gDNase 可高效快速的去除gDNA，并直接进行反转录实验，无需繁琐的后续RNA 纯化步骤。

1 组：不去基因组反转录；2 组：不去基因组不反转录；

3 组：去基因组后反转录；4 组：去基因组不反转录。
方法：以1 μg Hela 细胞RNA（有基因组残留）为模板，对TNFalpha基因（引物设计在外显子上，可以cDNA 或基因组为模板进行扩增）进行荧光定量PCR 检测。
结果：如图所示，2 组可反映RNA 中基因组的残留情况，3 组可准确反映TNF-alpha 的真实表达水平，1 组因基因组残留而导致最终定量结果发生错误，4 组表明KR116 可以完全去除RNA 中残留的基因组DNA。

继承King 家族卓越品质

超高的反转录效率
——反转录效率高达95%

一般的反转录酶其反转录效率在40-60%，为增加cDNA 产量，其通过推荐更高的RNA 上样量来实现，King 反转录酶由于其特有的对于RNA 模板的高亲和力，使其反转录效率能够达到95% 以上，所以无需大量上样即可满足后续实验，既节省RNA，又使得cDNA 高纯高产。
 

实验结果显示：不同来源反转录酶的性能比较:同比无RNaseH活性M-MLV及 AMV系列反转录酶，King Reverse Transcriptase反转录效率有明显优势。


超强的复杂模板通读能力
——可轻松通读高GC 和复杂模板

单链RNA 因链间氢键作用而存在广泛的复杂二级结构区域，普通反转录酶在遇到复杂二级结构时可能会导致反转录的终止，从而无法成功完成cDNA 的合成。而新一代King 反转录酶具有独特的结构域，可以破坏RNA 链间的氢键作用力，从而打开RNA 的复杂二级结构，保证反转录的正常进行。

实验结果：

图1. 使用TIANGEN FastKing RT kit（KR116，左）及国外A 公司同类产品（右）反转录小鼠RNA，

使用TIANGEN FP205 进行定量MM5 基因，展示扩增曲线和熔解曲线。RNA 使用量分别为1000 ng，100 ng，10 ng，1 ng。结果显示，TIANGEN KR116 反转录梯度清晰，Ct 值靠前，并且对于低丰度模板（1ng，蓝色箭头）的反转录具有明显优势。


 

超强的复杂模板通读能力
——可轻松通读高GC 和复杂模板

单链RNA 因链间氢键作用而存在广泛的复杂二级结构区域，普通反转录酶在遇到复杂二级结构时可能会导致反转录的终止，从而无法成功完成cDNA 的合成。而新一代King 反转录酶具有独特的结构域，可以破坏RNA 链间的氢键作用力，从而打开RNA 的复杂二级结构，保证反转录的正常进行。

实验结果：

图2. 使用TIANGEN FastKing RT kit（KR116）及A 公司同类产品分别反转录大鼠的正常RNA 样本（红色），酚类残留量大的RNA 样本（绿色），和醇类残留量大的RNA 样本（蓝色），使用TIANGEN FP205 进行定量RNC 基因，展示扩增曲线和平均Ct 值。结果显示，TIANGEN KR116 反转录后定量Ct 值靠前，并且抗逆性优秀，对于高杂质残留的模板具有明显优势。