FastKing cDNA 第一链合成试剂盒 ( 去基因组 )
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FastKing cDNA 第一链合成试剂盒 ( 去基因组

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  • ¥720 - 18800
  • TIANGEN已认证
  • 中国
  • KR116
  • 2025年12月09日
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    • 保存条件

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    • 保质期

      1 年

    • 英文名

      FastKing RT Kit (With gDNase)

    • 库存

      充足

    • 供应商

      天根生化科技(北京)有限公司

    • 规格

      20μl×25次/20μl×100次/20μl×1000次

    规格:20μl×25次产品价格:¥720.0
    规格:20μl×100次产品价格:¥2080.0
    规格:20μl×1000次产品价格:¥18800.0
    产品简介
    本试剂盒是一种高效、稳定、快速并可以去除基因组 DNA 污染的反转录系统。 本试剂盒含有高效去除基因组 DNA 的 gDNase, 有效避免 Total RNA 中基因组 DNA 的干扰; 高效反转录酶 FastKing RT Enzyme 是通过分子改造后的新型反转录酶,特别增加了疏水 motif,具有更强的 RNA 亲和性和热稳定性,从而进一步提高了其反转录效率和反应速率,并使其在通读 GC 含量高、二级结构复杂的 RNA 模板和抗逆性等方面的表现也更为的突出。
    产品特点
    ■ 高效:修饰了疏水 motif,反转效率超过 95%
    ■ 灵敏:低至 1 ng 的模板也能被准确识别
    ■ 抗逆:无惧复杂模板,抵御杂质干扰
    ■ 快速:21 min 高效制备无基因组残留的 cDNA
    下游应用
    反转录后的 cDNA 可用于常规 PCR,荧光定量 PCR,cDNA 文库构建,SAGE(基因表达连续分析),引物延伸等多种常规实验。
    21 min 的“一管式”革命
    仅需 21 min 在同一管内完成基因组去除和高效反转录过程,无需更换反应管和独立的DNase I 处理过程,相对于传统方法12 步操作所需的140 min,大大简化了操作步骤,节省了大量操作时间。
    FastKing cDNA 第一链合成试剂盒 ( 去基因组
    超强的复杂模板通读能力
                                   ——可轻松通读高GC 和复杂模板
    单链RNA 因链间氢键作用而存在广泛的复杂二级结构区域,普通反转录酶在遇到复杂二级结构时可能会导致反转录的终止,从而无法成功完成cDNA 的合成。而新一代King 反转录酶具有独特的结构域,可以破坏RNA 链间的氢键作用力,从而打开RNA的复杂二级结构,保证反转录的正常进行。
    FastKing cDNA 第一链合成试剂盒 ( 去基因组


    实验结果

    FastKing cDNA 第一链合成试剂盒 ( 去基因组
    3min 高效去除基因组DNA

    gDNase 可高效快速的去除gDNA,并直接进行反转录实验,无需繁琐的后续RNA 纯化步骤。

    1 组:不去基因组反转录;2 组:不去基因组不反转录;

    3 组:去基因组后反转录;4 组:去基因组不反转录。
    方法:以1 μg Hela 细胞RNA(有基因组残留)为模板,对TNFalpha基因(引物设计在外显子上,可以cDNA 或基因组为模板进行扩增)进行荧光定量PCR 检测。
    结果:如图所示,2 组可反映RNA 中基因组的残留情况,3 组可准确反映TNF-alpha 的真实表达水平,1 组因基因组残留而导致最终定量结果发生错误,4 组表明KR116 可以完全去除RNA 中残留的基因组DNA。
    FastKing cDNA 第一链合成试剂盒 ( 去基因组

    继承King 家族卓越品质

    超高的反转录效率
    ——反转录效率高达95%

    一般的反转录酶其反转录效率在40-60%,为增加cDNA 产量,其通过推荐更高的RNA 上样量来实现,King 反转录酶由于其特有的对于RNA 模板的高亲和力,使其反转录效率能够达到95% 以上,所以无需大量上样即可满足后续实验,既节省RNA,又使得cDNA 高纯高产。
     

    实验结果显示:不同来源反转录酶的性能比较:同比无RNaseH活性M-MLV及 AMV系列反转录酶,King Reverse Transcriptase反转录效率有明显优势。

    FastKing cDNA 第一链合成试剂盒 ( 去基因组
    超强的复杂模板通读能力
    ——可轻松通读高GC 和复杂模板

    单链RNA 因链间氢键作用而存在广泛的复杂二级结构区域,普通反转录酶在遇到复杂二级结构时可能会导致反转录的终止,从而无法成功完成cDNA 的合成。而新一代King 反转录酶具有独特的结构域,可以破坏RNA 链间的氢键作用力,从而打开RNA 的复杂二级结构,保证反转录的正常进行。

    实验结果:

    图1. 使用TIANGEN FastKing RT kit(KR116,左)及国外A 公司同类产品(右)反转录小鼠RNA,

    使用TIANGEN FP205 进行定量MM5 基因,展示扩增曲线和熔解曲线。RNA 使用量分别为1000 ng,100 ng,10 ng,1 ng。结果显示,TIANGEN KR116 反转录梯度清晰,Ct 值靠前,并且对于低丰度模板(1ng,蓝色箭头)的反转录具有明显优势。

    FastKing cDNA 第一链合成试剂盒 ( 去基因组
     

    超强的复杂模板通读能力
    ——可轻松通读高GC 和复杂模板

    单链RNA 因链间氢键作用而存在广泛的复杂二级结构区域,普通反转录酶在遇到复杂二级结构时可能会导致反转录的终止,从而无法成功完成cDNA 的合成。而新一代King 反转录酶具有独特的结构域,可以破坏RNA 链间的氢键作用力,从而打开RNA 的复杂二级结构,保证反转录的正常进行。

    实验结果:

    图2. 使用TIANGEN FastKing RT kit(KR116)及A 公司同类产品分别反转录大鼠的正常RNA 样本(红色),酚类残留量大的RNA 样本(绿色),和醇类残留量大的RNA 样本(蓝色),使用TIANGEN FP205 进行定量RNC 基因,展示扩增曲线和平均Ct 值。结果显示,TIANGEN KR116 反转录后定量Ct 值靠前,并且抗逆性优秀,对于高杂质残留的模板具有明显优势。

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    该产品被引用文献

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